綿羊人工授精技術的應用,能夠提升優質種公羊的利用率,同傳統的配種形式相比,人工授精技術能夠在減少種公羊養殖數量的情況下,提高配種母羊參與率,既可以降低種公羊養殖成本,又提升了羊群的遺傳進程。此外,人工授精技術能夠避免種公羊與種母羊直接接觸,通過對場地與器械進行消毒,防止交叉感染。人工授精易受人為因素的影響,產生受胎率低的情況。因此,養殖人員應熟練掌握每一個環節,提高人工授精受胎率。
1.1 場地準備
配置綿羊人工授精專用房間,通常包含采精室、精液質量檢驗室、輸精室,面積分別為22平方米、11平方米和22平方米,精液質量檢驗室溫度控制在20±2℃,其他室內溫度控制在18±2℃。
1.2 物品標簽
人工授精實驗室應配有專用的藥品柜、器械柜、采精器、溫度計、超聲波清洗劑、顯微鏡、液氮罐等。藥品柜內所有的試劑與藥品都應標清名稱、濃度、配置時間和有效期限等信息,使用前需要核對信息。
1.3 器械清洗
提前準備好采精器械,每只種公羊使用不同的采精杯與假陰道,以防交叉感染,參照采精公羊的總數多準備2套。采精前,對所有用具進行清洗,可使用洗衣粉浸泡半小時后,再反復使用毛刷洗刷,將泡沫或殘留物沖洗干凈,再使用蒸餾水反復沖洗2~3次,將所有用具放置在無菌紗布上晾干。
1.4 器械消毒
使用75%的酒精對溫度計、采精杯、假陰道、輸精器等玻璃器皿反復擦拭或浸泡消毒,待酒精揮發之后,依次置于蒸餾水與生理鹽水內浸泡2次。使用錫箔紙將采精或輸精用的衛生紙包好,高壓滅菌后,將烘箱溫度設置為50℃,自然烘干。反復使用75%酒精擦拭金屬開腔器2次,用4℃蒸餾水浸泡,再浸泡于生理鹽水中,最后使用無菌抹布反復擦拭2次。操作人員的衣物等需要高壓滅菌后,進行烘干處理。
2.1 采精前準備
第一,公羊準備。采精前1天,檢查配種公羊,選擇性欲、精子活力、繁殖力較強的公羊。對于第一次采精的種公羊,需提前經過訓練,再進行采精操作。將公羊帶到采精室后,對生殖器進行清潔,使公羊與母羊之間保持一定距離,禁止直接爬跨,慢慢靠近刺激種公羊產生性欲。
第二,用具準備。對假陰道進行注水打氣,在假陰道的夾層內注入溫水,注入量以到外殼與內胎容積的一半即可,用打氣槍將空氣注入其中,當假陰道另一側出現三塊間擠壓產生凸起,不再注入空氣,關閉氣嘴活塞。將凡士林涂抹于陰莖進口與假陰道的內胎,采精杯上不能涂抹凡士林。
2.2 采集操作
將公羊牽至母羊前,當公羊出現爬跨動作時,采集人員輕輕握住種公羊的陰莖根部,快速、輕柔地將陰莖插入假陰道內。種公羊的陰莖抽動幾秒便會射精,整個過程很快,采精員務必迅速地將精液收集到采精瓶中,標清公羊編號,放置在20~30℃陰涼處。
2.3 采精注意事項
采精動作要輕柔、快速、避免對種公羊刺激。采精員避免觸碰種公羊的龜頭。采精完成后,放出假陰道內胎中的水,浸泡在洗衣粉溫水中,采集完成后立刻清洗。配種期間應提高種公羊飼料中蛋白飼料量,每日增加2個雞蛋。成年種公羊每日最多采精1~2次,連采3天后休息1天。
3.1 精液量、色澤與氣味
公羊每次的精液量為0.5~2毫升,精液由七成精清與三成精子構成。
正常公羊精液的顏色為乳白色,呈云霧狀,紅色、綠色、黃色或褐色精液均不符合要求。
公羊精液無氣味,若有酸臭、腐敗味,則不符合要求。
3.2 精子活力
使用無菌玻璃棒取一滴精液,置于載玻片中心,將蓋玻片輕輕蓋上,保證載玻片上沒有氣泡,使用顯微鏡進行觀察。精子的運動方式為“前進直線”顯示其具備受精能力,“繞圈”與“搖擺”運動則不具備授精能力。如100%精子運動方式為“前進”,評分為1.0分,如50%精子運動為“前進”,為0.5分。

3.3 精液密度
精子密度分為3個級別,分別為密(精子與精子相距1個精子長度之內)、中(精子之間的距離是一個精子長度)、稀(視野范圍內精子數量較少)。
3.4 輸精精子要求
精子活力在0.7之上,冷凍精子活力0.3之上,精液密度為中或密。
足夠劑量的精液與精子的活力是保證授精成功的前提條件,稀釋精液能夠為精子提供營養,提升精子活力,并可以增加精液量,將有限的精液輸送給更多母羊。通過對精液品質的檢測與精子的密度,進行適當比例稀釋,確保精液在稀釋后仍具備正常的活力,符合輸精標準。
4.1 配制稀釋精液
稀釋液的配方包括生理鹽水稀釋液、奶汁稀釋液、葡萄糖卵黃稀釋液等,酸堿度為弱酸性,能夠延長精子存活時長、減少精子活動。生理鹽水稀釋液是人工授精技術中常用的稀釋液,原料造價低、操作簡便。將采集到的精液直接注射至生理鹽水進行稀釋,亦可使用提前過濾或消毒的氯化鈉溶液進行稀釋,一般可稀釋2~3倍。生理鹽水稀釋液稀釋倍數較低,在常溫下僅可以保存6小時,人工授精時現用現配。葡萄糖卵黃稀釋液或奶汁稀釋液稀釋倍數較大,配制方法較為繁瑣,但營養成分較高,能夠為精液提供更多的營養,稀釋倍數高達7倍。
4.2 精液的運輸
當運送距離較短時,精液可保存于5毫升的小試管內,置于保溫瓶中,精液量不宜超過小試管容量的2/3,并將試管口封閉好,以免運輸中精液灑出。運送距離較遠的情況下,需在低溫或冷凍環境中保存精液,同時避免途中產生劇烈震蕩,降低精子的死亡率。運送的精液應標清來源、采集時間、精液量、精子活力與精子密度。
4.3 精液的保存
通常情況下,精液的保存方式有3種,冷凍保存、低溫保存和室溫保存。精子的代謝水平、活動能力及運動速率在不同的溫度下,存在較大差異。精液在20℃的室溫條件下保存,活力較低、運動能力減弱,存活時間長,可保存1天;精液在低溫保存的溫度為0~5℃,運動能力較弱、代謝水平較低,代謝廢物較少,精子活力較高,且運送方便,保存成本較低,保存時間為2~3天;將精液儲存于液氮貯精罐中冷凍保存,可長期保存精液,延長精液壽命。
5.1 輸精準備
選擇發情母羊作為授精對象,將發情母羊牽至輸精室,將其固定在輸精架上,母羊外陰部使用酒精棉球擦拭。
5.2 輸精操作
輸精員將金屬開腔器緩慢、輕柔地插入種母羊的陰道內,深度為0.5~1.0厘米,緩慢注入精液。待精液輸入完畢后,緩緩取出精槍。輸精完成后,使母羊保持原有姿勢5~10分鐘后,將其牽走。
5.3 輸精時間
母羊發情時間短暫,第一次輸精通常安排在上午8~10點,第二次輸精應于8小時后進行。以保證母羊人工授精受胎率。
綿羊人工授精環節較多,操作人員應嚴格遵守操授精作流程,提升綿羊人工授精質量。