豬圓環病毒病血清學調查研究*

蔡元慶，張擁軍，趙云龍，徐學栓，黃紅娟，張弦，楊文剛，周玉東，王春偉，盛濤*

（1.第七師胡楊河市畜牧獸醫站，新疆 胡楊河 834034；2.第七師一二七團農業發展中心；3.第七師一二四團農業發展中心；4.第七師一二六團農業發展中心；5.第七師一三一團農業發展中心）

豬圓環病毒病（Porcine Circovirus Disease，PCVD）是由豬圓環病毒（Porcine circovirus，PCV）感染引起的一種免疫抑制性疾病。健康豬感染豬圓環病毒會抑制機體的免疫反應，從而引發不同階段豬發生多系統衰竭綜合征、豬呼吸道疾病綜合征、腸炎、亞臨床感染、繁殖障礙性疾病、豬皮炎腎病綜合征等不同病癥[1]。自2001年我國首次發現豬圓環病毒以來，該病呈逐年增加趨勢，嚴重影響著養豬業的健康發展，給養豬業造成較大經濟損失。為掌握第七師胡楊河市轄區豬圓環病毒病感染情況，2021年采集轄區內39個豬場共384份血清開展豬圓環病毒病抗體檢測。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 樣品

采集第七師胡楊河市39個豬場育肥豬血液384份，經3 000 r/min離心10 min，取上層血清分裝于Ep管中，-20 ℃保存備用。

1.1.2 試驗試劑

豬圓環病毒2型抗體酶免檢測試劑盒，購自哈爾濱元亨生物藥業有限公司，生產批號：PCV20210517E。

1.2 試驗方法

1.2.1 檢測方法

使用豬圓環病毒2型抗體酶免檢測試劑盒，按照試劑盒操作說明進行，具體步驟：（1）在反應板上標記樣品、陰性對照和陽性對照位置，并做好記錄。配置洗滌液，濃縮洗滌液20倍稀釋。（2）分別在相應孔中按100 μL/孔加入陰性對照（2孔）和陽性對照（2孔）原液。在待檢樣品孔加入80 μL樣品稀釋液和20 μL待檢樣品，振蕩混勻，封膜，37 ℃孵育30 min。（3）取出反應板，揭掉封膜，倒掉各孔中液體，拍凈。每孔加滿洗滌液，靜置30 s，重復洗滌5次，最后在吸水紙上拍凈。（4）每孔加入酶結合物液100 μL，貼上封膜，37 ℃孵育30 min。（5）再取出反應板，揭掉封膜，倒掉各孔中液體，拍凈。每孔加滿洗滌液，靜置30 s，重復洗滌5次，最后在吸水紙上拍凈。（6）每孔加入底物液A50 μL，再加入底物液B50 μL，輕輕振蕩混勻，37 ℃避光顯色15 min。（7）每孔加入終止液50 μL，輕輕振蕩混勻，酶標儀450 nm波長測定各孔OD450值。

1.2.2 判定標準

兩孔陰性對照OD450平均值≤0.15，兩孔陽性對照OD450平均值≥0.60，試驗成立；臨界值=陽性對照OD450平均值×0.25；被檢樣品OD450值＜臨界值，為豬圓環病毒2型抗體陰性，被檢樣品OD450值≥臨界值，為豬圓環病毒2型抗體陽性。

2 檢測結果

2.1 對照組結果

陰性對照OD450平均值=（OD1+OD2）/2=（0.049+0.056）/2=0.052 5。

陽性對照OD450平均值=（OD3+OD4）/2=（1.598+1.665）/2=1.631 5。

試驗結果判定成立。被檢樣品OD450值≥臨界值=1.631 5×0.25=0.407 9，為豬圓環病毒2型抗體陽性。

2.2 檢測結果（表1）

表1 豬圓環病毒2型抗體檢測結果

2.3 結果與分析

2.3.1 免疫豬場豬圓環病毒2型抗體檢測結果

對35個免疫豬場的340份血清進行抗體檢測，陽性數322份，陽性率94.7%，高于國家70%標準，免疫效果良好。

2.3.2 未免疫豬場豬圓環病毒2型抗體檢測結果

對4個未免疫豬場的44份血清進行抗體檢測，陽性數44份，陽性率100%，說明豬群存在豬圓環病毒感染。

3 討論

3.1 免疫豬場

35個免疫豬場抗體陽性率94.70%，說明豬場對豬圓環病毒病的重視程度很高，選用高效的疫苗，并按照免疫程序免疫，取得了良好的免疫效果。

3.2 未免疫豬場

4個未免疫豬場抗體陽性率100%，表明豬圓環病毒病已在本轄區流行，對轄區的養豬業發展造成了較大影響。因此豬場應掌握本場豬圓環病毒感染情況，選用高效豬圓環病毒病疫苗，將豬圓環病毒病的免疫列入本場免疫程序，同時加強抗體監測，逐步淘汰帶毒豬，建立健康豬群。

4 綜合防控

豬圓環病毒病目前沒有行之有效的治療方法和藥物，豬場應將豬圓環病毒病免疫列入到本場的免疫程序，14日齡豬進行第一次免疫接種，感染嚴重豬場應加強免疫1次，臨產母豬在產前1個月加強免疫1次。免疫豬群應定期開展抗體檢測，對抗體不達標豬群進行加強免疫，確保疫苗對豬群的有效保護。同時，加強豬場豬瘟、豬藍耳等免疫抑制病的基礎免疫工作，提升豬圓環病毒病的免疫效果[2]。

飼養管理方面。一是提高豬群飼料的蛋白質、氨基酸、維生素和微量元素等水平，增強豬群的免疫力和抵抗力；二是要建立完整的生物安全體系，對進出場的人、車、物嚴格管控，嚴防外部感染，各生產單元進行有效物理隔離，以防交叉感染；三是同批次豬全進全出，避免將不同日齡的豬混群飼養，從而減少豬群之間接觸感染機會；四是降低飼養密度，圈舍保持通風，將清洗消毒工作貫穿于養豬生產的各個環節，降低豬場病原微生物，減少或杜絕豬群感染風險。