濾膜法、多管發酵法檢驗生活飲用水中微生物的比較

劉素玉

摘 要：在枯水期采集200份水樣（出廠水水樣100份，末梢水水樣100份），豐水期采集水樣200份（出廠水水樣100份，末梢水水樣100份）。對所有水樣分別采取濾膜法、多管發酵法檢驗，比較兩種檢測方法的微生物檢出情況。結果表明，多管發酵法對枯水期的大腸菌群總檢出率（23.50%）高于濾膜法（16.00%），豐水期的大腸菌群總檢出率（15.00%）高于濾膜法（9.00%），出廠水的大腸菌群總檢出率（13.50%）高于濾膜法（8.50%），末梢水的大腸菌群總檢出率（24.50%）高于濾膜法（16.50%），差異均有統計學意義（P＜0.05）。在生活飲用水的微生物檢驗中，采用多管發酵法的檢出效果優于濾膜法，可作為水監測的首選方法。

關鍵詞：生活飲用水；微生物檢驗技術；濾膜法；多管發酵法

Abstract： In the dry period， 200 water samples were collected （100 water samples from the factory， 100 water samples from the end water）， and 200 water samples were collected in the rich period （100 water samples from the factory， 100 water samples from the end water）. All water samples were tested by the filter membrane method and multi-tube fermentation method， and the microbial detection of the two testing methods were compared. The results show that the total detection rate of coliform in the dry water period （23.50%） is higher than that in the membrane method （16.00%）， the total detection rate of coliform in the rich water period （15.00%） is higher than that in the membrane method （9.00%）， the total detection rate of coliform in the factory water （13.50%） is higher than that in the membrane method （8.50%）， and the total detection rate of coliform in the end water （8.50%） is higher than that in the membrane method. The total coliform detection rate （24.50%） is higher than the membrane test （16.50%）， the difference is statistically significant （P＜0.05）. In the microbiological testing of drinking water， the detection effect of the multi-tube fermentation method is better than that of the membrane test， which can be used as the preferred method for water monitoring.

Keywords： domestic drinking water; microbiological testing technology; filter membrane method; multi-tube fermentation method

生活飲用水是人們日常活動中不可缺少的物質，合格的水質量是保障居民日常生活的基礎。大腸菌群超標是常見的生活飲用水質量問題，當生活飲用水中的大腸埃希菌、耐熱大腸菌群等超標時，使用人群容易爆發水源性腸道傳染病，給家庭、社會醫療增加負擔[1]。在生活飲用水日常監測工作中，通常需要經過微生物檢驗來了解水中大腸菌群的含量，以便采取措施來改善飲用水質量，而不同微生物檢驗方法的檢驗效果存在差異。本研究觀察比較了濾膜法、多管發酵法兩種方法對生活飲用水中大腸菌群的檢驗效果。

1 材料和方法

1.1 材料與設備

試管、微孔濾膜（廣東環凱生物科技有限公司，規格：直徑47 mm，孔徑0.45 μm）、顯微鏡（重慶市奧特光學儀器有限責任公司，愈械注準20192220096，型號規格B203）、無齒鑷子、無油隔膜真空泵（四川福茂元生物科技有限公司，規格型號VP-10L）、培養皿（90 mm×90 mm）、恒溫培養箱（松下冷鏈大連有限公司，遼械注準20182220097，規格MIR-180）、臺式蒸汽壓力滅菌器（騰氏常州醫療設備有限公司，蘇械注準20182570922，規格型號2540EKA）。

1.2 水樣采集

依據工作的要求，選取本地區20個監測點，開展供水工程的水質采樣監測。在枯水期采集水樣200份（出廠水水樣100份，末梢水水樣100份），豐水期采集水樣200份（出廠水水樣100份，末梢水水樣100份），對所有水樣開展研究。

1.3 檢測方法

檢測依據為《中華人民共和國水污染防治法》《生活飲用水標準檢測方法 微生物指標》（GB/T 5750.12—2006），檢測結果判定依據《生活飲用水衛生標準》（GB 5749—2022）。

1.3.1 濾膜法檢驗

將蒸餾水裝入燒杯內，使用酒精燈對微孔濾膜加熱滅菌，沸騰水浴15 min/次，取出換水繼續煮沸滅菌，共3次。用鑷子夾出濾膜，以粗糙面向上置于無菌濾床上。取待檢測水樣100 mL注入，進行抽濾，抽氣5 s，使細菌被截留。用鑷子將濾膜轉移到紅亞硫酸鈉培養基上，裝入恒溫箱，37 ℃條件培養1 d。將濾膜置于顯微鏡下計數和鑒定大腸菌群數。

1.3.2 多管發酵法檢驗

培養液制備：蒸餾水1 000 mL+蛋白胨25 g+氯化鈉15 g+乳糖15 g，加熱牛肉膏10 g使其充分溶解，調節pH值為7.1～7.5，加1.5%溴甲酚紫乙醇溶液2 mL，混合均勻，裝入試管內后高溫（110～120 ℃）高壓滅菌20 min，取出貯存備用。

準備15個試管，分成3份，每份5管。第1份5個管內裝有培養液5 mL，分別加水樣10 mL。第2份5個管內裝有培養液10 mL，分別加水樣1 mL。3份5個管內裝有10 mL培養液，加入1∶10稀釋的水樣。將所有裝有樣本的試管置于37 ℃恒溫箱內培養1 d。取出試管進行觀察，無產酸產氣說明陰性；有產酸產氣情況則轉種植于伊紅美藍瓊脂板上，放入恒溫箱37 ℃培養1 d。取出，肉眼觀察菌落形態，取染色顏色較深區域的中心部位菌落，使用顯微鏡計數及鑒定大腸菌群數。

1.4 觀察比較指標

①比較濾膜法、多管發酵法對枯水期水樣的大腸菌群檢出情況。②比較濾膜法、多管發酵法對豐水期水樣的大腸菌群檢出情況。③比較濾膜法、多管發酵法對出廠水的大腸菌群檢出情況。④比較濾膜法、多管發酵法對末梢水的大腸菌群檢出情況。

1.5 統計學分析

數據分析SPSS 25.0，計數資料用%表示，行χ2檢驗，P＜0.05表示有統計學意義。

2 結果與分析

2.1 枯水期大腸菌群檢出情況對比

如表1所示，多管發酵法對枯水期的大腸菌群總檢出率（23.50%）高于濾膜法（16.00%）（P＜0.05）。

2.2 豐水期大腸菌群檢出情況對比

如表2所示，多管發酵法對豐水期的大腸菌群總檢出率（15.00%）高于濾膜法（9.00%）（P＜0.05）。

2.3 出廠水大腸菌群檢出情況對比

如表3所示，多管發酵法對出廠水的大腸菌群總檢出率（13.50%）高于濾膜法（8.50%）（P＜0.05）。

2.4 末梢水大腸菌群檢出情況對比

如表4所示，多管發酵法對末梢水的大腸菌群總檢出率（24.50%）高于濾膜法（16.50%）（P＜0.05）。

3 結論與討論

當前，居民的飲用水主要來源是地表水、淡水湖泊、泉眼、地下水等，通常水源有大量動植物繁衍，加上水產養殖、各類垃圾排泄物的影響，水的質量難以保證[2]。生活飲用水質量會直接影響居民的生活及其身體健康，長期飲用微生物超標的飲用水，容易發生介水傳染病，隨著水污染越來越嚴重，居民飲用水的安全系數不斷降低[3]。目前，為使水質符合生活飲用水質量相關標準，一般都會對水進行常規過濾、消毒等處理，但水質不合格情況仍時有發生，需要進行監測[4]。

多管發酵法、濾膜法檢驗是常用的生活飲用水檢驗方法，均不需要昂貴的設備，人員經過基本的技術培訓便可以操作，易于在基層中推廣普及。其中多管發酵法是將待檢測水樣稀釋后，分別接種到培養液中培養，再通過觀察、計數細菌生長情況判斷水質，其優勢是不受濁度的影響，但檢測操作煩瑣、耗費時間長[5]。濾膜法檢驗是將待測水樣注入已滅菌的微孔濾膜上，抽濾使微生物被截留在濾膜上，再進行培養、鑒定，該方法操作簡單、檢查快速，可以去除樣品中其他雜質的干擾[6]。本研究結果顯示，多管發酵法、濾膜法檢驗均可以檢驗出飲用水中的大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌、雜菌，其中多管發酵法對枯水期、豐水期、出廠水、末梢水的大腸菌群總檢出率均高于濾膜法檢驗（P＜0.05）。因此，在生活飲用水豐水期、枯水期、出廠水、末梢水的監測中，使用多管發酵法檢驗對大腸菌群、雜菌等微生物的檢出率更高、更加準確，可作為優先選擇的水監測方法。

參考文獻

[1]許新燕.淺析微生物檢驗技術在生活飲用水監測中的應用[J].中文科技期刊數據庫（引文版）醫藥衛生，2022（3）：185-187.

[2]楊晶，邵連軍.2017—2019年某鐵路轄區生活飲用水微生物指標監測分析[J].中國國境衛生檢疫雜志，2021，44（2）：137-141.

[3]楊麗娟.多管發酵法在居民日常生活飲用水微生物檢測中的應用[J].首都食品與醫藥，2021，28（8）：107-108.

[4]劉柳影.生活飲用水檢驗中兩種微生物檢驗方法的比較分析[J].首都食品與醫藥，2021，28（18）：108-110.

[5]黃曾，趙衛紅，丁欣悅，等.2018年豐城市生活飲用水微生物監測結果分析及解決措施[J].中國當代醫藥，2021，28（15）：189-191.

[6]屈龍，趙明強，王煥新，等.2012-2018年北京市昌平區農村生活飲用水微生物監測[J].首都公共衛生，2021，15（1）：51-55.