越南槐根的抗HIV活性成分研究

魏鑫, 張衛(wèi), 楊欣, 王菊, 張麗艷, 危英, 周英

越南槐根的抗HIV活性成分研究

魏鑫, 張衛(wèi), 楊欣, 王菊, 張麗艷, 危英, 周英*

(貴州中醫(yī)藥大學(xué)，貴陽 550025)

為研究越南槐()根的抗HIV蛋白酶活性成分及其分子對(duì)接機(jī)制，采用硅膠、MCI、Sephadex LH-20等多種色譜分離方法，對(duì)越南槐根的化學(xué)成分進(jìn)行分離，采用HIV蛋白酶對(duì)化合物進(jìn)行體外抗HIV活性篩選，運(yùn)用分子對(duì)接手段初步探究活性化合物與HIV-1蛋白酶的結(jié)合機(jī)制。結(jié)果表明，從越南槐中共分離得到8個(gè)化合物，根據(jù)波譜數(shù)據(jù)分別鑒定為三葉豆紫檀苷 (1)、苦參堿 (2)、-acetylnicotinamide (3)、2′--甲基腺苷 (4)、毛蕊異黃酮苷 (5)、玫瑰花苷 (6)、環(huán)廣豆根素 (7)、芒柄花苷 (8)，此外還分離得到塑化劑衍生物鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(9)和鄰苯二甲酸二異丁酯(10)。抗HIV蛋白酶活性測(cè)試顯示化合物1和2的IC50分別為13.2和38.6g/mL，分子對(duì)接表明其與HIV蛋白酶有一定的結(jié)合作用。化合物3～5為首次從該植物中分離得到，化合物1和2顯示中等的抗HIV蛋白酶活性。

越南槐；化學(xué)成分；分離鑒定；抗HIV活性；分子對(duì)接

獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)是由人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的重大疾病[1]。HIV病毒主要有2種亞型，分別為1型和2型，HIV-1型為當(dāng)前主要流行毒株[1–2]。HIV-1蛋白酶(HIV-1 protease, HIV PR)是天冬氨酸屬蛋白水解酶，可以剪切多聚蛋白，形成病毒粒子從而感染細(xì)胞，現(xiàn)已經(jīng)成為抗艾滋病藥物開發(fā)的關(guān)鍵靶點(diǎn)之一[1]。越南槐()為豆科植物，其干燥根和根莖又名山豆根，為傳統(tǒng)抗感染苗藥，性味苦寒，有毒，歸肺、胃經(jīng)，主要在廣西、貴州、云南、江西等地分布, 具有清熱解毒，消腫利咽等功效，用于乳蛾喉痹，咽喉腫痛，齒齦腫痛等癥[3]。現(xiàn)代藥學(xué)研究已報(bào)道從越南槐植物中分離出多種類型化學(xué)成分，以黃酮類和生物堿類結(jié)構(gòu)為主，此外還包括三萜類、多糖及其他成分，具有抗病毒、抗菌、抗炎等藥理活性[4–6]，然而目前對(duì)于越南槐根的抗病毒成分研究大多集中在總提取物上，抗病毒活性單體物質(zhì)基礎(chǔ)還不夠明確。為深入研究越南槐根的抗HIV化學(xué)成分, 本研究對(duì)越南槐根的乙酸乙酯部位和正丁醇部位進(jìn)行了化學(xué)成分的分離和鑒定，并對(duì)分離得到的單體化合物進(jìn)行體外抗HIV蛋白酶的活性篩選，為該植物的開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 儀器和材料

核磁共振譜1H、13C和DEPT譜圖測(cè)試采用Bruker Avance NEO 600 MHz核磁共振波譜儀(瑞士布魯克公司)；半制備液相系統(tǒng)LC52購(gòu)自Separation (北京)科技公司；RE-5210A/ER-3000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)；SHZ-DⅢ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)；薄層色譜(TLC)硅膠板和柱層析硅膠(青島海洋化有限公司)；Sephadex LH-20凝膠(GE Healthcare Bio-Sciences, Uppsala, Sweden); MCI GEL-CHP 20P (Mitsubishi Chemical Co., Ltd. Japan)；二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、甲醇、乙醇購(gòu)自天津市富宇精細(xì)化工有限公司, Senso Lyte 520 HIV-PR蛋白酶試劑盒購(gòu)自Anapec公司(美國(guó))。

山豆根藥材于2019年9月購(gòu)自貴州三力制藥有限公司，經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)魏升華教授鑒定為豆科植物越南槐()的干燥塊根，標(biāo)本(WX_20190901)保存于貴州中醫(yī)藥大學(xué)。

1.2 提取和分離

山豆根藥材20 kg干燥后粉碎，用工業(yè)甲醇50 L于70 ℃加熱回流提取3次，每次2 h，合并3次提取液，減壓回收濃縮至浸膏649.1 g，將浸膏充分混懸于蒸餾水1.5 L中，分別用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，然后將萃取液減壓濃縮得各部位萃取物浸膏。

取乙酸乙酯部位萃取浸膏(200 g)硅膠拌樣，使用不同梯度的二氯甲烷:甲醇[1:0→0:1,(下同)]進(jìn)行洗脫，經(jīng)TLC檢測(cè)合并極性相同的部分。獲得9個(gè)極性段位(RJ～RS)，保存。取RK部分(9.0 g)過硅膠柱，用石油醚-乙酸乙酯(20:1→0:1)進(jìn)行梯度洗脫，TLC檢測(cè)合并后濃縮，得到5個(gè)組分(RK1～RK5),其中，RK4 (2.0g)上凝膠柱等度洗脫，得到4個(gè)組分(RK4.1～RK4.4)，組分RK4.1 (900 mg)經(jīng)Sephadex LH-20甲醇等度洗脫，得3個(gè)組分(RK4.1.1～RK4.1.3),RK4.1.3 (246.5 mg)經(jīng)過半制備HPLC梯度洗脫(流動(dòng)相為甲醇-水), 得到化合物7 (5.4 mg)；RK4.4 (235.0 mg)經(jīng)Sephadex LH-20 (甲醇)洗脫，得到化合物2 (87.1 mg)。取RM部分(978.7 mg)經(jīng)Sephadex LH-20 (甲醇)洗脫，得到4個(gè)組分(RM1～RM4)，其中，RM2部分(633.6 mg)過MCI GEL-CHP 20P (甲醇-水，3:7→1:0)梯度洗脫，得到化合物3 (10.5 mg)；RM3部分(70.2 mg)經(jīng)過制備薄層板得到化合物1 (16.4 mg)；RM4部分(25.5 mg)過半制備HPLC梯度洗脫(流動(dòng)相為甲醇-水)，得到化合物4 (4.1 mg)。取RO部分(2.26 g)經(jīng)過硅膠柱，使用不同梯度的二氯甲烷:甲醇(1:0→0:1)梯度洗脫，分離得到5個(gè)組分(RO1～RO5)，其中，RO2部分(634.6 mg)過Sephadex LH-20 (甲醇)洗脫，分離得到4個(gè)組分(RO2.1～ RO2.4), RO2.2 (366.9 mg)經(jīng)過MCI GEL-CHP 20P (甲醇-水，3:7→1:0)和半制備HPLC (流動(dòng)相為甲醇-水)梯度洗脫，得到化合物8 (4.4 mg)。另外從RQ (646 mg)中經(jīng)Sephadex LH-20 (甲醇)等度洗脫、MCI GEL-CHP 20P (甲醇-水，3:7→1:0)梯度洗脫，最后運(yùn)用制備薄層板得到塑化劑衍生物化合物9 (19.4 mg)和10 (47.8 mg)。

取正丁醇部位萃取物400.0 g，經(jīng)硅膠柱層析,二氯甲烷-甲醇(1:0→0:1)梯度洗脫，TLC合并相近極性流分，獲得8個(gè)極性段位(RS～RZ)，保存。取RU (8.40 g)經(jīng)過ODS柱，使用甲醇-水(1:9→1:0)梯度洗脫，分離得到6個(gè)組分(RU1～RU 6)，其中, RU3 (194.9 mg)經(jīng)過半制備HPLC (流動(dòng)相為甲醇-水)梯度洗脫，得到化合物5 (6.8 mg)；RU5 (31.5 mg)經(jīng)過半制備HPLC梯度洗脫(流動(dòng)相為甲醇-水)，得到化合物6 (15.6 mg)。

1.3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物3 C8H8N2O2, 白色粉末;1H NMR (600 MHz, CD3OD):9.02 (1H, d,=2.0 Hz, H-2), 8.69 (1H, dd,= 4.9, 1.6 Hz, H-6), 8.29 (1H, dt,= 8.0, 2.0 Hz, H-4), 7.55 (1H, dd,= 5.0, 7.9 Hz, H-5), 1.94 (3H, s, CH3);13C NMR (150 MHz, CD3OD):175.1 (C-2′), 168.5 (C-1′), 151.5 (C-2), 148.1 (C-6), 136.0 (C-4), 130.0 (C-3), 123.8 (C-5), 20.8 (-CH3)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9～11]基本一致，故鑒定為- acetylnicotinamide。

化合物4 C11H15N5O4, 白色粉末; ESI-MS: 304.1 [M + Na]+;1H NMR (600 MHz, CD3OD):8.34 (1H, s, H-2), 8.19 (1H, s, H-8), 6.06 (1H, d,= 6.0 Hz, H-1′), 4.49 (1H, dd,= 3.0 Hz, 4.9 Hz, H-3′), 4.43 (1H, dd,= 5.0 Hz, H-2′), 4.16 (1H, q,= 2.8 Hz, H-4′), 3.89 (1H, dd,= 2.5 Hz, 12.6 Hz, H-5′a), 3.75 (1H, dd,= 2.5 Hz, 12.6 Hz, H-5′b), 3.42 (3H, s, -OCH3);13C NMR (150 MHz, CD3OD):156.2 (C-6), 152.2 (C-8), 148.6 (C-4), 140.5 (C-2), 119.6 (C-5), 87.9 (C-4′), 87.0 (C-2′), 83.2 (C-1′), 69.4 (C-3′), 61.8 (C-5′), 57.3 (C-OCH3)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]一致，故鑒定為2′--甲基腺苷。

化合物5 C22H22O10, 黃色油狀; ESI-MS: 469.0 [M + Na]+;1H NMR (600 MHz, CD3OD):8.24 (1H, s, H-2), 8.15 (1H, d,= 8.9 Hz, H-5), 7.25 (1H, d,= 2.3 Hz, H-8), 7.22 (1H, dd,= 8.9, 2.3 Hz, H-6), 7.18 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′), 6.98 (1H, dd,= 8.1, 2.0 Hz, H-6′), 6.86 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5′), 5.11 (1H, d,= 7.3 Hz, H-1″), 3.90 (3H, s, -OCH3);13C NMR (150 MHz, CD3OD):178.1 (C-4), 163.5 (C-7), 159.2 (C-9), 155.3 (C-2), 148.8 (C-4′), 148.0 (C-3′), 128.3 (C-5), 126.2 (C-3), 124.6 (C-1′), 122.9 (C-6′), 120.2 (C-10), 117.1 (C-6), 116.2 (C-2′), 114.0 (C-5′), 105.0 (C-8), 101.8 (C-1″), 78.4 (C-5″), 77.9 (C-3″), 74.7 (C-2″), 71.3 (C-4″), 62.5 (C-6″), 56.5 (4′-OCH3)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]一致，故鑒定為毛蕊異黃酮苷 。

化合物6 C19H30O8, 黃色油狀; ESI-MS: 409.1 [M + Na]+;1H NMR (400 MHz, CD3OD):5.97 (1H, d,= 15.6 Hz, H-7), 5.87 (1H, q,= 1.4 Hz, H-4), 5.73 (1H, dd,= 15.6, 7.2 Hz, H-8), 4.52 (1H, dd,= 14.4, 7.1 Hz, H-9), 4.27 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1′), 3.85 (1H, dd,= 11.9, 2.2 Hz, H-6′), 2.61 (1H, d,= 17.0 Hz, H-2a), 2.17 (1H, d,= 17.1 Hz, H-2b), 1.94(1H, d,= 1.3 Hz, H-13), 1.29 (3H, d,= 6.4 Hz, H-10), 1.04 (3H, s, H-11), 1.02 (3H, s, H-12);13C NMR (150 MHz，CD3OD):200.0 (C-3), 132.4 (C-7), 132.4 (C-8), 125.8 (C-4), 99.9 (C-1′), 77.0 (C-3′), 76.8 (C-5′), 73.6 (C-9), 73.3 (C-2′), 70.3 (C-4′), 61.5 (C-6′), 49.4 (C-2), 41.1 (C-1), 23.3 (C-13), 22.1 (C-12), 20.9 (C-11), 18.2 (C-10)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]一致，故鑒定為玫瑰花苷。

化合物7 C30H34O4, 黃色粉末; [α]D20-25.9° (0.06, MeOH); ESI-MS: 481.2 [M + Na]+;1H NMR (600 MHz, CD3OD):7.60 (1H, d,= 8.7 Hz, H-5), 7.12 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6′), 6.99 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2′), 6.52 (1H, d,= 8.7 Hz, H-6), 6.37 (1H, d,= 9.7 Hz, H-6″), 5.71 (1H, d,= 9.7 Hz, H-7″), 5.33 (1H, dd,= 12.7, 3.0 Hz, H-2), 5.18～5.28 (2H, m, H-2″, 12″), 3.28 (4H, m, H-1″, 11″), 3.00 (1H, dd,= 12.8, 16.9 Hz, H-3a), 2.73 (1H, dd,= 3.0, 16.9 Hz, H-3b), 1.73 (3H, s, H-15″), 1.72 (3H, s, H-14″), 1.61 (3H, s, H-4″), 1.60 (3H, s, H-5″), 1.42 (6H, s, H-9″, 10″);13C NMR (150 MHz, CD3OD):192.7 (C-4), 162.6 (C-7), 161.6 (C-9), 150.5 (C-4′), 131.5 (C-1′), 131.2 (C-7″), 130.7 (C-13″), 130.8 (C-3″), 129.0 (C- 5′), 127.2 (C-6′), 125.3 (C-5), 122.5 (C-2′), 121.9 (C- 2″, 12″), 122.1 (C-6″), 121.1 (C-3′), 115.7 (C-8), 113.7 (C-10), 109.4 (C-6), 79.3 (C-2), 76.0 (C-8″), 43.4 (C-3), 27.9 (C-11″), 26.8 (C-9″, 10″), 24.6 (C-5″, 15″), 21.6 (C-1″), 16.7 (C-4″, 14″)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]一致，故鑒定為環(huán)廣豆根素 。

化合物8 C22H22O9, 白色粉末; ESI-MS: 453.0 [M + Na]+;1H NMR (600 MHz, CD3OD):8.23 (1H, s, H-2), 8.15 (1H, d,= 8.9 Hz, H-5), 7.49 (2H, d,= 8.8 Hz, H-2′, 6′), 7.26 (1H, d,= 2.3 Hz, H-8), 7.22 (1H, dd,= 8.9, 2.3 Hz, H-6), 6.99 (2H, d,= 8.8 Hz, H-3′, 5′), 5.11 (1H, d,= 6.7 Hz, H-1″), 3.83 (3H, s, -OCH3);13C NMR (150 MHz, CD3OD):176.6 (C-4), 162.5 (C-7), 159.8 (C-4′), 158.1 (C-9), 153.9 (C-2), 130.0 (C-2′, 6′), 126.8 (C-5), 124.7 (C-1′), 123.7 (C-3), 118.8 (C-10), 115.7 (C-6), 113.5 (C-3′, 5′), 103.6 (C-8), 100.4 (C-1″), 77.0 (C-3″), 76.5 (C- 5″), 73.4 (C-2″), 69.9 (C-4″), 61.1 (C-6″), 54.3 (-OCH3)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]一致，故鑒定為芒柄花苷 。

化合物9 C24H38O4, 黃色油狀; ESI-MS: 413.4 [M + Na]+;1H NMR (600 MHz, CDCl3):7.73 (2H, m, H-2, 5), 7.55 (2H, m, H-3, 4), 4.24 (4H, qd,= 10.9, 6.0 Hz, H-1′, 1″), 1.71 (2H, dt,= 12.3, 6.1 Hz, H-2′, 2″), 1.47～1.31 (16H, m, H-3′, 4′, 5′, 7′, 3″, 4″, 5″, 7″), 0.97～0.90 (12H, m, H-6′, 8′, 6″, 8″);13C NMR (150 MHz, CDCl3):68.1 (C-1″), 38.8 (C-2′, 2″), 30.4 (C-3′, 3″), 28.9 (C-4′, 4″), 23.0 (C-5′, 5″), 14.0 (C-6′, 6″), 23.8 (C-7′, 7″), 11.0 (C-8′, 8″), 68.1 (C-1′), 130.9 (C-3, 4), 128.8 (C-2, 5), 132.5 (C-1, 6), 167.7 (C-7, 8)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]一致，故鑒定為鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯。

化合物10 C16H22O4, 黃色油狀;1H NMR (600 MHz, CDCl3):7.74 (2H, dd,= 5.7, 3.3 Hz, H- 2, 5), 7.55 (2H, dd,= 5.7, 3.3 Hz, H-3, 4), 4.11 (4H, d,= 6.7 Hz, H-1′, 1″), 2.07～2.04 (2H, m, H-2′, 2″), 1.01 (12H, d,= 6.7 Hz, H-3′, 4′, 3″, 4″);13C NMR (150 MHz, CDCl3):71.8 (C-1′, 1″), 27.7 (C-2′), 27.8 (C-2″), 19.2 (C-3′, 4′, 3″, 4″), 130.9 (C-3, 4), 128.8 (C- 2, 5), 132.4 (C-1, 6), 167.7 (C-7, 8)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]一致，故鑒定為鄰苯二甲酸二異丁酯。

1.4 體外抗HIV活性測(cè)定和分子對(duì)接

使用SensoLyte 520 HIV PR檢測(cè)試劑盒，測(cè)定單體化合物對(duì)HIV-1蛋白酶的抑制活性[19]；選擇HIV蛋白酶的晶體結(jié)構(gòu)(PDB ID:1QBS:1.80 ?)作為分子對(duì)接的研究對(duì)象[20]。采用藥物分子設(shè)計(jì)模擬SYBYL 2.1.1 軟件的Surflex-Dock和模塊完成分子對(duì)接研究。初始篩選采用標(biāo)準(zhǔn)模式進(jìn)行對(duì)接，修飾后的小分子與靶標(biāo)蛋白進(jìn)行半柔性對(duì)接，對(duì)接過程中閾值參數(shù)為0.5，其他參數(shù)為系統(tǒng)缺省值。選用Gasteriger-Huckel 電荷進(jìn)行分子優(yōu)化；基于Ligand模式產(chǎn)生活性口袋，優(yōu)化完畢后保存為 SFXC 文件作為對(duì)接文件。

體外抗HIV-1蛋白酶(稀釋100倍)活性測(cè)定結(jié)果表明，化合物1和2均表現(xiàn)出不同程度的抑制作用，在0.1 mg/mL (DMSO)的給藥濃度下，抑制率分別為(100.0±4.22)%和(58.9±2.86)%，化合物1的IC50值為13.2g/mL，化合物2為38.6g/mL (表1)。

為了進(jìn)一步探討化合物1和2與HIV-1蛋白酶的結(jié)合機(jī)理，將化合物1和2以及HIV-1蛋白酶結(jié)構(gòu)添加到SYBYL-x 2.1.1程序中進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證, Total Score用作分子對(duì)接結(jié)果的評(píng)估指標(biāo)，其>5.0表示活性分子與HIV-1蛋白酶具有一定的結(jié)合活性,總分>7.0表明活性分子與HIV-1蛋白酶有強(qiáng)烈的結(jié)合活性。

表1 化合物對(duì)HIV-1蛋白酶的抑制活性(n=3)

分子對(duì)接結(jié)果表明，化合物1和2均位于HIV-1蛋白酶的結(jié)合口袋中(圖1)，化合物1的吡喃葡萄糖基分別與蛋白酶的Asp25(B)、Gly27(A)以及Ala28(A)之間存在3個(gè)氫鍵，化合物1和2與HIV-1蛋白酶的疏水作用見表2和圖2。

圖1 化合物1 (A)和2 (B)與HIV-1蛋白酶的分子對(duì)接圖

表2 化合物與HIV-1蛋白酶的相互結(jié)合作用

圖2 化合物1 (A)和2 (B)與HIV-1蛋白酶的相互結(jié)合作用

2 結(jié)果和討論

越南槐根又名山豆根，作為苗藥組方“開吼劍噴霧劑”的主要原料藥材，常用于治療上呼吸道感染性疾病[3]，前期大量研究已經(jīng)從該植物各部位報(bào)道了多種類型化學(xué)成分，其中以黃酮類和生物堿類結(jié)構(gòu)為主，此外還有三萜類、多糖及其他成分[21],山豆根中黃酮衍生物成分含量豐富，包括二氫黃酮類、異黃酮類和紫檀素類等[22–23]，生物堿成分是山豆根的主要毒性成分，其分離得到的生物堿大部分具有相似的喹諾里西啶類基本骨架[23]。在藥理活性研究方面，山豆根中已報(bào)道的藥理作用包括抗炎、抗菌、抗腫瘤、抗氧化等，其中抗炎和抗菌作用研究尤為多見，然而針對(duì)其抗病毒活性報(bào)道較少[24]。本研究從越南槐根中共分離鑒定了8個(gè)單體化合物,分別為三葉豆紫檀苷 (1)、苦參堿(2)、-acetyl- nicotinamide (3)、2′--甲基腺苷 (4)、毛蕊異黃酮苷 (5)、玫瑰花苷 (6)、環(huán)廣豆根素 (7)和芒柄花苷 (8)，其中4個(gè)黃酮類成分，3個(gè)生物堿類成分，1個(gè)倍半萜糖苷類成分，化合物3～5為首次從該植物中分離得到。此外還分離得到2個(gè)塑化劑衍生物，鑒定為鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯 (9)和鄰苯二甲酸二異丁酯 (10)。運(yùn)用HIV-1蛋白酶試劑盒對(duì)單體成分體外抗HIV病毒活性進(jìn)行篩選，研究表明化合物三葉豆紫檀苷(1)和苦參堿(2)均表現(xiàn)出一定的抗HIV-1蛋白酶活性，IC50值分別為13.2和38.6g/mL,進(jìn)一步運(yùn)用分子對(duì)接技術(shù)初步探討了化合物1和2與HIV-1蛋白酶的結(jié)合機(jī)制。這項(xiàng)研究從山豆根中分離鑒定了多個(gè)單體結(jié)構(gòu)，豐富了山豆根的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)，所得化合物類型大部分為黃酮類以及生物堿類，這與前期所報(bào)道結(jié)構(gòu)類型一致，說明了本實(shí)驗(yàn)研究方法的可靠性，也側(cè)面證明了山豆根的主要結(jié)構(gòu)類型。體外抗病毒測(cè)試顯示部分化合物具有較好的抗HIV-1蛋白酶的活性，初步揭示了山豆根在抗HIV病毒方面的作用潛力，為山豆根的傳統(tǒng)藥用提供了必要的科學(xué)依據(jù)，最后通過分子對(duì)接技術(shù)進(jìn)一步探討了活性分子的作用機(jī)制, 為抗HIV先導(dǎo)結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)提供了有益探索，為后續(xù)體內(nèi)外藥效驗(yàn)證研究奠定了理論基礎(chǔ)。

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Chemical Constituents with Anti-HIV Activities from the Roots of

WEI Xin, ZHANG Wei, YANG Xin, WANG Ju, ZHANG Liyan, WEI Ying, ZHOU Ying*

(Guizhou University of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550025, China)

In order to study the anti-HIV protease activity and molecular docking mechanism ofroots, the chemical constituents from roots were isolated by silica gel, MCI and Sephadex LH-20. HIV protease was used to screen the compounds against HIV, and molecular docking was used to preliminarily explore the binding mechanism between the active compounds and HIV-1 protease. The results showed that eight compounds were isolated fromroots. Based on spectral data, their structures were identified as trifolirhizin (1), matrine (2),-acetylnicotinamide (3), 2′--methyladenosine (4), calycosin-7---d-glucoside (5), roseoside (6), sophoranochromene (7), and ononin (8). Besides,two plasticizer derivatives were also obtained as(2-ethylhexyl)benzene-1,2-dicarboxylate (9) and disobutyl phthalate (10). The IC50values of compounds 1 and 2 are 13.2 and 38.6g/mL, respectively. Molecular docking showed that it had certain binding effect with HIV protease. Compounds 3-5 were isolated from this plant for the first time, while compounds 1 and 2 exhibited moderate anti-HIV activities

; Chemical constituents; Isolation and identification; Anti-HIV-1 protease activity; Molecular docking

10.11926/jtsb.4599

2021-12-23

2022-03-30

國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2018YFC1708100)；貴州省教育廳創(chuàng)新群體項(xiàng)目(KY[2021]018)；貴州中醫(yī)藥大學(xué)科研創(chuàng)新和探索專項(xiàng)(2018YFC170810208)；貴州省科技計(jì)劃項(xiàng)目(ZK[2023]430)資助

This work was supported by Program for National Key Research and Development of China (Grant No. 2018YFC1708100), the Project for Innovation Group in Department of Education of Guizhou (Grant No. KY[2021]018), the Project for Scientific Research Innovation and Exploration of Guizhou University of Traditional Chinese Medicine (Grant No. 2018YFC170810208), and the Project for Science and Technology Plan in Guizhou (Grant No. ZK[2023]430).

魏鑫(1988年生)，男，博士，主要從事植物活性成分研究。E-mail: sfweixin@163.com

. E-mail: yingzhou71@sina.com