在ABO疑難血型鑒定中采用吸收放散試驗及抗體增強方法檢測的效果

劉倩

【摘要】目的：探討分析在ABO疑難血型鑒定中采用吸收放散試驗及抗體增強方法檢測的效果。方法：研究時間為2020年2月—2022年2月，在電腦所編輯的隨機抽選程序作用下在上述所涉及的這段時間內，將實施ABO血型正反定型均不符合的血液標本35例作為本次研究的探討對象，對其通過使用不規則抗體篩查、抗體增強方式、吸收反射法以及直接抗人球蛋白的相關試驗進行檢測，對患者最終的血型抗原以及血清中抗體的檢測結果進行觀察與分析。結果：在ABO血型正反定型不相符合的22例患者之中，所出現的A抗原減弱、B抗原減弱以及AB抗原減弱的患者分別有14例、5例和3例；其中，所存在的A亞型和B亞型的患者數量分別為3例和2例。在表現為ABO血型抗體效價降低的7例患者之中，其中表現為A型血的患者其血清之中所含有的B抗體效價降低這一情況的患者有2例，在表現為B型血的患者之中其血清所含有的抗A抗體效價出現了降低的患者有3例，表現為O型血的患者之中，對其血清進行檢測，最終顯示出發生了抗B及抗AB抗體效價降低這一情況的患者有2例。結論：臨床所使用的吸收放散試驗能夠發揮出濃縮血清以及初步純化抗體的效果，所使用的抗體增強檢驗方式能夠使得低效價的血清抗體所擁有的凝集強度得到增加，在所開展的輸血相容性的檢測工作之中聯合使用ABO正反定型、吸收放散試驗以及抗體增強，通過這樣的檢測形式，能夠讓臨床所開展的ABO疑難血型鑒定工作更加準確，并且能夠對臨床所存在的部分較差配血不合的現象進行良好的解決。

【關鍵詞】ABO；疑難血型鑒定；吸收放散試驗；抗體增強

The effect of absorption and elution test and antibody enhancement method in ABO difficult blood group identification

LIU Qian

PKU Care Luzhong Hospital， Zibo， Shandong 255400， China

【Abstract】Objective：To explore and analyze the effect of absorption and elution test and antibody enhancement method in the identification of ABO difficult blood types.Methods：The study time was from February 2020 to February 2022，respectively，under the influence of the random selection procedure edited by the computer，35 blood samples that did not conform to the positive and negative typing of ABO blood group were taken as the research object of this study，through the use of irregular antibody screening，antibody enhancement method，absorption reflection method and direct anti-human globulin related tests too bserve and analyze the final blood group antigen and the detection results of antibodies in serum.Results：Among 22 patients who did not conform to the positive and negative typing of ABO blood group，there were 14 patients with weakened A antigen，5 patients with weakened B antigen and 3 patients with weakened AB antigen；Among them，the number of patients with subtype A and subtype B was 3 and 2，respectively.Among 7 patients with decreased ABO blood group antibody titer，among them，2 patients with type A blood showed a decrease in the titer of B antibody contained in their serum，among the patients with type B blood，the titer of anti-A antibody in their serum decreased in 3 cases，among the patients with type O blood，the serum test finally showed that the titer of anti-B and anti-AB antibodies decreased in 2 cases.Conclusion：The clinical absorption and elution test can exert the effect of concentrating serum and preliminary purifying antibody，the antibody enhancement test can the agglutination strength of low titer serum antibodies，the combination of ABO positive and negative typing，absorption test and antibody enhancement in the blood transfusion compatibility test can make the clinical ABO difficult blood type identification work more accurate，and can solve some clinical phenomena of poor blood matching incompatibility.

【Key Words】ABO； Difficult blood type identification； Absorption and elution test； Antibody enhancement

ABO血型是臨床上針對實施輸血相容性檢測工作之中必須檢驗的一個項目，開展該項指標的監測是為了保證臨床輸血治療的安全性以及有效性，所以臨床實施的ABO血型鑒定工作的準確性是保證輸血治療的安全性的重要前提條件以及重要的措施[1]。吸收放散試驗是現階段輸血相容性檢測工作之中較為準確的一種方式，但是在實際工作過程中發現吸收放散試驗對表現為低效價血清標本實施檢測的過程中，其所擁有的凝集強度相對較弱，并且檢測的時間較長，操作非常復雜。

1.1 一般資料

研究時間為2020年2月—2022年2月，在電腦所編輯的隨機抽選程序作用下在上述所涉及的這段時間內，將實施ABO血型正反定型均不符合的血液標本35例作為本次研究的探討對象，對其通過使用不規則抗體篩查、抗體增強方式、吸收反射法以及直接抗人球蛋白的相關試驗進行檢測，在參與本次研究的所有患者之中存在的ABO血型抗原減弱16例、ABO亞型6例、ABO血型抗體效價降低7例、高效價冷凝集素6例，其中男21例，女14例，年齡25～75歲，平均年齡（50.21±2.36）歲。對患者的各項基線資料進行相互之間的比較，不具備差異性（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 吸收放散試驗 針對于實施微柱凝膠法ABO血型正反定型最終檢測結果不相符的血液標本，對其實施吸收反射試驗，針對于患者紅細胞表面ABO血型抗原以及血清之中的抗A以及抗B抗體進行相應的檢測。在所涉及的被檢測血清之中加入A型或者是B型試劑紅細胞；在被檢測的紅細胞之中加入對應的人源抗A或者是B血清，在此之后讓其放置在溫度設定為4℃的冰箱之間進行為期2～4h的吸收，每間隔15min的時間對其進行1次振搖，對于紅細胞則需要使用生理鹽水進行洗滌，頻次控制在5～6次，壓積紅細胞需要按照1：1的水平比例在其中加入相應的生理鹽水，將其放置在溫度為56℃的水之中完成10min的水浴放散，在使用離心機離心之后將該標本的上清液取出，加入1滴試劑紅細胞懸液，在完成離心之后使用肉眼或者在顯微鏡下完成相應的結果觀察。

1.2.2 抗體增強方法 對于臨床所使用的常規鹽水試管法作用下，在實施立即離心操作之后沒有出現凝集反應的低效價血清，通過將反應時間延長、增加離心的次數以及增加血清量或者是置換血清以及將其放置在溫度為4℃的冰箱之中，時間控制在15min，在此之后再試試離心并觀察相應的結果。血清置換法：需要將被檢測的血清與試劑紅細胞產生反應并實施離心操作之后將最終標本的上層血清倒掉，之后需要在其中加入被檢測的血清，并實施離心操作之后對最終的結果進行觀察，通過這樣的操作進行對血清的反復置換，頻次控制在2～3次，通過增強與試劑紅細胞所結合的抗體數量的方式使得凝集強度得到有效的增加。

1.3 觀察指標

對患者最終的血型抗原以及血清中抗體的檢測結果進行觀察與分析。

1.4 統計學方法

采用SPSS 24.0統計學軟件進行數據分析。計數資料采用（%）表示，進行x2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2.1 ABO血型抗原減弱及亞型的檢測結果

在ABO血型正反定型不相符合的22例患者之中，所出現的A抗原減弱、B抗原減弱以及AB抗原減弱的患者分別有14例、5例和3例；其中，所存在的A亞型和B亞型的患者數量分別為3例和2例。所測定的ABO血型抗原減弱的凝集強度表現為MF～1+，對于患者的紅細胞所開展的吸收放散試驗，其所表現出的凝集強度從MF～1+增長到了2+～3+的水平狀態。在所含有的3例A亞型患者的血清之中檢測出來IgM型抗A不規則抗體，在所涉及到的表現為B亞型的2例患者的血清標本之中能夠檢測出IgM型抗B不規則抗體。

2.2 ABO血型抗體效價降低的檢測結果

在表現為ABO血型抗體效價降低的7例患者之中，其中表現為A型血的患者其血清之中所含有的B抗體效價降低這一情況的患者有2例，在表現為B型血的患者之中其血清所含有的抗A抗體效價出現了降低的患者有3例，表現為O型血的患者之中，對其血清進行檢測，最終顯示出發生了抗B及抗AB抗體效價降低這一情況的患者有2例。對于出現抗體效價降低這一情況的患者而言，常規情況下會通過使用反定型凝集強度MF～1+w，通過使用抗體增強這一方式反定型使得其所擁有的凝集強度得到增加，增加的凝集強度需要達到1+及以上，最高至（1+w）～2+的水平。

在臨床所開展的ABO血型鑒定過程之中，主要使用的方式為定型試劑血清檢測紅細胞上所含有的抗原和通過使用試劑紅細胞對血清之中抗體的正反定型進行相應地檢測，從而對患者的ABO血型情況進行更為準確地鑒定，在常規的情況下都需要符合正反定型的相關標準才能確定患者的ABO血型[2]。臨床上一般情況下其ABO血型紅細胞抗原所擁有的凝集強度都處于3+～4+的范圍內，若其所擁有的凝集強度沒有超過2+的水平，則這種情況的產生可能是患者出現疾病相關的ABO血型抗原減弱或者是因為患者出現了基因突變的相關情況。所以，在臨床上針對于ABO血型所開展的鑒定工作可能會發生正反定型均與標準不匹配的情況，從而影響最終的監測結果給臨床所開展的輸血治療帶來一定的困難[3]。

在本次研究過程中，使用吸收放散試驗以及抗體增強方法對所涉及的35例疑難血型患者的血液標本進行鑒定，將可能會對結果造成影響的因素進行排除，從而更為準確地確定出患者的ABO血型。吸收放散試驗實施的主要原理是因為所含有的血清抗體與之相應的紅細胞抗原之間在合適的條件下會出現結合效應，但是這種效應的產生是不可逆的，將某些物理條件改變的時候，血清抗體又會從相應的結合紅細胞之上脫離下來，在通過臨床已知的抗原紅細胞實施相應的特異性鑒定工作[4]。出現了血型抗原減弱情況的血液標本在實施ABO血型鑒定的過程之中可能會出現正反定型不相匹配的情況，從而沒有辦法對患者的血型進行正確地判斷，需要通過使用吸收放散試驗實施相應的鑒定工作，使得弱抗原的凝集強度能夠得到增加，能夠與 ABO血型正反定型相匹配。在實際臨床所開展的檢驗工作過程中發現吸收放散試驗在對低效價的血清抗體標本進行檢測的時候，放散液與試劑紅細胞所擁有的凝集強度相對更弱，并且實際的各項操作更加繁雜，需要耗費更多的檢測時間。所以，在實施常規方法反定型凝集強度相對更弱的低效價的血清標本實施檢測的過程之中，需要先將反應的時間進行一定程度的延長、離心的次數增加以及增加血清量和將其放置在溫度為40℃的冰箱之中進行為期10～15min的反應，之后再實施離心并完成相應的觀察[5]。

綜上所述，臨床所使用的吸收放散試驗能夠發揮出濃縮血清以及初步純化抗體的效果，所使用的抗體增強檢驗方式能夠使得低效價的血清抗體所擁有的凝集強度得到增加，在所開展的輸血相容性的檢測工作之中聯合使用ABO正反定型、吸收放散試驗以及抗體增強，通過這樣的檢測形式，能夠讓臨床所開展的ABO疑難血型鑒定工作更加準確，并且能夠對臨床所存在的部分較差配血不合的現象進行改善。

參考文獻

[1] 胡志濤.吸收放散試驗及抗體增強方法在173例ABO疑難血型鑒定中的應用研究[J].臨床醫藥文獻電子雜志，2020，7（18）：131.

[2] 張勤，閆燁，王麗娜，等.兩種放散試驗聯合檢測在新生兒ABO溶血病診斷中的應用效果[J].臨床醫學研究與實踐，2021，6（4）：118-120.

[3] 鄧俊，黃蓉，劉鳳霞，等.自身抗體影響血型鑒定的處理方法及效果[J].中國輸血雜志，2021，34（8）：818-820.

[4] 趙鼎銘，曲執.全自動血型分析儀與微板法在ABO血型篩查中的應用效果[J].中國醫藥指南，2022，20（25）：126-128.

[5] 張玉靜.ABO血型鑒定及抗體篩查用于自身免疫性溶血性貧血（AIHA）患者中的研究[J].當代醫學，2020，26（1）：162-163.