臭椿酮對非小細胞肺癌順鉑耐藥細胞A549/DDP的增敏作用

李祥伶，劉承一，劉 鐳，陳 龍，于勝利，許 倩*

（1.承德醫學院基礎醫學院，河北承德 067000；2.承德醫學院附屬醫院；3.承德市生態環境檢驗監測站）

肺癌是導致死亡最常見的惡性腫瘤之一[1,2]。據統計[3,4]，非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）在肺癌中患病率超過80%，且5年生存率僅為21%。目前，順鉑（cisplatin，DDP）仍是化療一線用藥，但長期使用會出現抗藥性而導致治療失敗[5]。因此，尋找一種藥物與之聯用，增加藥物敏感性，是腫瘤治療研究中的熱點。

中草藥具有可利用性、有效性高且毒性相對較低的優勢[6]。臭椿酮（ailanthone，AIL）是椿皮中提取的一種苦木苦味素類藥物，早期研究多在抗菌、抗炎等方面，最近發現其在抗腫瘤方面也有顯著作用，如前列腺癌、結直腸癌等[7-9]。AIL亦能逆轉DDP、阿霉素等藥物的耐藥性[10]，但機制尚不明確，且在NSCLC的治療中尚未見報道。因此，本文就AIL對A549/DDP細胞的增敏作用展開研究，為NSCLC中藥輔助治療提供新思路。

1 材料與方法

1.1 儀器

美國BD公司FACS CaLibur型流式細胞儀；中國上海天能公司6100型化學發光儀；美國博騰公司ELX808TM型酶標儀；中國麥克奧迪公司AE2000型倒置光學顯微鏡；中國大龍興創公司D3024R型臺式高速冷凍離心機；中國海爾公司HR30-2A2型生物安全柜。

1.2 細胞及試劑

人肺癌細胞A549及人肺癌DDP耐藥細胞（A549/DDP細胞）購于上海文生物科技有限公司；AIL（貨號：SA9130)、MTT（貨號：SA9130、M818C)、BCA蛋白濃度測定試劑盒、SDS-PAGE凝膠制備試劑盒購于北京索萊寶科技有限公司；DDP（貨號：HY-17394/CS-1122）購于美國MCE公司；AnnexinV-FITC/PI凋亡檢測和周期檢測試劑盒（貨號AP101、CCS012）購于杭州聯科生物技術股份有限公司；PBS緩沖液（1×）、RPMI-1640 培養基及Trypsin-EDTA Solutio（n0.25%，1×）購于美國Gibco公司；……