伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者肺動脈炎癥特征與罹患肺癌風險的研究

王潤祥 王永波 宋海燕 高貴銘

近年來，我國肺癌的發病率不斷上升，晚期預后極差，因此能否早期發現并予以有效治療，是改善預后的關鍵[1]。關于肺癌的病因及發病機制一直在研究探索中，若能明確其發病機制，有望為臨床診治提供重要依據。有研究表明，肺癌的發生、發展均可能與肺動脈炎癥密切相關，原因在于腫瘤細胞可能利用肺動脈的炎癥因子進行增殖、侵襲和轉移[2]。關于肺動脈炎癥的影響因素較多，如吸煙、慢性阻塞性肺疾病（COPD）、肺結核均被認為是導致肺動脈炎癥的獨立危險因素[3]。吸煙可增加肺動脈組織活性氧的釋放，導致炎癥反應，為腫瘤細胞的增殖提供有利條件。COPD 患者肺動脈往往存在炎癥反應，聚集炎癥細胞并誘導腫瘤細胞免疫逃逸，導致患者罹患肺癌風險增大。另外，肺結核患者肺動脈伴發慢性非特異性炎癥，促進血管生成，誘導肺癌發生[4]。關于伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者的肺動脈炎癥有何特征，尚未形成統一定論，且是否與罹患肺癌風險有關亦存在廣泛爭議。對此，本研究分析了伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者肺動脈炎癥特征與罹患肺癌風險關系，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料選擇我院2017 年1 月～2022 年9 月接診的48 例因肺癌行肺葉切除術的伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者作為觀察組，其中男46 例，女2 例；年齡42～78 歲，平均（62.58±4.27）歲。納入標準：①符合COPD 和肺結核的診斷標準[5，6]；②吸煙史≥5 年；③耐受肺葉切除術治療；④知悉研究內容，能配合檢查和治療。排除標準：①患有嚴重的高血壓、糖尿病等基礎性疾病者；②合并其他下呼吸道疾病者；③術前接受放化療者；④復發性肺癌者。另選擇同期的48 例行解剖性部分肺葉切除術且術后病理證實為良性的肺結節患者作為對照組，其中男46 例，女2 例；年齡41～75 歲，平均（63.05±4.19）歲。兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法使用免疫組織化學技術檢測所有患者肺腺泡肌型動脈的炎性細胞浸潤程度，具體如下：術中選取遠離肺癌病灶且肉眼觀察無癌灶浸潤的外周肺組織，制備聚賴氨酸防脫切片進行免疫組化檢查，染色方法為鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法（SP 法），試劑盒來源于上海烜雅生物科技有限公司，染色操作嚴格按照操作說明書進行。其中鼠抗人CD3 抗體、CD4 抗體、CD8 抗體、CD20 抗體均購自上海微蒙生物科技有限公司。經二氨基聯苯胺法顯色、蘇木素復染、鹽酸乙醇分化、磷酸鹽緩沖液沖洗后，陰性對照為磷酸鹽緩沖液，活檢的扁桃體組織作為陽性對照以排除假陰性結果，判定細胞陽性的依據為胞膜或胞質呈棕褐色。每例患者隨機選擇10 條肺腺泡肌型動脈，對其內、中、外膜淋巴細胞進行計數，以每平方毫米的肺腺泡肌型動脈各層面積表達的陽性淋巴細胞數表示其浸潤程度。

1.3 觀察指標比較兩組肺腺泡肌型動脈內、中、外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞、CD4+T 細胞、CD20+B 細胞表達水平，使用多因素Logistic 回歸分析肺腺泡肌型動脈內、中、外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞與罹患肺癌的關系，分析肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平在不同肺癌病理分期之間的差異性，通過受試者工作特征（ROC）曲線分析肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T細胞聯合CD8+T 細胞表達水平評估伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者罹患肺癌風險的效能。

1.4 統計學方法采用SPSS 18.0 軟件處理實驗數據，符合正態分布且方差齊性的計量資料以表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料使用χ2檢驗；通過Delong 檢驗比較兩組ROC 曲線下面積（AUC）；檢驗水準為α=0.05，P<0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組肺腺泡肌型動脈內、中、外膜淋巴細胞表達水平比較觀察組肺腺泡肌型動脈內、中、外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）；兩組肺腺泡肌型動脈內、中、外膜CD4+T 細胞、CD20+B 細胞表達水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05），見表1。

表1 兩組肺腺泡肌型動脈內、中、外膜淋巴細胞表達水平比較（%）

2.2 多因素Logistic 回歸分析以肺腺泡肌型動脈內、中、外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平為自變量，以罹患肺癌為因變量，經多因素Logistic 回歸分析，肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T細胞表達水平均是伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者罹患肺癌的獨立危險因素（P<0.05），見表2。

表2 多因素Logistic 回歸分析

2.3 肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T細胞與肺癌病理分期的關系肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平均隨肺癌腫瘤分期增大而升高，在不同肺癌病理分期之間差異均有統計學意義（P<0.05），見表3。

表3 肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞與肺癌病理分期的關系（%）

2.4 ROC 曲線分析經ROC 曲線分析，肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞聯合CD8+T 細胞表達水平評估伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者罹患肺癌風險的AUC 為0.924，明顯大于單一指標CD3+總T 細胞（0.686）和CD8+T 細胞（0.738），經Delong檢驗，差異均有統計學意義（Z值分別為2.326、2.048，P值均為0.000），見圖1。

圖1 CD3+總T 細胞聯合CD8+T 細胞表達水平評估罹患肺癌風險的ROC 曲線

3 討論

本研究結果表明，伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者肺腺泡肌型動脈內、中、外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平均明顯升高，提示此類患者存在肺動脈炎癥，這與Tian 等[7]研究的COPD早期甚至是肺功能正常吸煙者存在肺動脈炎癥及重塑的這一觀點相符。與此同時，本研究結果顯示，伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平較對照組升高最明顯，揭示了伴有吸煙史的COPD合并肺結核患者肺動脈出現以CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞浸潤其外膜為特征的炎癥反應，考慮原因為CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞在香煙及結核桿菌的刺激下表達大量炎性因子，加上COPD 患者氣道本身存在的慢性炎癥反應，促進CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞毒性功能增強，誘導靶細胞凋亡，甚至壞死，進而破壞肺局部組織[8，9]。左志通等[10]研究表明，伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者肺動脈炎癥導致肺局部組織破壞，可釋放大量抗原，進一步促進CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞活化、增殖，并募集大量炎癥細胞，進而加劇肺動脈炎癥，亦與本研究結果相符。

有研究認為，肺部慢性炎癥是導致肺癌發生、發展的重要機制，原因在于慢性持續性感染可引起支氣管肺泡干細胞增殖，甚至癌變[11，12]。也有研究顯示，長期肺部炎癥可能激活肺癌發生的相關信號通路[13]。然而對于伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者，其肺動脈炎癥特征與罹患肺癌是否有關仍有待商榷。作者推測，隨著伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者肺動脈炎癥的持續發展，患者罹患肺癌的風險可能增大，而吸煙、COPD 和肺結核病情發展均可能導致肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平升高，加劇肺動脈炎癥。本研究結果顯示，肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平均是伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者罹患肺癌的獨立危險因素（P<0.05），與Kim 等[14]的研究結果相符，提示CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞均可能在伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者罹患肺癌中發揮重要作用，與兩者介導慢性炎癥刺激有關。此外，本研究結果顯示，肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平均隨肺癌腫瘤分期增大而升高，在不同肺癌病理分期之間差異均有統計學意義（P<0.05），與Arrieta等[15]的研究結果相似，提示肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平均可能與肺癌嚴重程度有關。

盡管伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者罹患肺癌風險明顯增大，但具體機制尚未明確[16]。本研究結果表明，伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者肺動脈炎癥與CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞表達水平有關，但是否有助于評估患者罹患肺癌風險需要進一步明確，而相關研究鮮有報道。對此，本研究使用ROC 曲線分析，結果顯示，肺腺泡肌型動脈外膜CD3+總T 細胞聯合CD8+T 細胞表達水平評估伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者罹患肺癌風險的AUC 為0.924，提示兩者聯合評估患者罹患肺癌風險的效能較好，可能原因為CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞可導致患者肺部出現異常炎癥免疫反應，不僅有利于血管生成，還為腫瘤細胞發生免疫逃逸創造有利環境，進而增大罹患肺癌風險[17，18]。基于本研究結果，認為伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者罹患肺癌風險明顯增大，很可能與CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞協同介導肺動脈炎癥有關[19，20]。因此，針對伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者的治療，不應局限于常規舒張血管等對癥支持治療和抗結核桿菌治療，而應強調對肺動脈炎癥進行整體防治，尤其是早期抗炎治療，有望在減小患者罹患肺癌風險上具有積極作用，增加患者的臨床獲益。基于本研究結果，可知抑制肺動脈炎癥的措施，如戒煙、應用抗炎藥物、免疫抑制劑和抗結核桿菌藥物等，將成為伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者預防肺癌的新途徑。

綜上所述，伴有吸煙史的COPD 合并肺結核患者肺動脈出現以CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞浸潤其外膜為特征的炎癥，兩者表達水平均可能與肺癌嚴重程度有關，聯合評估患者罹患肺癌風險的效能較好，值得臨床予以重視。由于本研究樣本量不多且均來源于單一中心，研究結果可能存在偏倚，且未能分析CD3+總T 細胞、CD8+T 細胞在肺癌發生、發展中的具體作用機制，有待日后擴大研究規模，深入分析肺動脈炎癥與肺癌的關系，為肺癌的防治提供高級別證據支持。