視疲勞及其中醫證候動物模型的構建策略

黃志強　張建軍　王淳　張睿　南海鵬　陳彥　賈鳳蘭　張寶旭　杜軍　闞君陶　陳亮　王林元

摘要 視疲勞已發展為全球性的健康問題，臨床注重對其預防和保健，可通過調整用眼模式，使用適宜物質、物理干預、休息等方式緩解癥狀體征。目前視疲勞主要以主觀癥狀進行診斷，尚無準確反映該狀態的客觀評價指標，導致實驗和臨床評價方法及機制研究匱乏。建立視疲勞動物模型，并結合中醫對視疲勞的認識及診療特色建立視疲勞相關中醫證候模型，有助于深入闡釋視疲勞發生發展機制，全面挖掘中醫對視疲勞的預防保健優勢。現總結了視疲勞動物模型研究現狀，提出了視疲勞模型的構建原則及策略；結合中醫臨床文獻調研，分析出視疲勞人群中醫證型主要為肝腎陰虛型、肝郁氣滯型和肝血不足型，進一步提出了視疲勞相關中醫證候模型的構建原則及策略，以期為緩解視疲勞中藥產品的研發提供思路，并為其辨證保健及精準應用提供指導。

關鍵詞 視疲勞；辨證保健；中醫證候；動物模型；合理用藥；肝腎陰虛；肝郁氣滯；肝血不足

Construction Strategies of Animal Models of Asthenopia and Its Traditional Chinese Medicine Syndromes

HUANG Zhiqiang1，ZHANG Jianjun2，WANG Chun2，ZHANG Rui2，NAN Haipeng1，CHEN Yan1，JIA Fenglan3，ZHANG Baoxu3，DU Jun4，KAN Juntao4，CHEN Liang4，WANG Linyuan1

（1 School of Chinese Materia Medica，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China; 2 School of Traditional Chinese Medicine，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China; 3 School of Public Health，Peking University，Beijing 100700，China; 4 Amway（China） R&D Center Co.，Ltd.，Shanghai 201203，China）

Abstract Asthenopia has developed into a global health problem.In clinics，attention is paid to its prevention and health care，and symptoms and signs can be relieved by eye use adjustment，appropriate substances，physical intervention，and rest.At present，asthenopia is mainly diagnosed by subjective symptoms，and there is no objective index that accurately reflects the state，resulting in adequate methods and mechanisms for experiments and clinical evaluation.The establishment of an animal model of asthenopia and a traditional Chinese medicine（TCM） syndrome model related to asthenopia based on its understanding and diagnosis and treatment characteristics in TCM，helps further explain the occurrence and development mechanism of asthenopia and comprehensively explore the advantages of TCM for the prevention and healthcare of the disease.This paper summarized the research status of animal models of asthenopia，and proposed the construction principles and strategies.In addition，by reference to TCM clinical literature，it was found the TCM syndromes of asthenopia patients were mainly liver-kidney yin deficiency，liver depression and qi stagnation and liver blood deficiency，and the construction principles and strategies of the TCM syndrome model related to asthenopia were further proposed.This paper was expected to provide ideas for the research and development of TCM products for relieving asthenopia，and provide guidance for the syndrome differentiation-based health care and precise application of asthenopia.

Keywords Asthenopia; Syndrome differentiation-based health care; Traditional Chinese medicine syndrome; Animal model; Rational drug use; Liver-kidney yin deficiency; Liver depression and qi stagnation; Liver blood deficiency

中圖分類號：R276.7文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2023.01.003

視疲勞的發生率與日俱增，雖然不會直接引起眼器質性病變，但長期反復的視疲勞可引發或加重眼、頭、頸、肩等疾病，嚴重干擾人們的工作與學習，逐漸成為威脅人類健康的熱點醫學問題［1-2］。臨床上視疲勞更注重預防和保健，主要通過調整用眼模式［3］、使用適宜物質［4-6］、物理干預［7］或休息［8］來緩解癥狀體征。但大多情況下，視疲勞是持續近距離用眼出現的自覺不適狀態，往往不出現器質性改變，經過簡單休息即可緩解癥狀，動物模型難度大研究較少，缺少成熟的動物模型，限制了對其發生機制的深入研究及對預防保健措施的客觀評價。因此，本文總結文獻報道、臨床經驗及我們團隊已進行的文獻、理論及實驗研究［9-15］，提出視疲勞的動物造模方法和評價策略，并在此基礎上探討視疲勞中醫證候模型的合理性，為闡釋視疲勞病理生理變化與中醫證候之間的關系，深入挖掘中醫對視疲勞的診療特色，篩選視疲勞的有效預防和保健措施提供參考。

1 視疲勞動物模型研究現狀及視疲勞模型的構建原則及策略

1.1 視疲勞動物模型研究現狀

1.1.1 過用眼調節致樹鼩視疲勞模型 視疲勞最常見的成因是眼部調節功能的異常，其程度與持續用眼時間成正相關［16］。白雪等［17］以樹鼩為研究對象，每日白晝以活動玩具誘視動物而造成持續視近狀態，造模6 d后，樹鼩睫狀肌β-腎上腺素受體（Beta-adrenergic Receptor，β-AR）及其第二信使環磷酸腺苷（Cyclic Adenosine Monophosphate，cAMP）含量上調，Na+-K+-ATP酶活性處于高水平，副交感神經處于持續興奮狀態，并引起睫狀肌中神經-受體偶聯鏈的變化。張堰黎［18］以樹鼩為研究對象，分別使用3種造模方法（使用誘視物、眼前安置眼罩發光二極管（Light-emitting Diode，LED）、眼前安戴凹透鏡）迫使樹鼩眼過用調節，3種造模方法中模型組樹鼩均表現煩躁不安、回避用眼等行為，組織病理學顯示睫狀體和瞳孔括約肌處于收縮狀態，眼睛處于交感與副交感雙重神經支配的動態平衡失調狀態，虹膜中M-ACh受體的最大結合容量及環磷酸鳥苷鳥苷一磷酸（Cyclic Guanosine Monophosphatec，Guanosine Monophos-phate，cGMP）含量較正常對照組升高。該造模方法通過迫使動物持續視近，過用眼調節而成視疲勞，造模方法不易造成視器的損傷，符合視疲勞的特點，但該文無后續研究，推測其造模動物不易獲得，造模方法難以在常用實驗動物復制推廣，指標檢測難度較大。

1.1.2 光照致大鼠、小鼠、家兔視疲勞模型 視疲勞還與環境照度密切相關［19］。王云和胡曉楠［20］、李麗維等［21］以小鼠為研究對象，借鑒視網膜光照損傷模型，以LED白光作為光源照射小鼠眼球，采用（9 000±500）Lux距離小鼠50 cm處垂直照射動物4 h，連續照射7 d，迫使小鼠在強光下持續用眼而成視疲勞；結果發現模型組晶體谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GSH-Px）和總抗氧化能力（Total Antioxidant Capacity，T-AOC）活力明顯下降，肝組織丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）和GSH-Px活性也明顯下降。《GB 50034-2013建筑照明設計標準》規定，教室、閱覽室、辦公室等場所的工作面照度標準值為300～500 Lux，又依據楊春宇等［19］的研究，環境照度不應高于3 000 Lux。但王云和胡曉楠［20］、李麗維等［21］的造模方法的光強度為（9 000±500）Lux，過強的光照會引起視力的損傷，色素紊亂，并引起晶體渾濁，甚至是視網膜組織的損傷［22］，而視疲勞一般不會產生此種損傷，故造模方法應避免使用強光。

手機和電腦等視頻終端屏幕中存在的藍光可導致視疲勞的發生，我們團隊也通過藍光照射大鼠眼球制備視疲勞模型［9］，但藍光波長短，能量高，它可以穿透晶體直達視網膜，導致視網膜光感受器的凋亡［23］，例如黃斑病變，而視疲勞一般不會產生此種損傷［24］。此外，目前手機和電腦等視頻終端的主流屏幕為LED光源并已做了低藍光處理。故藍光照射動物眼球制備視疲勞模型不太符合視疲勞的特點。

由東等［25］以家兔為研究對象，借鑒電光性眼炎動物模型，以254 nm的紫外線照射家兔眼球，共3 d總計12 h，結果發現模型動物瞼結膜和球結膜均呈現充血、水腫等炎癥反應，眼角膜出現散在渾濁或半透明區，眼分泌物增加，睫狀肌張力增加。但紫外線輻射可造成DNA損傷，誘發細胞凋亡或基因突變，長時間暴露在紫外線下，還會對眼結膜、角膜、晶體及視網膜造成不同程度的損害［26］，而且其實驗結果中模型組家兔也出現了瞼結膜、球結膜和眼角膜的炎癥損傷，故紫外線照射動物制備視疲勞模型亦不太符合視疲勞的特點。

HIRAMOTO等［27］以小鼠為研究對象，在一個上半部覆蓋鏡子下半部分涂黑的特殊器具內以15 W/cm2強度的白光（400～700 nm）距離小鼠30 cm進行散射，時間為2 h，結果發現模型動物的運動活動明顯減少，出現疲勞，光照引起下丘腦-垂體-腎上腺軸的應激反應，增強腎上腺皮質醇的分泌并使得血漿皮質醇、γ干擾素、白細胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）和轉化生長因子-β（Transforming Growth Factor-β，TGF-β）水平提高。但檢測指標僅能證實光照可引起疲勞和抑制免疫，有待揭示其與視疲勞的關系。

以上造模方法主要通過改變環境照度以引起實驗動物的持續視近，但相較于藍光或紫外線，白光照射動物眼球更接近持續近距離用眼而產生的視疲勞。

1.1.3 光照結合中醫證候致家兔、大鼠視疲勞肝腎陰虛證模型 視疲勞屬于中醫“肝勞”范疇，以肝腎陰虛證最為常見［28-29］。王家良等［30］以家兔為實驗對象，采用灌胃甲狀腺素和肌內注射利血平，結合白熾燈連續照射（晝30 Lux夜0 Lux）家兔眼睛的方法，制備了視疲勞肝腎陰虛證模型，結果發現模型動物眼睫狀肌組織中cAMP降低、cGMP升高，血清睪酮降低、雌二醇、雌二醇/睪酮升高。但睫狀肌cAMP和cGMP檢測結果與白雪等［17］結果相反，有待進一步研究驗證。趙丹萍等［9］采用灌胃左甲狀腺素鈉和夾尾情志刺激，結合藍光燈照射大鼠眼球的方法，制備了視疲勞肝腎陰虛證模型，結果發現模型組動物血清環核苷酸比值cAMP/cGMP升高，四碘甲狀腺原氨酸升高，三碘甲狀腺原氨酸降低，谷草轉氨酶升高，血清白蛋白降低，胸腺指數降低，眼球cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、SOD、MDA等指標組間差異無統計學意義，但視網膜組織出現損傷。

以上造模方法通過改變環境照度結合中醫證候造成視疲勞肝腎陰虛證候，既模擬了視疲勞的疾病狀態，又反映了證候特征，提示了視疲勞中醫證候模型構建的可能性。

綜上所述，視疲勞動物模型的建立，主要以過用眼調節，改變環境照度及環境照度或結合中醫證候來實現，但存在一定的局限性，主要受到造模方法不符合視疲勞特點、造模動物不易獲取、操作復雜、難重復等因素的影響。

1.2 視疲勞動物模型構建原則及策略

1.2.1 造模原理 《視疲勞診療專家共識（2014年）》指出，視疲勞是由于各種病因使得人眼視物時超過其視覺功能所能承載的負荷，導致用眼后出現視覺障礙、眼部不適或伴有全身癥狀等以至不能正常進行視作業的一組綜合征；以患者主觀癥狀為主，眼或全身因素與精神心理因素相互交織，并非獨立的眼病，臨床多見眼調節功能異常導致的視疲勞，與持續近距離用眼密切相關［16］。人持續近距離用眼可使眼代償活動頻繁，當用眼程度超過人眼可調節的限度，代償活動便突然放棄，從而出現不耐久視，暫時性模糊，眼干、眼酸、眼痛、視力減退、假性近視等輕度視疲勞表現；隨用眼周期增加，視疲勞加重而出現全身癥狀。視覺顯示終端（Visual Display Terminal，VDT）的顯示因素如亮度、對比度、顏色、字體大小和間距，其物理特性如閃爍、清晰度不佳、亮度不均勻或不穩定等，均可對視覺系統產生不良影響［31］。近年來，因持續注視電腦、手機等VDT而引起的視疲勞已成為不可忽視的重要環境因素［2］。

因此，視疲勞動物的造模方法應注意由環境照度引起的持續近距離用眼特點，可在現有的光照致視疲勞模型基礎上進行優化調整，通過白光照射動物眼球以引起動物眼緊張來模擬人的視疲勞狀態［20-21，27］。

1.2.2 造模方法 視疲勞是一種慢性消耗性綜合征狀態，造模方法不宜造成動物器質性病變，應避免強光照射動物眼球引起的視器損傷。1）實驗動物：大鼠或小鼠在視疲勞研究中均有應用［20-21，27］，提示大鼠或小鼠可用于研究視疲勞。而且大鼠或小鼠的動物品系來源穩定，遺傳背景清晰，實驗成本低。在光照條件下，動物易出現瞇眼、昏睡、懶動、喜臥等表現［27］，可通過敲擊動物容器以保持其持續用眼的狀態。2）造模環境：應選擇受限環境，人在受限環境中更易出現視疲勞癥狀［32］，環境宜為暗室或人為營造的黑暗環境，避免其他光源的影響。3）造模光源及強度：VDT的光源主要為LED燈，可選擇其作為造模光源，但強度不高于3 000 Lux，并調整光源的距離控制入眼強度在300～500 Lux之間，色溫在3 300～5 300 K之間［19］。4）造模時間及周期：根據用眼方式的不同，可有持續近距離用眼和短時長期近距離用眼2種；動物造模也可分為2種：第1種，人持續用眼2 h便會出現明顯視疲勞癥狀［33］，可以2 h作為初始時間，觀察不同造模時間（如2 h、4 h、6 h、8 h）的指標變化來篩選與視疲勞相關的檢測指標和適宜時長，并評價藥物的干預效果；第2種，固定每日造模時間為2 h，觀察不同造模時間（如5 d、10 d、15 d）的指標變化，來篩選與視疲勞相關的檢測指標和適宜時長，亦可在此造模方法上增加中醫證候干預，具體可先以中醫證候造模，再以光照造模2 h來篩選適宜天數以建立視疲勞中醫證候模型，研究視疲勞中醫證候的變化及中藥的干預效果和機制。

1.2.3 評價策略 視疲勞的程度與持續用眼時間成正相關，表征視疲勞的檢測指標應與造模時間存在正/負相關性，且不會出現視器損傷。1）視網膜：視網膜是重要的成像介質，對于視覺信息的整合有著重要作用，受光源影響，在強光照射損傷下其感光細胞和視網膜色素上皮細胞數目會減少，排列會紊亂，生理功能降低，故造模結束后，模型動物視網膜不應出現細胞排列紊亂等損傷。視網膜的血液循環狀況是影響眼調節功能以及成像質量的重要因素［34］。視疲勞會導致眼部供血不足，使得視網膜中央動脈和睫狀后動脈流速減慢［35］。2）晶體和睫狀體：晶體是眼球的主要屈光結構，透明、呈雙凸形扁圓體，無血管、富彈性，包以透明的被囊，周緣部的晶體懸韌帶與睫狀體相連［36］。在持續用眼狀態下，晶體長時間受環境光照影響，房水代謝或晶體囊出現問題，使得晶體的抗氧化能力下降，形變彈性下降，引起視疲勞及其他眼科疾病［21，37］；故造模結束后，模型動物不應出現晶體的明顯渾濁。睫狀體為葡萄膜的中間部分，前接虹膜根部，后以鋸齒緣為界與脈絡膜相互移行。睫狀肌為睫狀體的主要構成部分，起源于鞏膜突及其周圍結締組織［38］。睫狀肌屬平滑肌，受交感神經和副交感神經雙重支配。眼調節過程依賴于睫狀體、晶體懸韌帶、晶體物質和晶體囊之間的各種機械相互作用［39］；視近時，睫狀體向前向內移動，靠近虹膜，睫狀肌收縮，晶體懸韌帶松弛，晶體變凸，屈光力加大，使近處物像能落在視網膜上［40-41］。持續視近，睫狀肌一直收縮，會有自主神經功能紊亂，副交感神經持續興奮的現象［17］。3）眼瞼：眼瞼由外向內，由皮膚、肌層、瞼板、結膜及結膜下組織組成［42］。其中肌層主要為眼輪匝肌，司眼瞼閉合，與視疲勞關系密切，持續用眼可使得眼輪匝肌活動增加，一直處于收縮狀態，眨眼次數減少［43］；當肌肉疲勞時會大量堆積疲勞代謝物，例如乳酸，可影響糖酵解和肌球蛋白輕鏈磷酸化，導致肌肉收縮張力下降［44］，乳酸脫氫酶可促進乳酸代謝成丙酮酸。而瞼板中瞼板腺功能障礙可引起干眼癥［45］或干燥綜合征［46］，而水孔蛋白5（Aquaporin 5，AQP5）是一種分布于各類分泌性腺體中的AQP，可調節水液代謝及腺體分泌，在干眼癥和干燥綜合征人群中常出現AQP5分布的異常［47-48］。4）血清：用眼時間越長，視疲勞程度越重，人血清中抗氧化因子水平越低［49］，引起機體缺氧；缺氧與皮質酮分泌水平呈顯著負相關［50］，可用皮質醇的變化可作為疲勞的療效指標［51］；此外，當機體缺氧時，乳酸通過厭氧代謝積累引起疲勞，乳酸脫氫酶可促進乳酸代謝為丙酮酸緩解疲勞［52］。

因此，造模結束后，可觀察動物視網膜是否出現損傷，晶體是否出現渾濁以判斷造模方法是否造成視器的損傷；觀察睫狀體是否靠近虹膜和視網膜血管血流狀態，以判斷是否處于持續視近狀態；檢測晶體和睫狀體中抗氧化因子、神經遞質、能量代謝酶、眼瞼乳酸脫氫酶、AQP5，血清中抗氧化因子、皮質醇、乳酸脫氫酶等指標，篩選出與造模時間成正/負相關性的指標。

2 視疲勞中醫證候模型的構建原則及策略

2.1 視疲勞的中醫名稱、發生機制及主要辨證分型“視疲勞”屬于中醫“肝勞”范疇，現代中醫將“視疲勞”稱為“目倦”，以視物不能持久，久則視物眼脹、昏花、頭痛為主要表現［10］。中醫認為，諸脈者皆屬于目，肝受血而能視，《景岳全書·雜證謨·眼目》有“既無紅腫，又無熱痛，而但或昏或澀，或眩暈，或無光，或年及中衰，或酒色過度，以致羞明黑暗，瞪視無力，珠痛如摳等癥”的記載，并指出其病因“無非水之不足也”，多由勞瞻竭視、暗耗精血，不能濡養目竅所致，是持續超負荷工作之后而出現的一種持續衰弱狀態。目前尚無視疲勞中醫診療專家共識類文件，本團隊對中成藥、中藥類保健產品配方進行整理分析，以方測證，將視疲勞分為肝腎陰虛、肝郁氣滯和肝血不足3種中醫證型［53］，其中肝腎陰虛型最為主要［28-29］，且為亞健康人群的常見證候［54］。

2.2 構建原則 視疲勞是一種慢性消耗性綜合征，成因復雜，并非獨立的眼病，以預防和保健為主，中醫證候則是疾病發展某一階段病理生理的概括，考慮到視疲勞的臨床特點，在中醫證候復制上應體現保健原則，需要注意以下幾點：1）造模方法的干預因素宜單一，過多干預因素的動物模型重現性較差；2）造模周期適中，中醫的“證”是一種階段性、動態性特征，周期過長易出現證候的轉化或對動物造成不可逆傷害，周期過短則指標無差異，15～30 d為宜；3）造模方法以不對實驗動物造成實質性傷害為宜，如不宜用手術切除腎上腺而成的腎陽虛動物模型［55］；4）造模停止后，可自行恢復；5）關鍵指標應出現顯著性差異；6）陽性藥應依據方證相應的原則選擇對證藥物（中成藥或經典湯劑），最好該藥物對視疲勞、干眼癥等眼部問題有相關臨床或動物實驗基礎。

2.3 視疲勞肝腎陰虛證候模型構建策略 肝腎陰虛證是視疲勞者的常見證型，主要與肝腎精血不足，經筋失養以至調節失司有關，肝腎陰液相對陽熱不足耗傷陰津而呈現出虛熱之象。目前造模方法主要有3種，分別為灌胃利血平、甲狀腺素皮下注射四氯化碳花生油法，慢性激怒法和灌胃激素結合夾尾法［10］。灌胃利血平和甲狀腺素，皮下注射四氯化碳花生油的造模方法干預因素較多，易造成動物不可逆損傷。慢性激怒法干預因素單一，易于復制，但每只大鼠造模時間需隨實驗天數增加，實驗周期較長，可篩選激怒時間來設計適宜于保健的造模劑量。灌胃激素結合夾尾法，實驗干預因素較少，干預手段較為溫和，符合保健的原則，激素對實驗動物的作用明確，且實驗周期較短。可參考筆者對造模方法和評價指標進行改良優化的肝腎陰虛模型［10］，即通過灌胃左甲狀腺素鈉和夾尾情志刺激造成“肝腎陰虛”，從動物的環核苷酸、內分泌激素、免疫因子等內在生化指標的變化來判斷模型是否成立。陽性藥物宜選擇杞菊地黃丸、明目地黃丸或石斛夜光丸，其滋補肝腎，益精明目，可緩解視疲勞人群或干眼癥人群的不適癥狀［6，56］。目前，視疲勞合并肝腎陰虛證候復合模型已有研究［9，30］，但有待改進造模方法，優選檢測指標。

2.4 視疲勞肝郁氣滯證候模型構建策略 用眼過度，氣血瘀滯，致脈絡郁閉，氣血不充，而致肝郁氣滯，其與神經中樞的調節密切相關，多表現為神經系統的功能紊亂，情緒的異常改變，消化系統、內分泌腺、代謝和電解質的平衡的紊亂［57］。在中醫證候研究時，應注意區分郁怒和發怒的特點，“郁怒”即受到刺激有怒不能發而壓抑在體內，大鼠表現為胡須下垂叫聲尖細、貼邊、扎堆活動和飲食減少等，發怒則“嘶咬”“粗叫”［58］。可參考我們曾應用的肝郁模型［11］，即通過孤養和慢性束縛應激以造成大鼠“郁怒”，對動物外觀狀態、海馬組織中單胺類神經遞質以及環核苷酸水平變化來判斷模型是否成立。陽性藥物可選擇丹梔逍遙丸，其疏肝解郁，健脾合營，可改善更年期女性干眼的臨床癥狀與客觀體征［59］。目前肝郁氣滯證候模型研究較為成熟，可在上述證候模型基礎上結合光照制備視疲勞合并肝郁氣滯證候復合模型進一步探索。

2.5 視疲勞肝血不足證候模型構建策略 肝開竅于目而主藏血，若肝血虧虛，血不能上榮于目，則出現視疲勞，多表現為交感神經活動減退，紅細胞能量代謝低下，機體代謝率降低，血液流變學與紅細胞變形性異常，機體處于代償性調節血量的保護狀態等表現［60］。目前血虛模型的方法主要有3種，分別為腹腔注射環磷酰胺法［12］、綜合放血法［13］和放射線輻照法［14］。環磷酰胺法破壞骨髓造血系統，影響骨髓造血干/祖細胞的增殖、分化、轉移，免疫功能，有研究表明是一種脾陽虛證候模型［15］。放射線輻照法主要影響外周血白細胞，損傷骨髓造血系統，但血虛的程度與射線照射劑量成正比。有研究表明適宜劑量60Co-γ射線照射動物后，四物湯可逆轉動物的血虛狀態［14，61］，可篩選輻射劑量來設計適宜于保健的造模劑量。綜合放血法直接造成外周血細胞數減少，去掉干預手段后，動物造血功能可恢復，對動物傷害較小。可參考我們曾應用的血虛模型［13］，使小鼠“有形之血不能速生”，血液虧損而新血化生不足，再結合光照照射制備視疲勞肝血不足證候模型，對免疫功能、造血功能和外周血象的變化來判斷模型是否成立。陽性藥物可選擇芍藥甘草湯，方中白芍、甘草，一酸一甘，甘緩酸收，酸甘化陰而陰血充足，上承于目，可緩解干眼癥人群的臨床癥狀［62］。但目前只有肝血不足證候模型的研究，可在上述證候模型基礎上結合光照制備視疲勞合并肝血不足證候復合模型進行探索。

3 討論

本文在現有研究的基礎上提出了視疲勞模型的構建原則及策略，進一步根據現有中醫證候模型的研究進展提出了視疲勞中醫證候復合模型的構建原則及策略。我們已對藍光照射復合肝腎陰虛證候［9］及肝腎陰虛證候［10］、肝郁氣滯證候［11］和肝血不足證候［12-15］模型做了一定的研究，但是發現藍光可造成大鼠視網膜的損傷，而一般生活中的藍光不會出現此種損傷。未來將繼續研究，先考察藍光照射模型恢復一段時間后損傷是否可逆，或改進光源為白光以驗證本文動物模型，再探索視疲勞中醫證候模型的合理性，并挖掘表征模型成立的關鍵指標，建立緩解視疲勞產品成熟可行的動物實驗評價方法，為深入的機制內涵研究奠定基礎，并為其精準應用提供指導［63］。

利益沖突聲明：無。

參考文獻

［1］LARESE FILON F，DRUSIAN A，RONCHESE F，et al.Video Display Operator Complaints：A 10-Year Follow-Up of Visual Fatigue and Refractive Disorders［J］.Int J Environ Res Public Health，2019，16（14）：2501.

［2］鄧如芝，朱昱，張嘉璠，等.中國普通群眾視疲勞現況調查與影響因素［J］.中華眼視光學與視覺科學雜志，2019，21（9）：668-676.

［3］薛皓月，史彥斌，金家驊，等.視疲勞防治中藥專利的研究概況及其用藥規律分析［J］.中國實驗方劑學雜志，2019，25（7）：195-200.

［4］蘇明.七葉洋地黃雙苷滴眼液治療視屏終端綜合征50例［J］.國際眼科雜志，2012，12（1）：163-164.

［5］翟鵬貴，趙珺彥，周大興，等.萬壽菊提取物緩解視疲勞作用的人體試食試驗效果觀察［J］.中國預防醫學雜志，2012，13（4）：267-270.

［6］武愛軍.杞菊地黃濃縮丸治療視疲勞的臨床研究［J］.現代中西醫結合雜志，2011，20（33）：4235-4236.

［7］張祝強，左韜，趙磊，等.撳針聯合滴眼液治療視頻顯示終端視疲勞療效觀察［J］.上海針灸雜志，2019，38（10）：1140-1143.

［8］王霞，袁夢，胡麗君，等.不同眼部休息方法對緩解醫學生視疲勞的作用［J］.中國學校衛生，2016，37（9）：1314-1317.

［9］趙丹萍，張建軍，黃志強，等.肝腎陰虛復合藍光照射視疲勞模型的建立及杞菊明目片功效評價［J］.中華中醫藥雜志，2021，36（4）：2044-2049.

［10］黃志強，張建軍，趙丹萍，等.肝腎陰虛證候小鼠模型的建立及枸杞菊花方緩解視疲勞的中醫功效研究［J］.北京中醫藥大學學報，2022，45（6）：578-586.

［11］趙丹萍，張建軍，王旭，等.芍藥內酯苷、芍藥苷對慢性束縛應激肝郁模型大鼠海馬單胺類神經遞質及cAMP、cGMP的影響［J］.世界中醫藥，2018，13（1）：146-150.

［12］朱映黎，張建軍，王景霞，等.芍藥內酯苷和芍藥苷對環磷酰胺致血虛小鼠的補血作用及對GM-CSF，IL-3，TNF-α影響的比較研究［J］.中國中藥雜志，2015，40（2）：330-333.

［13］張建軍，黃銀峰，王麗麗，等.白芍、赤芍及芍藥苷、芍藥內酯苷對綜合放血法致血虛小鼠補血作用的比較研究［J］.中國中藥雜志，2013，38（19）：3358-3362.

［14］屈勝勝，張建軍，黃銀峰，等.芍藥苷、芍藥內酯苷對放射線輻照法致血虛小鼠的補血作用［J］.中國中藥雜志，2014，39（15）：2952-2955.

［15］費文婷，侯燕，王玉杰，等.瑪咖對免疫抑制-脾虛證小鼠能量代謝及免疫調節機制研究［J］.中華中醫藥雜志，2018，33（5）：1874-1880.

［16］王勤美，王雁，白繼，等.視疲勞診療專家共識（2014年）［J］.中華眼視光學與視覺科學雜志，2014，16（7）：385-387.

［17］白雪，曾慶華，李瑾，等.久視對實驗動物樹鼩睫狀肌組織的影響［J］.中國臨床康復，2004，8（17）：3316-3318.

［18］張堰黎.一種以樹鼩為實驗動物構建的視疲勞動物模型［P］.CN1480911，2004-03-10.

［19］楊春宇，胡皓，向奕妍，等.LED照明環境下照明參數對人眼視疲勞的影響［J］.土木建筑與環境工程，2018，40（4）：88-93.

［20］王云，胡曉楠.枸杞子對視疲勞的緩解作用研究［J］.食品研究與開發，2020，41（23）：56-60.

［21］李麗維，王玥，周王誼，等.熟地黃對視網膜損傷小鼠的影響［J］.食品研究與開發，2021，42（4）：72-76.

［22］KAN J，CHENG J，GUO J，et al.A Novel Botanical Combination Attenuates Light-Induced Retinal Damage through Antioxidant and Prosurvival Mechanisms［J］.Oxid Med Cell Longev，2020，2020：7676818.

［23］倪穎勤，王越琦，時樂，等.藍光誘導視網膜光感受器變性大鼠模型的實驗研究［J］.中國臨床醫學，2010，17（5）：618-622.

［24］張熙伯，余玲，何躍，等.長期視屏輻射對視神經視網膜的影響［J］.廣東醫學，2012，33（10）：1466-1469.

［25］由東，劉馨湄，才鳳.復方牛磺酸滴眼液抗眼疲勞實驗研究［J］.中國藥業，2018，27（24）：8-10.

［26］丁辰，蔡建明.紫外線輻射對眼的損傷效應［J］.中華放射醫學與防護雜志，2016，36（2）：149-153.

［27］HIRAMOTO K，YAMATE Y，ORITA K，et al.Prevention of scattered light-induced asthenopia and fatigue by a polarized filter［J］.Photodermatol Photoimmunol Photomed，2010，26（2）：89-92.

［28］王超，李翔，姜世懷，等.視頻終端視疲勞的中醫辨證分型探討［J］.遼寧中醫雜志，2014，41（4）：732-734.

［29］蘇晶，劉新泉，張殷建.視屏顯示終端視疲勞中醫證候調查及證型研究［J］.河北中醫，2016，38（10）：1484-1487.

［30］王家良，馬宏杰，鄭燕林.清潤養目口服液對肝腎陰虛模型兔血清激素水平及睫狀肌組織中cAMP、cGMP含量的影響研究［J］.新中醫，2020，52（7）：4-7.

［31］蘇晶，劉新泉.VDT操作者雙眼視功能參數的測定及其與視疲勞的關系［J］.眼科，2016，25（2）：110-114.

［32］徐明偉，金龍哲，田興華，等.受限空間不同照度環境下VDT作業視覺疲勞［J］.工程科學學報，2020，42（12）：1605-1612.

［33］王家琦，翟玥，劉澤豫，等.大學生電子產品使用與視疲勞發生的相關性分析［J］.眼科新進展，2018，38（1）：65-68.

［34］王養正，肖湘華，潘士印，等.山莨菪堿滴眼液對兔眼睫狀肌及視網膜血流的影響［J］.國際眼科雜志，2008，8（11）：2219-2220.

［35］程瑞萍，秦力維，王懷祿，等.彩色多普勒超聲對高度近視眼血流動力學研究［J］.中國臨床醫學影像雜志，2004，15（6）：303-305.

［36］安勇，張雪娟，李淑琴，等.早產兒視網膜病變近視患兒屈光及晶狀體調節參數的變化及意義［J］.國際眼科雜志，2020，20（9）：1524-1528.

［37］黃增霞，潘麗軍，張曼.葉黃素強化食用油緩解視疲勞效果研究［J］.安徽農業科學，2011，39（22）：13538-13541，13546.

［38］葛堅，王寧利.眼科學［M］.3版.北京：人民衛生出版社，2015：66-68.

［39］PELLEGRINO A，BURD HJ，PINILLA CORTS L，et al.Anterior lens capsule strains during simulated accommodation in porcine eyes［J］.Exp Eye Res，2018，168：19-27.

［40］史銘宇，張勁松.不同年齡健康人眼調節狀態超聲生物顯微鏡對比觀察［J］.中國實用眼科雜志，2009，27（7）：726-730.

［41］卿國平.晶狀體懸韌帶［J］.中華眼科雜志，2012，48（3）：277.

［42］劉艾琳，陳倩，畢穎文，等.超聲生物顯微鏡對國人正常眼瞼結構的觀察分析［J］.中國眼耳鼻喉科雜志，2016，16（6）：388-390，394.

［43］MORK R，BRUENECH JR，THORUD HM.Effect of Direct Glare on Orbicularis Oculi and Trapezius During Computer Reading［J］.Optom Vis Sci，2016，93（7）：738-749.

［44］吳登艷，陳錫龍，閆先俠，等.疲勞毒素對離體兔眼睫狀肌條收縮作用的影響［J］.蘭州大學學報：醫學版，2011，37（2）：26-29.

［45］于莉，黎明，周曉萍，等.瞼板腺功能障礙性干眼癥臨床治療探討［J］.中國實用眼科雜志，2014，32（1）：76-78.

［46］張玉明，王芳芳，李寶貞，等.干燥綜合征患者干眼病的臨床分析［J］.中華風濕病學雜志，2012，16（8）：523-526.

［47］沙明慧.麥冬多糖基于TLR4/MyD88/NF-κB信號通路調控干燥綜合征頜下腺炎性微環境的機制［D］.南京：南京中醫藥大學，2019.

［48］BHATTACHARYA D，YU L，WANG M.Expression patterns of conjunctival mucin 5AC and aquaporin 5 in response to acute dry eye stress［J］.PLoS One，2017，12（11）：e0187188.

［49］朱卉，段國方，王艷麗.視疲勞患者血清NO、SOD、MDA水平檢測結果分析［J］.實用醫藥雜志，2013，30（6）：516-517.

［50］LEE YY，CHO NH，LEE JW，et al.Clinical Characteristics of Patients with Adrenal Insufficiency in a General Hospital［J］.Endocrinol Metab（Seoul），2017，32（1）：83-89.

［51］MATSUBAYASHI S，NAKATAKE N，HARA T.Possible adrenal insufficiency among fatigue patients in a psychosomatic medical clinic［J］.Endocr J，2020，67（1）：53-57.

［52］魏穎，郭穎，李明亮，等.紫蘇籽肽抗疲勞功效及其作用機理［J］.中國食品學報，2021，21（7）：157-162.

［53］周雪，張建軍，樂娜，等.緩解視疲勞功能中藥復方保健產品配方規律及特點分析［J］.中草藥，2020，51（14）：3753-3762.

［54］中華中醫藥學會.亞健康中醫臨床指南ZYYXH/T2-2006［M］.北京：中國中醫藥出版社，2006：1-2.

［55］呂銀娟，周安方，張智華，等.雙側腎上腺大部切除腎陽虛動物模型的建立［J］.湖北中醫藥大學學報，2013，15（5）：21-23.

［56］鄭東興，雷帥臣，蔡光輝.石斛夜光丸及明目地黃丸治療干眼癥的療效對比［J］.中國現代醫藥雜志，2016，18（4）：40-42.

［57］黃柄山，李愛中，范隆昌，等.肝郁氣滯證及其實質的研究［J］.黑龍江中醫藥，1989，32（5）：1-5.

［58］喬明琦，張惠云，陳雨振，等.肝郁證動物模型研究的理論思考［J］.中國醫藥學報，1997，12（5）：42-44.

［59］蔡文麗，劉嬌，孫由芹.丹梔逍遙丸聯合羥糖甘滴眼液治療更年期女性干眼的療效分析［J］.國際眼科雜志，2016，16（6）：1116-1119.

［60］石林階，張自強，盧義欽，等.肝血虛證病理生理學基礎的初步研究［J］.湖南醫科大學學報，1997，3（5）：38-42.

［61］高月.血虛證實質及四物湯反證研究［J］.中國實驗方劑學雜志，2003，9（4）：58-60.

［62］趙志敏，李朝軍.芍藥甘草湯加減治療干眼癥36例［J］.河南職工醫學院學報，2006，18（3）：220-222.

［63］王林元，王淳，張建軍，等.辨證保健理論體系的構建［J］.中華中醫藥雜志，2022，37（9）：4993-5000.

（2022-11-15收稿 本文編輯：吳珊）

基金項目：國家重點研發計劃（2018YFC1706800）作者簡介：黃志強（1997.12—），男，碩士研究生在讀，研究方向：緩解視疲勞類中藥復方產品研究，E-mail：13793477560@163.com通信作者：王林元（1961.10—），男，碩士，教授，博士研究生導師，研究方向：中醫藥基本理論及新技術和產業化，E-mail：wangly@bucm.edu.cn；陳亮（1986.01—），男，博士，高級營養研究科學家，研究方向：中藥保健食品功效和機制研究，E-mail：Clark.Chen@amway.com