基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與分子對(duì)接技術(shù)探究蒙藥匝迪-5對(duì)缺血性心臟病和缺血性腦卒中“心腦同治”的作用機(jī)制

王凱 張雪妮 王建華 賈鑫 朱小玲 董玉

缺血性心臟病是指因冠狀動(dòng)脈狹窄、冠狀動(dòng)脈痙攣、炎癥等引起心肌組織供血不足、缺血、缺氧甚至壞死而導(dǎo)致的心臟病[1]。缺血性腦卒中是指因?yàn)槟X部血管破裂或者阻塞導(dǎo)致的血液無(wú)法正常流入大腦而對(duì)腦組織造成損害的一種腦血管疾病。隨著我國(guó)人口的老齡化以及代謝危險(xiǎn)因素的持續(xù)流行,缺血性心臟病和缺血性腦卒中對(duì)人民的健康和生活造成的壓力和負(fù)擔(dān)將持續(xù)增加,對(duì)我國(guó)的疾病防治策略和社會(huì)開(kāi)支以及各種資源的配置也提出了新的挑戰(zhàn)[2]。

蒙藥匝迪-5出自《蒙醫(yī)成方集》,由肉豆蔻、木香、土木香、廣棗和蓽茇組成,在蒙醫(yī)臨床上認(rèn)為該復(fù)方能養(yǎng)心安神、舒心解郁,常用來(lái)治療“心赫依病”、心悸、心煩失眠和神昏譫語(yǔ)等。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,該方對(duì)心肌缺血再灌注損傷有明確的保護(hù)作用,對(duì)抑郁癥也有良好的治療作用。課題組前期已經(jīng)對(duì)該復(fù)方所含有的成分進(jìn)行了分析,對(duì)活性成分進(jìn)行了初步篩選,對(duì)活性成分的作用機(jī)制進(jìn)行了初步探究,并通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了該復(fù)方能有效的改善大鼠心肌缺血的狀況,但對(duì)該方治療缺血性心臟病的藥效物質(zhì)成分及作用機(jī)制尚不明確。另外,有研究證實(shí)本方中的一些藥效成分可以通過(guò)血腦屏障到達(dá)大腦神經(jīng)元細(xì)胞。“心腦同治”理論起源于傳統(tǒng)中醫(yī)理論體系,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)“心腦同治”理論的研究驗(yàn)證了心腦之間在功能上是相互影響的,且心腦血管疾病之間有共同的病理基礎(chǔ)——?jiǎng)用}硬化[3]。因此,有理由認(rèn)為本方對(duì)缺血性腦卒中也具有一定的治療效果。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是一門融合系統(tǒng)生物學(xué)、信息網(wǎng)絡(luò)學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)和藥理學(xué)的綜合學(xué)科。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的多成分、多靶點(diǎn)、多通路的分析特點(diǎn)特別適用于傳統(tǒng)醫(yī)藥的作用機(jī)制的闡釋。本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)探討蒙藥匝迪-5與缺血性心臟病及缺血性腦卒中靶點(diǎn)之間的相互作用關(guān)系,分析并闡釋蒙藥匝迪-5對(duì)缺血性心臟病和缺血性腦卒中進(jìn)行心腦同治的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其潛在的藥理作用機(jī)制,為匝迪-5治療缺血性心臟病和缺血性腦卒中的臨床用藥提供參考,也為中醫(yī)藥治療缺血性腦卒中的研究提供新的視角。

1 資料與方法

1.1 匝迪-5活性成分

在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)(https://old.tcmsp-e.com/)中檢索肉豆蔻、木香、土木香、廣棗、蓽茇,并依據(jù)口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%、類藥性指數(shù)(drug likeness,DL)≥0.18 對(duì)活性成分進(jìn)行篩選;考慮到數(shù)據(jù)庫(kù)中有效成分的信息可能無(wú)法全面的反映藥物所含成分,除了數(shù)據(jù)庫(kù)中的活性成分外,課題組還對(duì)各味藥材的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行了檢索和整理,結(jié)合課題組實(shí)驗(yàn)室前期的體內(nèi)外含量測(cè)定結(jié)果,選擇了其中含量較高并且入血的化合物作為活性成分的補(bǔ)充。

1.2 成分靶點(diǎn)篩選

將以上收集的化合物導(dǎo)入Pharm Mapper數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.lilab-ecust.cn/pharmmapper/submitfile.html),以nom fit≥0.7的靶點(diǎn)作為化合物預(yù)測(cè)靶標(biāo);將以上化合物導(dǎo)入 Swiss Target Prediction 數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.swisstargetprediction.ch/),以probability≥0.08 為介值進(jìn)行篩選,獲得化合物靶點(diǎn)。兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)的預(yù)測(cè)結(jié)果匯總、去重,作為匝迪-5化合物預(yù)測(cè)靶點(diǎn)做進(jìn)一步分析。

1.3 疾病靶點(diǎn)的獲取與篩選

以“cerebral ischemia”“ischemic stroke”和“ischemic heart”為關(guān)鍵詞分別在Gene Card數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.genecards.org/)、OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)(https://omim.org/)和TTD數(shù)據(jù)庫(kù)(http://db.idrblab.net/)中獲取缺血性腦卒中和缺血性心臟病的疾病相關(guān)靶點(diǎn)。將三個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)靶點(diǎn)匯總、去重,得到疾病的靶點(diǎn),通過(guò)靶點(diǎn)即可構(gòu)建疾病與化學(xué)成分甚至各味藥材的聯(lián)系。

1.4 “藥材—化學(xué)成分—靶點(diǎn)—疾病”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將檢索到的匝迪-5活性成分相關(guān)靶點(diǎn)與“1.3”項(xiàng)下獲取的兩種疾病靶點(diǎn)取交集,即可獲得匝迪-5同時(shí)治療缺血性心臟病和缺血性腦卒中的作用靶點(diǎn)。以從匝迪-5中篩選出來(lái)的化合物和“化合物—疾病”的相交潛在靶點(diǎn)為基礎(chǔ),用Cytoscape 3.7.2軟件建立“藥材—化學(xué)成分—靶點(diǎn)—疾病”網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 蛋白相互作用(Protein-protein interaction,PPI)構(gòu)建

將篩選得到的匝迪-5同時(shí)參與缺血性心臟病和缺血性腦卒中的相交潛在靶點(diǎn)上傳至STRING 11.5數(shù)據(jù)平臺(tái)(https://cn.string-db.org/),限定物種“homo sapiens”,保留蛋白相互關(guān)系≥0.4,得到蛋白與蛋白間的相互作用信息,可得到關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.6 GO、KEGG富集分析

將潛在靶點(diǎn)上傳至DAVID平臺(tái)(https://david.ncifcrf.gov/),參數(shù)設(shè)置為H.sapiens,對(duì)靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體論(gene ontology,GO)富集分析及京都基因和基因組百科全書(shū)(kyoto encyclopedia of genesand genomes,KEGG)通路分析,并使用微生信平臺(tái)對(duì)GO富集分析和KEGG信號(hào)通路富集分析的結(jié)果進(jìn)行可視化處理,篩選出顯著富集的生物過(guò)程和通路信息,以得到藥物靶點(diǎn)的關(guān)鍵生物學(xué)注釋和藥理作用通路。

1.7 構(gòu)建“活性成分—靶點(diǎn)—通路”網(wǎng)絡(luò)

將KEGG通路富集分析得到的通路根據(jù)P-Value值排序,將排名前20的通路及其對(duì)應(yīng)的基因,與匝迪-5心腦同治的活性成分構(gòu)建“活性成分—靶點(diǎn)—通路”網(wǎng)絡(luò)圖。

1.8 分子對(duì)接核心靶點(diǎn)驗(yàn)證

分別通過(guò)Pub Chem數(shù)據(jù)庫(kù)(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)和AlphaFold蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)(https://alphafold.ebi.ac.uk/)獲取活性成分結(jié)構(gòu)及關(guān)鍵蛋白結(jié)構(gòu),運(yùn)用Auto dock 4.2軟件進(jìn)行分子對(duì)接,根據(jù)結(jié)合能來(lái)分析化合物與靶點(diǎn)的結(jié)合模式與親和力,結(jié)果用Py MOL軟件進(jìn)行可視化處理。

2 結(jié)果

2.1 匝迪-5活性成分篩選

通過(guò)TCMSP和文獻(xiàn)共篩選出67個(gè)化合物(含3個(gè)共同化合物),分別是肉豆蔻14個(gè)、木香11個(gè)、土木香10個(gè)、廣棗18個(gè)、蓽茇17個(gè)。化合物基本信息見(jiàn)表1。

表1 匝迪-5活性化合物的相關(guān)信息

2.2 疾病靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)

檢索到缺血性心臟病靶點(diǎn)共2243個(gè),缺血性腦卒中靶點(diǎn)共914個(gè)。將兩種疾病的靶點(diǎn)與匝迪-5成分靶點(diǎn)構(gòu)建韋恩圖,見(jiàn)圖 1,最終得到三者相交靶點(diǎn)104個(gè)。這些靶點(diǎn)為匝迪-5同時(shí)干預(yù)缺血性心臟病及缺血性腦卒中的潛在作用靶點(diǎn)。

圖1 匝迪-5治療缺血性腦卒中、缺血性心臟病的靶點(diǎn)交集韋恩

2.3 “藥材—化學(xué)成分—靶點(diǎn)—疾病”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將匝迪-5中67種活性成分與104個(gè)潛在靶點(diǎn)構(gòu)建“藥材—化學(xué)成分—靶點(diǎn)—疾病”網(wǎng)絡(luò),網(wǎng)絡(luò)圖有178個(gè)節(jié)點(diǎn)數(shù)、1275條邊數(shù),見(jiàn)圖2。節(jié)點(diǎn)大小與度值大小成正比,節(jié)點(diǎn)越大,說(shuō)明該節(jié)點(diǎn)存在的相互作用關(guān)系越多。節(jié)點(diǎn)較大的化學(xué)成分有:threo-austrobailignan-5,肉豆蔻木酚素,柚皮素,楊梅素等,見(jiàn)表2,推測(cè)這些成分可能是匝迪-5同時(shí)干預(yù)缺血性心臟病及缺血性腦卒中的核心成分。

注:紫色代表肉豆蔻化合物;黃色代表木香化合物;綠色代表土木香化合物;粉色代表廣棗化合物;橘色代表蓽茇化合物;灰色代表共有化合物;藍(lán)色代表疾病與藥物相交靶點(diǎn);深紅色箭頭代表兩種疾病相同的靶點(diǎn)。

表2 匝迪-5治療缺血性心臟病和缺血性腦卒中的成分中度值前9的活性化合物的相關(guān)信息

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將從STRING 11.5下載好的文件導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2得到潛在靶點(diǎn)相互作用的網(wǎng)絡(luò),見(jiàn)圖3。PPI網(wǎng)絡(luò)圖得到104個(gè)節(jié)點(diǎn),1327條邊。圖中degree值越大顏色越深節(jié)點(diǎn)越大。利用度中心性(degree)篩選蛋白互作網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵靶標(biāo)。選取degree值前10的靶點(diǎn)作為關(guān)鍵靶點(diǎn),見(jiàn)圖4。推測(cè)這些靶點(diǎn)是匝迪-5同時(shí)干預(yù)缺血性心臟病及缺血性腦卒中的關(guān)鍵靶點(diǎn)。其中與抗炎相關(guān)的有血清白蛋白(albumin,ALB)靶點(diǎn)、腫瘤壞死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)靶點(diǎn);與抗動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)的有ALB靶點(diǎn);與抗血小板聚集相關(guān)的靶點(diǎn)有ALB靶點(diǎn)、一氧化氮合成酶3(nitric oxide synthase3,NOS3)靶點(diǎn);與抗凋亡相關(guān)的靶點(diǎn)有絲/蘇氨酸激酶1(serine/threonine kinase1,AKT1)靶點(diǎn)、細(xì)胞凋亡易感蛋白(Cellular Apoptosis Susceptibility Protein,CASP)靶點(diǎn);與細(xì)胞增殖或血管新生相關(guān)的靶點(diǎn)有血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)靶點(diǎn)、絲裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase3,MAPK3)靶點(diǎn)、NOS3基因;與抗氧化應(yīng)激相關(guān)的靶點(diǎn)有缺氧可誘導(dǎo)因子1(hypoxia inducible factor,HIF-1)A靶點(diǎn)。

注:A 潛在靶點(diǎn)蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖;B 潛在靶點(diǎn)蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖。

圖4 關(guān)鍵靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖

2.5 GO功能富集分析

將104個(gè)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能富集分析。列出分析結(jié)果中-lgP排名前10的功能信息路徑,見(jiàn)圖5。結(jié)果顯示,在生物學(xué)過(guò)程中,對(duì)磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)信號(hào)的正向調(diào)節(jié)、對(duì)缺氧的反應(yīng)等影響較大;在分子功能層面上,匝迪-5同時(shí)治療兩種疾病主要涉及蛋白結(jié)合、酶結(jié)合、NADP結(jié)合等;涉及的主要細(xì)胞組分有神經(jīng)元細(xì)胞體、質(zhì)膜、細(xì)胞表面等。

圖5 匝迪-5與缺血性心臟病和缺血性腦卒中相關(guān)的靶點(diǎn)GO富集分析

2.6 KEGG生物路徑分析

將104個(gè)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析獲得136條信號(hào)通路,將信號(hào)通路按照P-value值由小到大排列,前20條信號(hào)通路見(jiàn)表3及圖6,其中與癌癥相關(guān)的的通路有癌癥通路、癌癥中的蛋白多糖通路、前列腺癌等;與抗炎相關(guān)的通路有MAPK信號(hào)通路;與糖尿病相關(guān)的信號(hào)通路有糖尿病并發(fā)癥晚期糖基化終產(chǎn)物及其受體信號(hào)通路、糖尿病性心肌病;與動(dòng)脈硬化相關(guān)的信號(hào)通路有脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化信號(hào)通路、流體切應(yīng)力和動(dòng)脈粥樣硬化信號(hào)通路等。

圖6 匝迪-5與缺血性心臟病和缺血性腦卒中相關(guān)的靶點(diǎn)KEGG富集分析

表3 匝迪-5與缺血性心臟病和缺血性腦卒中相關(guān)的前20條KEGG通路富集分析信息

續(xù)表

2.7 “活性成分—作用靶點(diǎn)—通路”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

匝迪-5活性成分和作用靶點(diǎn)及其相關(guān)通路之間的相互作用關(guān)系,如圖7所示,表明匝迪-5可通過(guò)圖上各條通路之間發(fā)揮協(xié)同作用起到同時(shí)干預(yù)缺血性心臟病和缺血性腦卒中的作用。

注:紅色代表成分;藍(lán)色代表靶點(diǎn);綠色代表通路。

2.8 利用分子對(duì)接進(jìn)行關(guān)鍵靶點(diǎn)驗(yàn)證

選取PPI網(wǎng)絡(luò)中10個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn),與度值前9的活性成分進(jìn)行分子對(duì)接,結(jié)果見(jiàn)表4,將得到的結(jié)果繪制成熱圖進(jìn)行分析,見(jiàn)圖8。研究表明,數(shù)值越小表示結(jié)合能力越強(qiáng),活性成分越容易與受體結(jié)合。活性成分與蛋白結(jié)合能小于-5.0 kcal/mol表明兩者結(jié)合活性較好,小于-7.0 kcal/mol表明兩者結(jié)合活性強(qiáng)烈。對(duì)接結(jié)果顯示,篩選出來(lái)的活性成分與部分關(guān)鍵蛋白的結(jié)合能小于-5.0 kcal/mol,表明匝迪-5中的活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)有很好的結(jié)合作用,可能是發(fā)揮藥理作用的關(guān)鍵。將結(jié)合能小于-8.0 kcal/mol的分子對(duì)接結(jié)果進(jìn)行可視化處理,見(jiàn)圖9。

注:“-”代表二者沒(méi)有相互作用。

圖9 部分蛋白和活性成分分子對(duì)接圖

表4 活性成分與關(guān)鍵蛋白結(jié)合能(kcal/mol)

3 討論

蒙藥匝迪-5是蒙醫(yī)臨床經(jīng)典名方,現(xiàn)代臨床研究表明,該方可用于治療多種精神方面的疾病和心血管疾病如抑郁癥、失眠、冠脈綜合征、心律失常等。蒙醫(yī)理論認(rèn)為,心為具有主意識(shí)、司血行功能的臟器,居于赫依之位,是病變赫依的竄行之道,匝迪-5可以有效的祛“心赫依”病。在中醫(yī)理論體系當(dāng)中,則認(rèn)為“心為藏神之臟”“腦為元神之府”,神藏于心出于腦,心腦相通,主張“心腦同治”。心腦同治理論體現(xiàn)了中醫(yī)理論的整體觀念和異病同治的原則。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為,心與腦通過(guò)“心腦軸”[24]和“腦心軸”[25]實(shí)現(xiàn)相互作用,且心腦血管疾病的病理學(xué)基礎(chǔ)均為動(dòng)脈硬化,于心則會(huì)造成心肌缺血,于腦則會(huì)造成腦部缺血。基于以上理論,我們推測(cè)對(duì)缺血性心臟病有著良好的治療效果的蒙藥匝迪-5或許對(duì)缺血性腦卒中也具有一定的治療作用。

本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析方法對(duì)匝迪-5治療缺血性心臟病和缺血性腦卒中的作用機(jī)制進(jìn)行闡釋,對(duì)其中的活性成分進(jìn)行篩選,得到作用靶點(diǎn)較多的活性成分有柚皮素、楊梅素、蓽茇寧酰胺等。分子對(duì)接的結(jié)果顯示,這些篩選出的活性成分均與關(guān)鍵靶點(diǎn)有較好的結(jié)合能力,并且我們還發(fā)現(xiàn)其中的黃酮類化合物與關(guān)鍵靶點(diǎn)的結(jié)合能普遍低于匝迪-5中的其他組分,研究也表明黃酮類化合物可以通過(guò)抗炎、抗氧化、抗凋亡等功效起到抗心腦血管缺血性疾病的作用,這提示我們其中的黃酮類化合物可能是治療缺血性心臟病和缺血性腦卒中的關(guān)鍵成分群。匝迪-5的活性成分中,柚皮素可抑制MAPK信號(hào)通路,降低Cacpase-3、Bax蛋白表達(dá),減輕心肌細(xì)胞凋亡;促進(jìn)VEGF mRNA的表達(dá)來(lái)促進(jìn)血管新生;降低體內(nèi)人白細(xì)胞介素(Interleukin,IL)-1β和TNF-α水平,起到抗炎的作用,以減輕缺血缺氧性損傷;還能緩解缺氧損傷造成的心肌細(xì)胞的肥大狀況,抑制脂質(zhì)過(guò)氧化[6]。楊梅素可以通過(guò)調(diào)節(jié)血紅素氧合酶-1(hemeoxyenase-1, HO-1)的表達(dá)起到抗氧化的作用;通過(guò)抑制血小板的聚集來(lái)干擾血栓的形成;還可以降低IL-6和TNF-α等炎癥因子的表達(dá),達(dá)到抗炎的效果[27-29]。肉豆蔻木酚素可以通過(guò)抑制炎癥反應(yīng),保護(hù)神經(jīng)元,減少腦缺血帶來(lái)的損傷;另外,肉豆蔻木酚素的抗氧化活性對(duì)治療心腦血管病也有重要作用[30]。除此之外,存在一些尚未被報(bào)道的有效成分可能為匝迪-5干預(yù)缺血性心臟病和腦缺血的主要有效成分,如threo-austrobailignan-5、bis[(2S)-2-ethylhexyl] benzene-1,2-dicarboxylate等,預(yù)測(cè)這些有效成分的功效將成為未來(lái)研究匝迪-5干預(yù)缺血性心臟病和腦缺血的潛在方向,其藥效學(xué)及作用機(jī)制有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

研究表明,缺血性心臟病和缺血性腦卒中發(fā)生的病理機(jī)制類似,均與氧化性損傷、血小板凝集、細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)等息息相關(guān)。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)GO富集分析結(jié)果表明,匝迪-5可以通過(guò)作用于ALB靶點(diǎn)起到抗血栓的作用[31];通過(guò)作用于TNF靶點(diǎn)抑制炎癥因子的產(chǎn)生[32];通過(guò)CASP3靶點(diǎn)[33-34]和基質(zhì)金屬蛋白酶-9 (Matrix metalloproteinase-9,MMP9)靶點(diǎn)[35]減弱心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞凋亡;AKT-1靶點(diǎn)[36-37]和表皮生長(zhǎng)因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)靶點(diǎn)[35]則與細(xì)胞的代謝、增殖和生長(zhǎng)密切相關(guān),在心腦細(xì)胞梗死后的保護(hù)中發(fā)揮重要作用;VEGFA靶點(diǎn)缺氧條件下可促進(jìn)細(xì)胞增殖和血管生成,VEGFA靶點(diǎn)還可以通過(guò)上調(diào)腦缺血區(qū)血管性血友病因子水平,促進(jìn)血液循環(huán),改善神經(jīng)功能缺損的癥狀[35,38]。KEGG富集分析結(jié)果顯示,匝迪-5對(duì)缺血性心臟病和缺血性腦卒中的治療和保護(hù)效果主要是通過(guò)抗血栓,促進(jìn)血管新生和抗凋亡,抗動(dòng)脈粥樣硬化等實(shí)現(xiàn),且與癌癥及糖尿病相關(guān)通路聯(lián)系密切。癌癥與心腦血管疾病聯(lián)系密切,有研究表明,癌癥可通過(guò)激活凝血因子、改變患者的凝血狀態(tài),引起血液高凝狀態(tài),形成微血栓,進(jìn)而導(dǎo)致心肌缺血和缺血性腦卒中的發(fā)生[39]。心腦血管疾病的發(fā)生與糖代謝異常之間關(guān)系密切,當(dāng)血液中的血糖和游離脂肪酸異常時(shí),會(huì)導(dǎo)致血管壁內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙,促進(jìn)炎癥反應(yīng)與血栓的形成。如晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end product,AGE)會(huì)激活其受體RAGE引發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng),使細(xì)胞纖維化,導(dǎo)致心臟和血管的炎癥和氧化應(yīng)激的發(fā)生。本研究的KEGG通路的映射結(jié)果顯示,匝迪-5的通路富集結(jié)果中出現(xiàn)了多個(gè)癌癥和糖尿病相關(guān)通路,表明匝迪-5對(duì)于治療伴有癌癥或糖尿病或者與其相關(guān)的病理因素導(dǎo)致的心肌缺血和腦缺血有良好的效果。MAPK信號(hào)通路是本研究富集到的重要通路之一,既往的研究表明,MAPK信號(hào)通路與缺血性腦卒中發(fā)生后炎性細(xì)胞因子和細(xì)胞的增殖、分化、轉(zhuǎn)錄等多種細(xì)胞進(jìn)程息息相關(guān),同時(shí)有研究表明,該信號(hào)通路可以調(diào)節(jié)血小板活化和凋亡,在血栓的形成過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用[35]。AGE-RAGE信號(hào)通路、VEGF信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路則均與血管的新生密切相關(guān)[40-41]。Ras相關(guān)蛋白1(Ras-related protein 1,Rap1)信號(hào)通路可以對(duì)血小板整合素的激活和血小板的生成發(fā)揮重要作用。HIF-1信號(hào)通路是生物處于低氧狀態(tài)下的應(yīng)激信號(hào)通路,在缺血缺氧、炎性因子刺激下,HIF-1通路可以調(diào)控缺氧適應(yīng),其轉(zhuǎn)錄的VEGF及EGF,可調(diào)節(jié)下游VEGF信號(hào)通路與叉頭盒O(Forkhead Box O,FoxO)信號(hào)通路,參與血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移、抗氧化應(yīng)激、NO合成等生物過(guò)程[42]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的分析結(jié)果表明,匝迪-5主要通過(guò)活化血小板、抗血栓、抗炎抗凋亡、促進(jìn)血管新生來(lái)達(dá)到對(duì)缺血性心臟病和缺血性腦卒中的治療和保護(hù)效果,對(duì)伴有癌癥或糖尿病的患者該方也具有一定治療效果。

本文基于“心腦同治”的理論思想,運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)對(duì)蒙藥匝迪-5治療缺血性心臟病和缺血性腦卒中的作用機(jī)制進(jìn)行了探究,對(duì)其中的活性成分、作用靶點(diǎn)及作用的信號(hào)通路進(jìn)行了分析預(yù)測(cè),為后續(xù)的活性成分篩選、作用機(jī)制的闡釋和該方用于缺血性腦卒中的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床應(yīng)用和新藥開(kāi)發(fā)提供了思路和依據(jù)。但本文僅是從數(shù)據(jù)庫(kù)及論文信息進(jìn)行了“藥材-成分-靶點(diǎn)-通路”的理論分析,沒(méi)有分析成分的量效關(guān)系,沒(méi)有分析化學(xué)成分群的總體作用,沒(méi)有分析腸道菌群對(duì)成分的介導(dǎo)作用等,因此所得的結(jié)論仍需要通過(guò)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證討論。