HPV52和HPV58感染與患者發生宮頸上皮病變風險的相關性分析

姚艷 方秀麗 黃琦 黃秀敏

宮頸癌病灶位于宮頸部位,好發于育齡期女性,在婦科惡性腫瘤中發病率極高,但普查率不及5%[1]。研究表明,人乳頭瘤病毒(HPV)感染與宮頸病變程度存在相關性,其是導致宮頸癌及其癌前病變的最主要危險因素[2]。HPV基因型較多,按照對人體的危害程度可將其分為高危型HPV與低危型HPV,其中高危型HPV感染引起宮頸癌前病變與宮頸癌的概率>90%[3]。液基細胞學(TCT)篩查能明顯提高宮頸異常細胞檢出率,雖然TCT檢查特異性較高,但靈敏度較低,因此現階段通常采用HPV-DNA檢測結合TCT篩查[4]。本研究對816例HPV感染者采用TCT篩查及HPV-DNA分型檢測,對高危型HPV感染型別分布情況、高危型HPV基因型分布情況及其與宮頸上皮病變程度間的關系展開探討,為宮頸癌及其癌前病變的防治提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年10月至2021年10月廈門大學附屬中山醫院進行檢查的816例HPV感染者,年齡22～62歲,平均年齡(42.48±7.10)歲;孕次0～4次,平均(2.02±0.11)次。患者均接受宮頸TCT檢查和HPV基因分型檢測,將其中感染高危型HPV且TCT結果為宮頸上皮病變的294例患者分為低級別鱗狀上皮病變組(LSIL)138例、高級別鱗狀上皮病變組(HSIL)127例、宮頸癌組29例。患者均對本研究表示知情同意,本研究獲得了醫院倫理委員會的審批。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準：①符合《宮頸癌及癌前病變規范化診療指南》[5]有關標準;②伴有宮頸增生和宮頸糜爛者;③無免疫系統疾病史、無免疫抑制劑用藥史者。

1.2.2 排除標準：①近1周內有性生活者;②近3 d內有陰道給藥史或行陰道沖洗者;③近3個月內有宮頸手術治療史者。

1.3 方法

1.3.1 TCT檢查：使用無菌棉拭子對宮頸/陰道口的分泌物進行擦拭做常規消毒處理,將宮頸刷略插進子宮頸管,轉動5～6圈,將宮頸口和宮頸管內脫落的細胞收集起來,將其作為標本,置入ThinPrep 2000全自動處理儀,行制片處理,采用巴氏染色,行薄層TCT進行檢測,由經驗豐富的病理科醫師進行檢查,以TBS分類系統為細胞學診斷標準進行描述。

1.3.2 HPV-DNA分型檢測：收集宮頸脫落細胞,將其作為標本,實施聚合酶鏈反應(PCR)體外擴增技術,然后做雜交、洗膜、染色處理,采用導流雜交法檢測基因型別,操作按照試劑盒標準進行,HPV-DNA分型共檢測出21種HPV基因亞型,其中高危型HPV包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68,低危型HPV包括HPV6、11、41、42、43、CP8304。

1.3.3 陰道微生態檢查：取膀胱截石位,在陰道內放入無菌窺陰器,將宮頸充分暴露,操作過程中不能以任何潤滑劑或消毒劑處理外陰、陰道、宮頸和窺陰器,使用無菌棉拭子擦拭陰道穹后部或深部進行標本采集,取陰道分泌物送檢,進行陰道微生態檢查,主要包括pH值、白細胞酯酶、唾液酸甘酶、過氧化氫(H2O2)。

1.4 觀察指標 (1)分析高危型HPV感染型別分布情況。(2)分析不同宮頸上皮病變程度高危型HPV基因型分布情況。(3)分析HPV52和HPV58感染與宮頸上皮病變程度的相關性。(4)分析陰道微生態異常與宮頸上皮病變程度的相關性。

2 結果

2.1 高危型HPV感染型別分布情況 816例HPV感染者中檢出高危型HPV感染者294例,檢出率36.03%,且TCT結果顯示,294例高危型HPV感染者均存在不同程度的宮內上皮病變。其中感染率較高的型別是HPV16、52、58,分別為36.73%、15.99%、13.95%,其他主要型別依次是HPV53、18、66、68、31、33、39。見表1。

表1 高危型HPV感染型別分布情況

2.2 不同宮頸上皮病變程度高危型HPV基因型分布情況 LSIL組、HSIL組、宮頸癌組患者的HPV16、HPV52、HPV58感染率隨著宮頸上皮病變程度加重而依次遞升,且宮頸癌患者主要感染基因型為HPV16、52、58,感染率分別為58.62%、27.59%、24.14%,均高于其他高危型HPV基因型(3.45%)。見表2。

表2 不同宮頸上皮病變程度高危型HPV基因型分布情況比較 例(%)

2.3 HPV52和HPV58感染與宮頸上皮病變程度的相關性 294例宮頸上皮病變患者中,HPV52和HPV58感染率為29.93%,其中LSIL組為21.01%,HSIL組為34.65%,宮頸癌組為51.72%。LSIL組、HSIL組、宮頸癌組患者的HPV52和HPV58感染率隨著宮頸上皮病變程度加重而依次遞升,差異有統計學意義(χ2=13.145,P<0.05)。見表3。

表3 HPV52和HPV58感染與宮頸上皮病變程度的相關性

2.4 陰道微生態異常與宮頸上皮病變程度的相關性 3組患者的pH值、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、H2O2陽性率隨著宮頸上皮病變程度加重而依次遞升,3組差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 陰道微生態異常與宮頸上皮病變程度的相關性 例(%)

3 討論

最常見的3種惡性腫瘤分別為卵巢癌、宮頸癌及子宮內膜癌,其中宮頸癌發病率最高,且呈逐年上升趨勢[6]。國內外研究表明,宮頸上皮病變能夠反映宮頸癌持續發展情況,而高危型HPV感染是導致宮頸癌及癌前病變發生的主要因素,其會引起宮頸細胞變性,從而出現不同程度的病變[7,8]。因此,女性宮頸上皮病變篩查對于盡早發現宮頸癌具有重要意義,其中HPV基因型檢測是一種針對宮頸癌及癌前病變的初步篩查的重要技術。

目前,已經有100多種HPV基因型得到了確認,而不同基因型感染會導致不同的臨床結局,根據HPV基因型致病能力的強弱將其分為高危型群和低危型群,其中宮頸癌與高危型HPV持續感染密切相關,尤其是高危型HPV16和HPV18[9,10]。然而,大量研究發現,我國女性的HPV基因型分布特點與西方女性之間存在顯著性差異,不同地區人群感染不同HPV基因型的致病性強弱也不同,HPV52和HPV58在西方較為罕見,但在我國卻位居前列[11,12]。因此,明確不同地區的HPV感染基因型分布特點,不僅能夠幫助患者預后評估,還能指導臨床制定治療方案,不僅如此,其還可以為基因疫苗的研制提供參考。Boudes等[13]研究發現,HPV基因型分布存在地區差異,主要表現為歐美女性感染的基因型大多為HPV16、18、45,除HPV16外,日本女性感染HPV52居第2位,韓國女性感染HPV58居第2位。盡管我國關于HPV感染的流行病學特征的研究較少,但也有相關文獻報道稱,相較于HPV18,我國女性感染HPV52、58更為常見[14]。本研究結果顯示,816例HPV感染者中檢出高危型HPV感染者294例,其中感染率較高的型別是HPV16、52、58,分別為36.73%、15.99%、13.95%。

由于不同亞型HPV編碼外殼蛋白的基因變異較大,致使各亞型產生的抗體幾乎沒有交叉保護作用,故容易發生HPV不同亞型之間的重復感染。多項研究表明,HPV多重感染與宮頸上皮病變嚴重程度之間的相關性并不突出,而主要與HPV亞型種類有關,但HPV多重感染可能會促使病變程度從低級向高級發展,且90%的患者會因HPV多重感染而降低其對放療的敏感性,影響臨床后續治療效果[15,16]。此外,研究顯示,HPV16、52、58在宮頸浸潤癌患者中的檢出率均高于宮頸上皮病變患者,而其他高危型HPV基因型在宮頸浸潤癌患者中的檢出率均低于宮頸上皮病變患者[17]。本研究結果顯示,LSIL組、HSIL組、宮頸癌組患者的HPV16、HPV52、HPV58感染率隨著宮頸上皮病變程度加重而依次遞升,說明感染HPV16、HPV52、HPV58型的宮頸上皮病變患者較其他高危型感染者更易發展為宮頸浸潤癌。

此外,本研究結果還顯示,LSIL組、HSIL組、宮頸癌組患者的HPV52和HPV58感染率以及pH值、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、H2O2陽性率隨著宮頸上皮病變程度加重而依次遞升,且不同程度宮頸上皮病變的感染率和陽性率具有顯著差異,表明HPV52和HPV58感染、陰道微生態異常與宮頸上皮病變程度為正相關關系。分析其原因在于,陰道微生態系統通過種類繁多、數量巨大的微生物、pH值和H2O2濃度與宿主和外界環境相互協調制約,達到動態平衡,當陰道菌群的pH值、H2O2濃度、白細胞酯酶、唾液酸苷酶中任何一項出現異常,即稱為陰道微生態失衡,引起致病菌數量增多,為外源病原體的侵襲創造條件,造成不同程度的宮頸上皮破壞,誘發宮頸上皮病變;同時,隨著陰道菌群失調,厭氧菌生長過度,HPV感染危險性大大增加,引起宮頸上皮病變[18]。

綜上所述,HPV16、52、58屬于高危型HPV感染型別,其中HPV52和HPV58感染、陰道微生態異常與宮頸上皮病變程度呈正相關,隨著宮頸上皮病變程度的加重,HPV感染率和陰道微生態異常率也出現升高,因此應維持陰道微生態平衡,為預防HPV感染、降低宮頸癌發病率創造有利條件,值得臨床進一步深入研究。