MPP患兒肺泡灌洗液中Gal-3 IL-33表達(dá)及MP載量中性粒細(xì)胞比例水平檢測(cè)與相關(guān)性分析

樊夢(mèng)潔, 楊 遙

(湖北省宜昌市第一人民醫(yī)院/三峽大學(xué)人民醫(yī)院兒科, 湖北 宜昌 443000)

肺炎支原體肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)是由肺炎支原體引起的肺炎,好發(fā)于兒童[1]。臨床常表現(xiàn)為干咳、發(fā)熱等癥狀,若不及時(shí)治療,還會(huì)出現(xiàn)心臟腎臟等多器官損害,嚴(yán)重影響患兒的生命健康[2]。一般采用肺泡灌洗液(BALF)做病原微生物檢查來(lái)確定病原菌,其是通過(guò)支氣管鏡進(jìn)入氣道,將生理鹽水注入支氣管肺泡,并收集肺泡的分泌物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查。MPP發(fā)病原因和機(jī)理尚不清楚,但目前針對(duì)細(xì)胞因子在MPP患兒肺泡灌洗液中診斷、治療等方面的研究越來(lái)越多[3]。其中半乳糖凝集素-3(Gal-3)是某種吞噬細(xì)胞合成分泌的糖蛋白,白細(xì)胞介素-33(IL-33)是來(lái)自IL-1家族的組織來(lái)源的核細(xì)胞因子,在穩(wěn)態(tài)和炎癥期間,均可在內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞等細(xì)胞中大量表達(dá)。目前對(duì)于Gal-3、IL-33在MPP中的表達(dá)研究較多,其多表示Gal-3、IL-33在MPP患兒中呈高表達(dá)。但在MPP患兒肺泡灌洗液中的表達(dá)情況以及與MP載量的相關(guān)性研究還不充分,因此本研究將MPP患兒肺泡灌洗液中Gal-3、IL-33表達(dá)與MP載量進(jìn)行相關(guān)性分析,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取2020年1月至2022年3月在我院治療的MPP患兒102例作為觀察組,其中輕癥患兒59例,重癥患兒43例,同時(shí)選取因支氣管異物就診患兒60例作為對(duì)照組,納入標(biāo)準(zhǔn):①M(fèi)PP診斷符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[4]和《兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南》[5]中的標(biāo)準(zhǔn):即胸片顯示肺紋理增多,可見(jiàn)斑點(diǎn)狀、斑片狀等陰影,血清肺炎支原體抗原陽(yáng)性;對(duì)照組患兒異物吸入時(shí)間≤24h;②重癥為滿足以下任意一項(xiàng):有壞死性肺炎表現(xiàn);影響呼吸功能或合并其他系統(tǒng)功能障礙;合并閉塞性細(xì)支氣管炎;合并全身炎癥反應(yīng)綜合征;患兒起病急且病情重,單一大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療效果不好;③年齡3～14歲;④接受支氣管鏡檢查;⑤患兒監(jiān)護(hù)人知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并有其他病原體感染;②合并有先天性心臟病、支氣管哮喘、免疫缺陷疾病等其他疾病;③近14d內(nèi)有免疫抑制劑、激素等藥物服用史。觀察組和對(duì)照組患兒臨床一般資料比較見(jiàn)表1,具有可比性。

表1 觀察組和對(duì)照組臨床一般資料比較

1.2支氣管肺泡灌洗及指標(biāo)檢驗(yàn)方法:使用視野角為100度、視野方向0度,景深為3-50mm,彎曲部彎曲角上為180度,下為90度的纖維支氣管鏡,進(jìn)行利多卡因氣道黏膜麻醉,并經(jīng)于鼻、會(huì)厭到支氣管各段,再給予2mL生理鹽水進(jìn)行支氣管肺泡灌洗,并將灌洗液收集起來(lái)送檢。采用轉(zhuǎn)速為1000r/min的離心機(jī),離心半徑為10cm,離心處理20min,分離血清,采用酶聯(lián)免疫試劑盒(蘇州博園醫(yī)療科技有限公司提供)檢測(cè)半乳糖凝集素-3(Gal-3)、白細(xì)胞介素-33(IL-33)、肺炎支原體(MP)-DNA載量、中性粒細(xì)胞水平。

2 結(jié) 果

2.1觀察組和對(duì)照組肺泡灌洗液檢查結(jié)果比較:觀察組肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA載量、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞明顯高于對(duì)照組(P<0.05);觀察組和對(duì)照組肺泡灌洗液淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 觀察組和對(duì)照組肺泡灌洗液檢查結(jié)果比較

2.2觀察組輕癥和重癥患兒肺泡灌洗液檢查結(jié)果比較:觀察組重癥患兒肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA載量、中性粒細(xì)胞明顯高于輕癥患兒(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 觀察組輕癥和重癥患兒肺泡灌洗液檢查結(jié)果比較

2.3觀察組輕癥和重癥患兒治療前后肺泡灌洗液檢查結(jié)果比較:觀察組輕癥和重癥患兒治療后肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA載量、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞較治療前降低(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 觀察組輕癥和重癥患兒治療前后肺泡灌洗液Gal-3等比較

2.4觀察組肺泡灌洗液Gal-3等指標(biāo)相關(guān)性分析:將觀察組肺泡灌洗液Gal-3、IL-33等與MP-DNA載量進(jìn)行相關(guān)分析,結(jié)果顯示:肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、中性粒細(xì)胞與MP-DNA載量呈正相關(guān),其余相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表5和圖1。

圖1 觀察組肺泡灌洗液Gal-3、IL-33等與MP-DNA載量關(guān)系散點(diǎn)圖

表5 觀察組肺泡灌洗液Gal-3等指標(biāo)相關(guān)性分析

3 討 論

肺炎支原體肺炎是由肺炎支原體引起的一種間質(zhì)性肺炎,多數(shù)為亞急性起病,發(fā)熱無(wú)定型,臨床癥狀以干咳為主,治療不及時(shí)還會(huì)出現(xiàn)心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)損害等多系統(tǒng)多器官的損害[6]。近年來(lái)臨床常采用Gal-3、IL-33診斷肺炎支原體肺炎,其中Gal-3在細(xì)胞黏附、炎癥反應(yīng)等過(guò)程中發(fā)揮重要作用[7]。IL-33是由T淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生,能夠刺激參與免疫反應(yīng)的細(xì)胞增殖、分化并提高其功能。但目前對(duì)于Gal-3、IL-33在MPP患兒BALF中的表達(dá)研究較少。

本研究對(duì)兩組患者肺泡灌洗液Gal-3等進(jìn)行比較,結(jié)果顯示觀察組肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA載量、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞明顯升高,表明MPP會(huì)導(dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂。中性粒細(xì)胞具備固有的吞噬能力,當(dāng)發(fā)生免疫系統(tǒng)紊亂,中性粒細(xì)胞被激活,從而清除外來(lái)病原體和加載靶點(diǎn),促使中性粒細(xì)胞增殖分化[8]。另外還會(huì)導(dǎo)致巨噬細(xì)胞合成,釋放多種細(xì)胞因子對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用,促使巨噬細(xì)胞增殖分化,令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。在此過(guò)程,Gal-3可與中性粒細(xì)胞和層粘連細(xì)胞聯(lián)合,促使Gal-3增殖分化,來(lái)激發(fā)肥大細(xì)胞和堿性粒細(xì)胞的活化,進(jìn)而發(fā)揮炎癥調(diào)節(jié)作用,因此表現(xiàn)為Gal-3、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞水平升高。同時(shí)有研究表示,IL-33水平異常與許多疾病的發(fā)生與發(fā)展有密切的關(guān)系[9]。其是炎癥細(xì)胞因子,分布在人體各個(gè)組織器官以及各類免疫細(xì)胞中,而在肺部主要存在于肺泡上皮細(xì)胞中,而當(dāng)肺泡上皮細(xì)胞感染受損或壞死,則會(huì)導(dǎo)致大量IL-33釋放,并與其受體結(jié)合,發(fā)生炎癥反應(yīng),致使IL-33過(guò)量表達(dá)[10]。

本研究對(duì)兩組患者輕癥和重癥患兒肺泡灌洗液Gal-3等進(jìn)行比較,結(jié)果顯示觀察組重癥患兒肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA載量、中性粒細(xì)胞明顯高于輕癥患兒,表明Gal-3、IL-33、MP-DNA載量、中性粒細(xì)胞升高提示患兒病情加重。有研究表明,Gal-3、IL-33可參與免疫反應(yīng)的細(xì)胞增殖、分化并提高其功能。因MPP重癥患兒體內(nèi)致病菌難以清除,造成免疫炎性反應(yīng)強(qiáng)烈,導(dǎo)致炎性細(xì)胞因子大量釋放,從而促使支原體感染激化呼吸道血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)Gal-3、IL-33生成,中性粒細(xì)胞分泌增加,引起炎性細(xì)胞趨化、增殖,釋放炎性介質(zhì),加重氣道高反應(yīng)性,導(dǎo)致MMP患兒癥狀加重。其中IL-33高表達(dá)可造成活性蛋白激酶被激活,導(dǎo)致白細(xì)胞介素過(guò)度分泌,從而促進(jìn)氣道黏液分泌致使病情加重。Gal-3過(guò)量導(dǎo)致中性粒細(xì)胞粘附、巨噬細(xì)胞激活,造成MMP患兒炎性反應(yīng)失控,導(dǎo)致病情加重。本研究還對(duì)兩組患者輕癥和重癥患兒治療前后肺泡灌洗液Gal-3等比較,結(jié)果顯示觀察組治療后輕癥、重癥患者肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、MP-DNA載量、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞較治療前降低,進(jìn)一步表明Gal-3、IL-33、MP-DNA載量、中性粒細(xì)胞水平與患兒病情嚴(yán)重程度有關(guān)。

本研究將觀察組肺泡灌洗液Gal-3、IL-33等與MP-DNA載量進(jìn)行相關(guān)分析,結(jié)果顯示肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、中性粒細(xì)胞與MP-DNA載量呈正相關(guān),說(shuō)明Gal-3、IL-33、中性粒細(xì)胞分泌與MP-DNA載量密切相關(guān)。當(dāng)MP感染時(shí),巨噬細(xì)胞發(fā)揮吞噬作用,從而清除病原體,減少巨噬細(xì)胞含量,同時(shí)肺損傷嚴(yán)重程度加重,導(dǎo)致細(xì)胞免疫與體液免疫反應(yīng)增強(qiáng);又因患者體內(nèi)感染病菌過(guò)多,促使Gal-3、IL-33、中性粒細(xì)胞水平分泌過(guò)多,因此肺泡灌洗液Gal-3、IL-33、中性粒細(xì)胞水平可反映MPP嚴(yán)重程度,可以為MPP的診斷和病情評(píng)估提供依據(jù)。

綜上所述,MPP患兒肺泡灌洗液中Gal-3、IL-33、MP-DNA載量及中性粒細(xì)胞比例明顯升高,與患兒病情嚴(yán)重程度有關(guān),同時(shí)肺泡灌洗液中Gal-3、IL-33、中性粒細(xì)胞與MP-DNA載量呈正相關(guān)。