飼料添加劑“新三仙”對仔豬生長性能及腸道菌群的影響

姜東平

（重慶市奉節(jié)縣動物疫病預(yù)防控制中心，重慶奉節(jié) 404600）

自20 世紀(jì)人們發(fā)現(xiàn)抗生素具有促進畜禽生長作用以來，便被廣泛地用作豬雞飼料添加劑，這對促進豬雞生長和預(yù)防疾病發(fā)揮了重要作用，但隨著抗生素的長期大劑量濫用，它的弊端也越來越明顯，引發(fā)動物腸道菌群失調(diào)、機體產(chǎn)生耐藥性、抗病力降低和藥物殘留等問題。2018 年，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部決定開展獸用抗菌藥使用減量化行動，組織制定了《獸用抗菌藥使用減量化行動試點工作方案(2018—2021 年)》，確定了各地獸用抗菌藥使用減量化行動試點養(yǎng)殖場數(shù)量。2017 年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，發(fā)布了《藥物飼料添加劑品種目錄及使用規(guī)范》的公告，明確禁止抗病促生長的抗生素在飼料中長期添加。本研究受傳統(tǒng)中藥“焦三仙”啟發(fā)，通過研究，篩選出幾種添加劑，并對其進行了比較，以期探尋促進仔豬生長、調(diào)節(jié)腸道菌群平衡和增強腸道健康的最佳組方，對替代傳統(tǒng)抗生素添加劑，促進生態(tài)健康養(yǎng)豬，具有十分重要的理論與現(xiàn)實意義。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

試驗仔豬150 頭，平均體重為6.98±0.45 kg，品種為杜×長×大三元豬，由河北省高陽某養(yǎng)殖場提供。試驗仔豬于哺乳期（14 d）進行公豬去勢，平均日齡21 d 時斷奶，28 日齡對豬群用豬瘟疫苗常規(guī)免疫，常規(guī)飼養(yǎng)管理。

1.1.2 試驗原料

“新腸泰”購自四川達邦生物技術(shù)有限公司；酸化劑、乳豬酶、枯草芽孢、酵母、果寡糖購自石家莊牧豐飼料原料貿(mào)易有限公司；飼料購自大北農(nóng)飼料有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗分組及處理

按體重、性別和胎次基本一致原則分為A、B、C、D 和E 組，每組10 頭，設(shè)3 次重復(fù)。飼養(yǎng)7 d 適應(yīng)環(huán)境后，試驗組（A 組、B 組、C 組、D 組）于平均28日齡開始，依次按0.1%拌料添加新三仙Ⅰ、新三仙Ⅱ、新三仙Ⅲ、焦三仙；對照組（E 組）不添加任何藥物。分組及處理詳見表1。

表1 試驗分組及處理

1.2.2 檢測指標(biāo)及方法

1.2.2.1 仔豬生長性能的測定

試驗全程以欄為單位記錄采食量，分別于試驗開始前（28日齡）和結(jié)束時（70日齡）對空腹斷奶仔豬稱重，計算每頭斷奶仔豬的平均日增重和料重比。

1.2.2.2 仔豬腹瀉率的測定

試驗期間每天早上9：30 觀察仔豬糞便情況，并做好記錄。腹瀉率計算見公式（1）。

1.2.2.3 仔豬大腸中腸道菌群的測定

試驗結(jié)束時（70日齡），每組隨機選4頭仔豬進行屠宰，立即剖腹并結(jié)扎結(jié)腸、盲腸和直腸的兩頭，用酒精棉球?qū)⒚總€結(jié)扎口消毒后，放入已滅菌的塑料袋中，將樣品運回實驗室，立即在超凈工作臺上稱取1.0 g 左右腸內(nèi)容物放到無菌試管中，進行1/103 至1/106 倍稀釋后，分別涂布接種于麥康凱、Rogosa 瓊脂和雙歧桿菌分離選擇性培養(yǎng)基平皿上，分別對大腸桿菌、乳酸糞腸球菌和雙歧桿菌進行菌落計數(shù)，并進一步生化鑒定。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計和分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 仔豬生長性能及腹瀉率的測定結(jié)果

仔豬生長性能及腹瀉率測定結(jié)果詳見表2。試驗仔豬的末重和平均日增重，A 組和C 組高于其他各組，B 組和D 組高于E 組，差異極顯著（p<0.01）；試驗仔豬的料重比，C組低于其他各組，A 組、B組和D 組低于E 組，差異顯著（p<0.05）；仔豬的腹瀉率，A 組和C組的腹瀉率低于其他組，B組和D組低于E組，差異顯著（p<0.05）。試驗表明，日糧中添加新三仙和焦三仙能顯著促進仔豬的生長發(fā)育和提高飼料利用率，顯著降低仔豬的腹瀉發(fā)生率。

表2 不同組方對仔豬生長性能及腹瀉率的影響

2.2 仔豬大腸中菌群數(shù)的測定結(jié)果

2.2.1 仔豬大腸中大腸桿菌數(shù)測定結(jié)果

大腸桿菌數(shù)測定結(jié)果詳見表3。A、C 組大腸中的大腸桿菌數(shù)量低于B組，差異極顯著（p＜0.01）；B組大腸中的大腸桿菌數(shù)量低于D、E組，差異極顯著（p＜0.01）。試驗結(jié)果表明，添加益生菌“新腸泰”、酸化劑和枯草芽孢桿菌對大腸桿菌有較強的抑制作用。

表3 不同組方對仔豬大腸中大腸桿菌數(shù)的影響 單位：1010CFU·g-1

2.2.2 仔豬腸道中雙歧桿菌數(shù)測定結(jié)果

腸道中雙歧桿菌數(shù)測定結(jié)果詳見表4。大腸中雙 歧桿菌的數(shù)量，B組高于其他各組，A 組、C組和D 組高于E組，差異顯著（p＜0.05）。

表4 不同組方對仔豬大腸中雙歧桿菌數(shù)的影響 單位：1010CFU·g-1

2.2.3 仔豬大腸中乳酸糞腸球菌數(shù)測定結(jié)果

大腸中乳酸糞腸球菌數(shù)測定結(jié)果詳見表5。對比大腸中乳酸桿菌數(shù)量可知，A 組、C 組數(shù)量高于B 組，差異顯著（p＜0.05），B 組數(shù)量高于D 組和E 組，差異顯著（p＜0.05）。

本次試驗測定了結(jié)腸、盲腸和直腸中大腸桿菌、乳酸糞腸球菌和雙歧桿菌的濃度，以對比添加不同組方的添加劑對斷奶仔豬大腸中菌群數(shù)的影響。試驗結(jié)果表明，A 組、B 組和C 組對斷奶仔豬大腸中有害菌起到了抑制作用，對雙歧桿菌和乳酸糞腸球菌起到了增值的作用，且C組效果最好。

3 小結(jié)與討論

3.1 新三仙對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

“新三仙”根據(jù)“焦三仙”組方原理結(jié)合仔豬的生理特點，采用包被益生菌“新腸泰”、酶制劑、酸化劑等組合而成。試驗結(jié)果表明，日糧中添加新三仙和焦三仙能顯著促進仔豬的生長發(fā)育和提高飼料利用率，顯著降低仔豬的腹瀉發(fā)生率，這可能與添加的“新腸泰”、寡糖、酶制劑和酸化劑等有關(guān)。

飼料中的營養(yǎng)物質(zhì)，70%～80%在小腸段消化吸收，20%～30%進入大腸，其中大部分排出體外，形成糞便和氨氣等排泄物。本試驗通過在飼料中添加“新腸泰”挖掘利用大腸中20%～30%的營養(yǎng)物質(zhì)，提高飼料消化率，提高仔豬生產(chǎn)性能。“新三仙”中包被的乳酸糞腸球菌，能耐高溫、耐胃酸，能順利地在大腸中定植、快速繁殖，維持腸道微生態(tài)平衡，促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，促進腸道蠕動，使動物消化道處于最佳健康狀態(tài)，提高飼料消化率。前人研究充分證實益生菌可以通過調(diào)節(jié)構(gòu)建大腸高效微生態(tài)系統(tǒng)，促進營養(yǎng)物質(zhì)在大腸段的消化和吸收，提高飼料利用率。史自濤等試驗發(fā)現(xiàn)，飼料中添加糞腸球菌可提高平均日增重和平均日采食量，降低仔豬腹瀉率，提高仔豬的生產(chǎn)性能[1]。李興華研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加酵母細胞壁多糖和枯草芽孢桿菌，能顯著提高哺乳和斷奶仔豬免疫功能和腸道消化酶活性，二者合用更能顯著促進仔豬生長發(fā)育和提高其免疫功能[2]。彭小蘭等[3]、馬秋剛等[4]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加果寡糖能提高斷奶仔豬的飼料轉(zhuǎn)化率和日增重，降低仔豬腹瀉率，其效果與添加量關(guān)系密切。王向榮等研究發(fā)現(xiàn)，4 種不同的復(fù)合酶制劑均能提高仔豬的日增重，降低料重比，降低仔豬腹瀉率[5]。賀琴等試驗表明，添加酶制劑可以補充仔豬機體內(nèi)源酶，促進仔豬健康生長[6]。酸化劑是仔豬常用的另一類添加劑，它可以降低仔豬胃酸pH 值，提高仔豬消化力。岳增華等在仔豬日糧中添加1.2%的檸檬酸或者0.5%復(fù)合酸化劑，發(fā)現(xiàn)都能顯著提高仔豬的日增重[7]。彭宏剛等[8]、李春鳳[9]、朱輝[10]、許靜波等[11]研究表明，在仔豬飼料中添加黃芪多糖能提高仔豬采食量和日增重等生產(chǎn)性能，但對料重比無顯著影響，這與本試驗的提高日增重結(jié)果一致，與日采食量和料重比結(jié)果有差別，這可能與本試驗添加了其他有效成分有關(guān)。

3.2 新三仙對斷奶仔豬腹瀉的影響

腹瀉是仔豬最常見疾病之一，防治仔豬腹瀉是養(yǎng)豬生產(chǎn)的重要任務(wù)。此次試驗發(fā)現(xiàn)，仔豬的腹瀉率，A 組和C 組的腹瀉率低于其他組，B 組和D 組低于E組，差異顯著（p<0.05）。試驗表明，日糧中添加新三仙和焦三仙能顯著降低仔豬的腹瀉發(fā)生率。這可能與添加的“新腸泰”和酸化劑等有關(guān)。

“新腸泰”是一種特殊工藝包被的乳酸糞腸球菌，相對于嚴(yán)格厭氧、培養(yǎng)和保存條件苛刻的雙歧桿菌、乳桿菌而言，糞腸球菌兼性厭氧，適宜pH 值為5.0～7.5，生長溫度為35～38 ℃，對腸道上皮細胞的粘附能力強，能迅速繁殖（19 min 繁殖一代）并產(chǎn)生大量乳酸和有益代謝產(chǎn)物，生物活性強。乳酸糞腸球菌通過產(chǎn)生揮發(fā)性短鏈脂肪酸（如丙酸、乙酸、乳酸等）降低腸腔pH 值，促進腸蠕動，從而使外源菌未能與胃腸道黏膜表面接觸黏附就被排出體外；在厭氧環(huán)境下產(chǎn)生過氧化氫和天然抗生素類物質(zhì)，減少腸道內(nèi)毒性物質(zhì)的產(chǎn)生，形成抑制或殺死有害菌的環(huán)境。Mallo J J 等[12]、史自濤等[1]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加糞腸球菌除改善斷奶仔豬的生長性能外也可以降低仔豬腹瀉率，這與本試驗的結(jié)果A 組和C 組的腹瀉率低于其他組的結(jié)果相一致。Burnell T W 等在仔豬飼料中添加延胡氏羧酸、檸檬酸、甲酸等有機酸，試驗結(jié)果表明能降低胃腸道的pH值，減少斷奶仔豬腹瀉的發(fā)生[13]。

3.3 新三仙對仔豬腸道菌群的影響

本次試驗測定了仔豬結(jié)腸、盲腸和直腸中大腸桿菌、乳酸糞腸球菌和雙歧桿菌的含量。試驗結(jié)果表明，A 組、B 組和C 組對腸道有害菌起到了抑制作用，對雙歧桿菌和乳酸糞腸球菌起到了增殖的作用，且C組效果最好。

益生菌是一類對宿主有益的活性微生物，是定植于宿主腸道、生殖系統(tǒng)內(nèi)，能產(chǎn)生確切健康功效從而改善宿主微生態(tài)平衡、發(fā)揮有益作用的活性有益微生物的總稱。益生菌是活性微生物，它們只能在相對受限的環(huán)境中存活，如營養(yǎng)條件、厭氧環(huán)境、適宜溫度等。當(dāng)脫離適宜生長環(huán)境，益生菌活力降低，甚至死亡。然而益生菌的工作場所是動物的大腸，只有數(shù)量多、活力強的益生菌到達大腸，才能發(fā)揮其生物功效。因此，益生菌應(yīng)用有3個難點：1）益生菌產(chǎn)品是活性微生物，在制劑生產(chǎn)、產(chǎn)品保存、使用過程中的穩(wěn)定性難題。2）益生菌產(chǎn)品是活性微生物，動物飼喂后，需要經(jīng)過胃、小腸后，到達適宜生長環(huán)境——大腸；經(jīng)過胃中胃酸的作用、小腸前段膽汁的作用，大多數(shù)活菌活力降低，甚至死亡。3）大腸中微生物菌群的競爭性生長。動物大腸天然生長數(shù)量龐大的微生物菌群，外源益生菌只有數(shù)量多、活力強、繁殖迅速并產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物，才能發(fā)揮其生物功效。

本次試驗所選用的“新腸泰”采用多層特定薄膜衣為腸溶包衣，到達小腸后段后崩解釋放糞腸球菌，避免胃中胃酸和腸中膽鹽的影響，保證數(shù)量多、活力強的糞腸球菌活菌到達大腸；“新腸泰”優(yōu)選的糞腸球菌菌株，相對于嚴(yán)格厭氧、培養(yǎng)和保存條件苛刻的乳桿菌、雙歧桿菌而言，糞腸球菌兼性厭氧，能迅速繁殖并產(chǎn)生大量乳酸和有益代謝產(chǎn)物，生物活性強。在大腸適宜環(huán)境中粘附力強，保證了腸道大量益生菌的定植，促進了仔豬腸道的健康發(fā)育。前人的研究充分證實了益生菌的相關(guān)作用[14]。Taras等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加糞腸球菌可排斥腸道內(nèi)有害菌的生存和繁殖，可以減少潛在致病性大腸桿菌的數(shù)量[15]，這與本次試驗結(jié)果相一致。

試驗結(jié)果表明，新三仙的3 個組方添加劑都有抑制腸道大腸桿菌增殖，促進有益菌生長的作用，“新三仙Ⅰ”“新三仙Ⅲ”在促進腸道乳酸菌的增值方面效果要好于“新三仙Ⅱ”。綜合來看，“新三仙Ⅲ”的組方在維持?jǐn)嗄套胸i腸道菌群平衡方面效果更好。