不同產地蘆薈及其炮制品的質量研究*

徐佳紅，劉 杰，2，3，簡梨娜，龔羽龍，郭江濤

(1 貴州中醫藥大學藥學院，貴州 貴陽 550025；2 國家苗藥工程技術研究中心，貴州 貴陽 550025；3 貴州中藥炮制與制劑工程技術研究中心，貴州 貴陽 550025)

本品為百合科植物庫拉素蘆薈(AloebarbadensisMiller.)、好望角蘆薈(AloeferoxMiller.)或其他同屬近源植物葉的汁液濃縮干燥物。蘆薈具有抗菌[1]、抗癌[2-3]、抗病毒[4]、抗糖尿病[5]、促進傷口的愈合[6-8]等作用，在藥用[9]和食用[10]領域具有良好的發展前景，目前蘆薈的開發利用多集中在化妝品領域。本文將不同產地的蘆薈按照《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》2003版炮制規范中的炒制法進行炮制，以《中國藥典》為參考依據，對蘆薈炒品進行薄層鑒別、水分及總灰分測定，并采用HPLC法建立蘆薈苷含量測定方法，為提升和修訂《貴州省中藥飲片炮制規范》奠定基礎，也為進一步研制相關的功能性食品和藥品提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 實驗儀器

SPD-20A高效液相色譜儀，日本島津；5C18-MS-II(4.6×250 mm，5 μm)色譜柱，COSMOSIL；ZF-1三用紫外分析儀，上海金鵬分析儀儀器有限公司；AUW120D電子分析天平，日本島津；SK8200H超聲波清洗器，上海科導超聲儀器有限公司；DZF-6050真空干燥箱，上海齊欣科學儀器有限公司；SX2-5-12箱式電阻爐，瀘南電爐烘箱廠；FA2204N電子天平，上海菁海儀器有限公司；1001-A電熱恒溫鼓風干燥箱，天津天泰儀器有限公司；GZX-9240MBE數顯恒溫水浴鍋，上海雙捷實驗設備有限公司；DK-98-II電子恒溫水浴鍋，天津市泰斯特儀器有限公司；硅膠G板20180105薄層板，青島海洋化工有限公司。

1.2 實驗材料

1.2.1 對照品與試劑

蘆薈苷對照品(批號110787-201808，純度：92.4%)，中國食藥品檢定研究院；甲醇(色譜純)，國藥集團化學試劑有限公司；乙腈(色譜純)，國藥集團化學試劑有限公司；超純水。

1.2.2 藥材

所有供試品經由貴州中醫藥大學謝軍麗老師鑒定為百合科植物蘆薈。蘆薈樣品編號：生品為SA-1～SA-8，炒品為CA-1～CA-8。樣品信息詳見表1。

表1 蘆薈樣品信息表

2 實驗方法與結果

2.1 定性鑒別

2.1.1 性狀鑒別

蘆薈生品呈不規則塊狀，深褐色至暗褐色，略顯綠色，粉末顯暗綠色至暗褐色，炒制后呈不規則顆粒狀，暗褐色。

2.1.2 理化鑒別

參照《中國藥典》蘆薈【鑒別】項下[11]方法。取生品、研品粉末各0.5 g，分別進行如下試驗：加水50 mL，振搖，濾過，取濾液5 mL，加硼砂0.2 g，加熱使溶解，取溶液數滴，加水30 mL，搖勻。供試品的生品與研品均顯綠色熒光。

取生品、炒品粉末各0.5 g，分別進行如下試驗：加水50 mL，振搖，濾過，取濾液2 mL，加硝酸2 mL，搖勻，再取濾液2 mL，加等量飽和溴水。供試品的生品與研品都生成黃色沉淀。

2.1.3 薄層鑒別

取本品粉末0.5 g，加甲醇20 mL，置水浴上加熱至沸，振搖數分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取蘆薈對照品，加甲醇制成每1 mL含5 mg的溶液，作為對照品溶液。取供試品溶液和對照品溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(100∶17∶13)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%氫氧化鉀溶液的顯色劑，在紫外光燈(365 nm)下觀察視。參照《中國藥典》2020版第四部薄層色譜法(通則0502)試驗[12]。結果顯示，在與對照品色譜相應的位置上，供試品均顯相同顏色的熒光斑點，結果如圖1所示。

圖1 八批蘆薈生品、炒品TLC

2.2 水分、總灰分測定

依照2020版《中國藥典》第四部(通則0832[13]、2302[14])對8批樣品進行水分、總灰分的測定，所測8批蘆薈生品與炒品的水分分別為5.66%～8.09%、1.60%～4.95%，總灰分分別為0.88%～2.18%、0.96%～8.59%，表明不同產地蘆薈及其炮制品之間的水分及總灰分含量存在差異。結果見表2。

表2 蘆薈及炮制品水分和總灰分含量

2.3 含量測定

2.3.1 色譜條件

流動相為乙腈-水(23∶77)等度洗脫，柱溫為30 ℃，波長為365 nm，流速為1.0 mL/min，進樣量為10 μL，理論塔板數按蘆薈苷峰計算不應低于2000(見圖2)。

圖2 蘆薈苷對照品(A)、非洲庫拉索蘆薈生品(B)、非洲庫拉索蘆薈炒品(C)

2.3.2 供試品溶液

精密稱定過60目篩的蘆薈炒品(非洲庫拉索)藥材粉末約0.6 g，加甲醇制成每1 mL含0.6 mg的溶液(mg/mL)，作為供試品試劑。

2.3.3 對照品溶液

蘆薈苷對照品儲備液的配制：精密稱取蘆薈苷對照品，加甲醇制成每1 mL含0.6 mg的溶液(mg/mL)，作為對照品試劑。

2.3.4 線性關系考察試驗

精密稱取對照品適量，加甲醇溶液制成1.2 mg/mL的溶液，搖勻，依次稀釋成1.0 mg/mL、0.8 mg/mL、0.6 mg/mL、0.4 mg/mL、0.2 mg/mL濃度的溶液。按“2.3.1”項下的色譜條件分析，以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，得到回歸方程為y=3×10-7x+222443(r=0.9995)，表明在0.2～1.2 mg/mL范圍內具有良好的線性關系。

2.3.5 精密度試驗

取對照品溶液10 μL，按照“2.3.1”項下的色譜條件，連續進樣5次，測定峰面積。得峰面積平均值為8012856.8，RSD為1.37%。表明儀器的精密度良好。

2.3.6 重復性試驗

精密量取蘆薈炒品(非洲庫拉索)供試品溶液10 μL，按照“2.3.1”項下的色譜條件，重復進樣6次。計算蘆薈炒品(非洲庫拉索)中蘆薈苷的平均含量為1.40%，RSD為1.29%，表明該方法重復性良好。

2.3.7 穩定性試驗

取對照品溶液10 μL，按照“2.3.1”項下的色譜條件，分別在(0、3、6、9、12、24 h)的時間段進樣。得蘆薈苷的峰面積平均值為7325771.89，RSD為0.35%，可以得出蘆薈苷溶液在24 h內穩定性較好。

2.3.8 加樣回收試驗

精密稱取蘆薈炒品(非洲好望角)粉末9份，約為0.3 g，分別按質量分數加入蘆薈苷對照品，按照“2.3.2”項下制備供試品溶液，按“2.3.1”項下色譜條件分析，得蘆薈炒品(非洲好望角)中蘆薈苷平均加樣回收率98.60%，RSD為1.67%，表明該方法測定準確度高。結果見表3。

表3 蘆薈加樣回收率試驗結果

2.3.9 樣品含量測定

取8個不同產地蘆薈及其炒品，按照“2.3.1”項下的色譜條件，吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定。蘆薈中蘆薈苷含量在12.78%～34.43%，蘆薈炒品中蘆薈苷含量在8.94%～28.41%。結果表明除印度庫拉索蘆薈外，同一產地的蘆薈經過炒制之后，蘆薈苷含量均降低，結果見表4。

表4 蘆薈生品、炒品的含量測定

3 結 論

本文首次對貴州制法蘆薈炮制品進行質量標準研究，采用HPLC法建立了蘆薈炒品中蘆薈苷的含量測定方法。由實驗結果可見：蘆薈經過炒制之后，其水分、總灰分、蘆薈苷的含量均有所變化。炒制品中蘆薈苷含量明顯降低，可能是由于炒制的過程中蘆薈苷被氧化而轉變為蘆薈大黃素。且在炮制過程中，炒制品苦味明顯增加，也表明部分蘆薈苷可能已經轉變成蘆薈大黃素。蘆薈炮制前后蘆薈苷含量的變化，揭示了蘆薈炮制前后其藥效物質基礎發生了改變。該研究為不同產地蘆薈的質量標準制定提供了依據，為提升《貴州省中藥飲片炮制規范》中蘆薈及其炮制品的質量標準奠定了基礎，同時也為蘆薈及其炮制品的用藥安全和質量控制提供依據。