非典型豬瘟病毒及防控現狀

文│張永明（山東省濟南市鋼城區艾山街道辦事處畜牧獸醫站）

2015年，通過測序技術在豬血清樣本中首次鑒定出豬非典型豬瘟病毒。起初認為該病毒感染后沒有臨床表現，后發現該病毒與新生仔豬先天性震顫（congenital tremor）和肢外展綜合征（splay leg syndrome）的發生有關。仔豬感染非典型豬瘟病毒后初乳攝入不足，導致嚴重的生長遲緩，嚴重可能餓死或因太過瘦小而被擠死。豬非典型豬瘟病毒能夠誘發神經系統疾病，如仔豬先天性震顫（主要是II型），增加斷奶前仔豬的死亡率，降低母豬的繁殖性能。非典型豬瘟病毒感染造成仔豬先天性震顫的暴發一般發生在1周到2個月大的仔豬。當前非典型豬瘟病毒感染對豬群造成的經濟損失有待確定，因為惟一已知有關聯的病癥是仔豬先天性震顫，其他負面影響都是間接的，難以預估，但母豬繁殖性能據估計下降10%。非典型豬瘟病毒與其他病原體的協同感染也增加了仔豬死亡率，如豬捷申病毒（porcine teschovirus）。

一、病因學

病毒顆粒為球形，直徑約為60 nm，病毒基因組為單鏈正義RNA，基因組大小約為11～11.6 kb。基因組包括一個5’-非編碼區、一個3’-非編碼區和一個單一的開放閱讀框區域，編碼一個含有3635個氨基酸的多聚蛋白。該多聚蛋白被加工成12種蛋白，包括C（衣殼蛋白）、Erns、E1、E2（包膜蛋白）和非結構蛋白Npro、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B。對來自野豬和商業農場的豬在不同國家和年份檢測到的病毒毒株的完整或部分基因組的系統發育分析，非典型豬瘟病毒顯示出高度的遺傳變異性。已觀察到五個不同的組群，組群I主要出現在北美（主要是美國）和亞洲（主要是中國），組群II主要分布在歐洲（主要是德國和奧地利）和亞洲（主要是中國和韓國），組群III主要在北美（主要是美國）和歐洲（主要是德國），組群IV和V集中在亞洲（主要是中國）。不同的毒株可以同時出現在同一個農場中，也可以出現在不同的時間。

Pestivirus屬包括11種病毒，為Pestivirus A（牛病毒性腹瀉病毒1）、Pestivirus B（牛病毒性腹瀉病毒2）、Pestivirus C（典型豬瘟病毒）、Pestivirus D（牛病毒性腹瀉病毒）、Pestivirus E（叉角羚瘟病毒）、Pestivirus F（豬瘟病毒）、Pestivirus G（長頸鹿瘟病毒）、Pestivirus H（HoBi-like瘟病毒）、Pestivirus I（Aydin-like瘟病毒）、Pestivirus J（鼠瘟病毒）和Pestivirus K（非典型豬瘟病毒）。非典型豬瘟病毒基因組序列與豬瘟病毒、牛病毒性腹瀉病毒和牛病毒性腹瀉病毒1等較熟知的Pestivirus屬病毒同源性較低，為25%～28%。

除非典型豬瘟病毒外，還在豬身上發現了另外兩種非典型Pestivirus病毒，Bungowannah病毒（引起心肌炎）和Linda病毒（引起站立橫向搖晃）。非典型豬瘟病毒已被證實是新生仔豬先天性震顫II型的主要原因，但非典型豬瘟病毒感染引起新生仔豬先天性震顫II型的確切機制尚不清楚。少突膠質轉錄因子2（Olig 2）在發生新生仔豬先天性震顫II型的仔豬中的表達增加被認為有利于該病的發生。各種研究中，新生仔豬先天性震顫II型所造成的仔豬死亡率并不一致，中國曾報道出60%的高死亡率，加拿大和巴西曾報告了24.6%和30%的死亡率。

二、傳播

出現臨床癥狀的豬，在幾乎所有組織中能檢測到非典型豬瘟病毒。頜下淋巴結中非典型豬瘟病毒載體最高，在外周淋巴器官（脾、扁桃體和腹股溝淋巴結）中發現高的RNA水平，而在神經系統（腦干、大腦和小腦）、腦脊液、消化系統（十二指腸）、血清、鼻拭子和直腸拭子中發現中等RNA水平。在淋巴器官中發現了大量的非典型豬瘟病毒RNA，這提供了病毒復制的主要位置信息，也表明非典型豬瘟病毒可能對宿主免疫系統起到抑制作用。而在小腦的內顆粒細胞層中檢測到中等水平的非典型豬瘟病毒RNA，這提供了病毒可以感染中樞神經系統的直接證據，這也解釋了為什么這種病毒會導致神經癥狀。

豬精液被認為是非典型豬瘟病毒傳播的媒介，在15%的公豬的包皮液和精液中檢測到非典型豬瘟病毒，這表明該病可能通過性傳播，這增加了養豬場預防非典型豬瘟病毒感染的復雜性。在美國和歐洲，精液是從沒有新生仔豬先天性震顫臨床病史的公豬采集的，但許多精液中仍報告了非典型豬瘟病毒感染，這表明短暫感染或持續隱性感染的公豬在精液中攜帶非典型豬瘟病毒。

在豬唾液腺、十二指腸、胰腺和結腸的樣本中發現了非典型豬瘟病毒基因組，表明糞口傳播可能是病毒傳播的另一種傳播途徑。

目前還不清楚豬群中非典型豬瘟病毒的傳播和持續感染，14周的小豬沒有表現出任何新生仔豬先天性震顫II型癥狀，但血液中檢測出非典型豬瘟病毒RNA。持續感染的豬可以在沒有任何臨床癥狀的情況下正常生長發育，但病毒會通過它們的唾液和精液排毒。1%的犢牛感染牛病毒性腹瀉病毒后便可以持續維持牛群中的病毒存在，在沒有明顯病癥的情況下，非典型豬瘟病毒持續感染的豬很可能在傳播中發揮著重要作用。

在越來越多的地區野豬中檢測到非典型豬瘟病毒，隨著野豬數量和分布范圍的不斷擴大，對非典型豬瘟病毒的維持和傳播的影響巨大，就像在歐洲傳播廣泛的典型豬瘟病毒一樣。

三、 病變

新生仔豬先天性震顫II型的組織學特征性病變是小腦白質空泡化，進一步的超微結構檢查發現，患新生仔豬先天性震顫II型的豬不僅脊髓存在髓鞘形成不足，小腦白質也存在髓鞘破壞。這些變化與典型豬瘟病毒感染仔豬和牛病毒性腹瀉病毒感染犢牛的病變不同。

四、免疫

豬對非典型豬瘟病毒感染的免疫仍是謎，如果母豬在第一胎產下一窩患新生仔豬先天性震顫II型的仔豬，那么同一頭母豬的下一窩仔豬將不會出現該病。淋巴器官中非典型豬瘟病毒RNA高載量的存在表明病毒可能作用于宿主免疫系統。因此，需要進一步研究來闡明對這種病毒的先天性和適應性免疫反應。

五、診斷

多種診斷技術可用于診斷豬非典型豬瘟病毒感染。由于實用性、速度、靈敏度和特異性，分子技術是最常用的，其中RT-PCR和qRT PCR是研究中最常應用的。可以對不同的臨床樣本進行病毒檢測，在出現臨床癥狀的動物中，中樞神經系統和淋巴器官是首選樣本，因為在這些組織中發現了較高的病毒載量，尤其是小腦和淋巴結。另一種可用的技術是下一代測序（next-generation sequencing，NGS），該技術2015年首次被用于診斷病毒。此外，NGS提供了關于可能的共感染的數據，并能獲得病毒基因組更大的片段，這有助于毒株的系統發育研究。

石蠟固定組織進行的組織學診斷具有重要意義，因為能夠可視化非典型豬瘟病毒引起的損傷。Luxol Fast Blue染色有助于觀察中樞神經系統（主要位于小腦和脊髓）中非典型豬瘟病毒引起的髓鞘破壞。組織病理學、免疫組織化學技術和原位雜交技術均能檢測病變部位的病毒（蛋白質或核酸）。

用于協助診斷的重要方法是血清學檢測。針對非典型豬瘟病毒感染所述的檢測技術包括免疫熒光、病毒中和與針對NS3、E2和Erns蛋白的間接酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。這些技術有許多重要的應用，可用于流行病學研究和感染監測，這些血清學檢測技術還具有易于執行和低成本的優勢。

六、 防控

迄今為止還沒有有效的藥物或疫苗可用于治療或預防非典型豬瘟病毒感染。Zhang等人構建了非典型豬瘟病毒糖蛋白E2的重組病毒，在小鼠中誘導了強大的體液和細胞免疫反應，然而還需要進一步的研究來證明其能夠引起有效的免疫反應。

由于第一胎母豬受非典型豬瘟病毒感染的影響最大，因此在豬群中引入未生產過的母豬很可能是該疾病流行中的一個重要因素，有必要采取預防措施來解決這一問題。需要對豬群進行分子技術診斷，識別出持續感染的豬只并從豬群中移除，因為它們可能通過精液、糞便和口水傳播病毒。另一個需要監測的是人工授精使用的商品豬精液，一種可能的措施是對這些公豬及其精液進行的分子技術診斷。

生物安全措施不容忽視，引入新豬只應在進入養殖場之前進行隔離和檢疫。在設施中執行適當的清潔和消毒程序，對養殖場人員和車輛的消毒和行動限制。對野生動物、嚙齒動物和昆蟲的控制也有助于豬群健康。