臺灣新發生重大外來入侵物種

胡美玲　王沛　楊海芳等

關鍵詞 虎紋非洲大蝸牛；植物檢疫；外來入侵物種；瑪瑙螺屬；陸生軟體動物

中圖分類號：S 41 文獻標識碼：A DOI：10.16688/j.zwbh.2022199

虎紋非洲大蝸牛Achatina panthera （Ferussac，1832）是近年來我國臺灣新發生的重大外來人侵物種。該蝸牛起源于非洲南部的津巴布韋、剛果一帶，人為引種傳人馬達加斯加、毛里求斯[1-3]，2011年傳人臺灣，2013年就擴散到臺灣全島[1，4]，種群密度和危害性已超過非洲大蝸牛A.fulica Bowdich，1822[5]，入侵擴散之快極其罕見，對蔬菜、水果、花卉等農作物危害極大，且是許多人畜寄生蟲和病原菌的中間宿主，對臺灣當地的農林生產和人畜健康構成嚴重威脅[5]。虎紋非洲大蝸牛在中國大陸尚無分布，加強植物檢疫是防止該蝸牛入侵中國大陸最為經濟有效的技術措施。為此，本文回顧了該蝸牛的分類歷史，考察了所有異名，厘清其系統學分類地位，通過核對各地實物標本結合現有文獻，重新描述了虎紋非洲大蝸牛的形態特征，并與近似種的主要形態鑒別特征進行了比對和討論，首次測定該蝸牛的coi基因序列，在此基礎上建立了分子比對鑒定方法。最后提出了相應的檢疫風險管理措施，為有關部門應對虎紋非洲大蝸牛的入侵提供科學依據。

1材料與方法

1.1材料

標本來源。2011年8月20日張家港海關從莫桑比克進境的原木中截獲虎紋非洲大蝸牛活體成螺1枚、幼螺1枚，標本按軟體動物常規檢疫規范（SN/T 3067-2011）[6]的方法處理后，用無水乙醇保存于－40℃的專用冰柜中備用。2021年12月中國濕地博物館征集獲得虎紋非洲大蝸牛成螺貝殼標本臺灣產1枚、毛里求斯產2枚。

虎紋非洲大蝸牛近似種標本：虎斑瑪瑙螺成貝2枚，由中國濕地博物館征集獲得；無斑瑪瑙螺成貝3枚，由各地國境口岸檢疫截獲；非洲大蝸牛成貝56枚，采集于福州和臺灣。

本研究涉及的標本保存單位縮寫如下：福州海關技術中心國家軟體動物檢疫鑒定重點實驗室一TCFCD;中國濕地博物館-ZGSDBWG。

1.2方法

1.2.1形態描述和鑒定

用游標卡尺測量貝殼的殼高和殼寬。肉眼或放大鏡觀察貝殼的外部形態，用體視顯微鏡仔細觀察貝殼的細微特征。

用橡皮泥將貝殼固定于標本拍攝臺上，用CANON 550D單反相機-CANON 50 mm定焦鏡頭，分別拍攝貝殼標本的正側面和背側面，以電子影像文件儲存。

通過貝殼形態的測量和觀察及其與近似種的比對，結合現有文獻，對虎紋非洲大蝸牛形態與關鍵鑒定特征進行重新描述。

1.2.2 COI基因序列測定

DNA提取：取腹足肌肉25 mg，用天根生化科技（北京>有限公司生產的天根動物基因組DNA試劑盒提取DNA。

coi基因通用引物：LCO1490：5′-GGTCAA-CAAATCATAAAGATATTGG-3′;HC02198：5′-TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3′。

20μL反應體系：DNA模板（100ng/μL）2μL，LCO1490（10μmol／L）0.5μL，HC02198（10μmol／L）0.5μL，2×Master Mix 10μL，ddH20 7μL。

PCR擴增條件：940C 5 min；94℃50 s，45℃30s，72℃50 s，30～35個循環；72℃10 min。4℃保存。

電泳與測序：PCR產物用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測，目標片段送生工生物工程（上海）股份有限公司進行雙向測序。

2結果與分析

2.1虎紋非洲大蝸牛系統學與分類地位

虎紋非洲大蝸牛Achatina panthera （Ferussac，1832）屬于瑪瑙螺科Achatinidae Swainson，1840，瑪瑙螺屬Achatina Lamarck，1799，其模式種為Bulla achatina Linnaeus，1758，模式標本產地為津巴布韋（原文舊稱羅得西亞）。

異名：Helix（Cochlitoma）panthera （Ferussac，1832）;Achatina panthera （Deshayes，1838）;Achatina（Archachatina） panthera （Albers，1850）;Achatina（Achatinus） panthera （Pfeiffer，1856）;Achatina panthera （de Man，1877）;Achatina panthera var.sinistrorsa （Grasset，1884）;Achatina panthera var.mossambica （Kobelt，1910）;Achatina pan-thera var.berevoensis （Clench and Archer，1930）。

瑪瑙螺屬記載80多個物種[3，7-8]，其中絕大多數都是重要的農業有害生物[9-11]，美國將該屬所有物種都列為檢疫控制有害生物[12-13]。瑪瑙螺屬1799年由Lamarck確立，模式種為Bulla achatina Linnaeus，1758，拉丁名Achatina本意即為“瑪瑙”。1950年Bequaert根據胚螺層光滑與否將瑪瑙螺屬劃分為2個亞屬，即指名亞屬Achatina和光滑瑪瑙螺亞屬Lissachatina，前綴Liss為“光滑”的意思。

虎紋非洲大蝸牛，又稱虎紋瑪瑙螺，在分類上屬于光滑瑪瑙螺亞屬Achatina（Lissach，atina）。虎紋瑪瑙螺Lissachatina panthera（ Ferussac，1832）曾被認為是無斑瑪瑙螺Lissachatina immaculata（La-marck，1822）的同物異名，按理說這個遲到10年的命名自然是無效的，但由于實際上存在地理隔離而被修訂為2個亞種，即虎紋亞種Lissach，atina im-maculata panthera（Ferussac，1832）和指名亞種Lissachatina immaculata immaculata （Lamarck，1822）。隨后學者根據虎紋亞種殼表具有縱向排列的粗溝槽和火焰狀灰白色斑紋等明顯區別于指名亞種的關鍵特征，又將其升格為種，即虎紋瑪瑙螺Achatina（Lissachatina）panthera（Ferussac，1832）。

虎紋非洲大蝸牛的近似種主要有無斑瑪瑙螺A.immaculata（ Linnaeus，1758）、非洲大蝸牛A.fulica Bowdich，1822和虎斑瑪瑙螺A.achatina（Linne，1758），前兩者同屬光滑瑪瑙螺亞屬，后者屬于指名亞屬。根據國際上瑪瑙螺的流行命名，本文統一采用屬名，不用亞屬名。

按照屬名十種名的雙名法命名規則，虎紋瑪瑙螺是比較正規的中文名稱。正如褐云瑪瑙螺一樣，由于大眾已廣泛接受非洲大蝸牛這個名稱，且在各國的檢疫性有害生物名錄中都用這個名稱，故現在的外來有害生物文獻中均采用了“非洲大蝸牛”；目前我國臺灣的文獻和報刊也采用“虎紋非洲大蝸牛”，為避免混亂和便于交流，本文也采用這一名稱。

2.2形態描述與鑒定特征

2.2.1瑪瑙螺屬鑒定特征

貝殼呈長卵圓形，具有圓錐形的螺旋部，胚螺層2～3個，小，尖圓錐形，光滑；殼口呈卵圓形。殼軸下面呈截斷狀。肺相當粗壯，肺脈管無大的分支，但具有稠密的側支；顎片具有稠密的螺紋；齒舌中板窄，側板具有大的尖角，并有一外齒尖。在緣齒上無特殊的內齒尖。陰莖無獨特的鞘。牽引肌是一條右觸角肌。卵小且多。

2.2.2虎紋非洲大蝸牛鑒定特征

標本檢查：莫桑比克TCFCD0001-0002；臺灣ZGSDBWG0374；毛里求斯ZGSDBWG0409-0410。

根據現有文獻[1-3，14]和標本檢查結果，將該蝸牛的主要形態和鑒定特征重新描述如下：

2.2.2.1 卵

卵粒圓形或橢圓形，長4.5～6.5 mm，寬4.0～5.0 mm，乳白色，珍珠般光澤。

2.2.2.2貝殼

貝殼（圖1）中大型，右旋，長紡錘形。螺塔高，但縫合線不明顯。殼質厚，堅實，表面分布稍彎曲縱向排列的粗溝槽。螺層7.5～9個，各螺層圓凸，殼表為黃褐色或灰白色，具有紅褐色的縱紋或火焰狀斑紋色塊，生長紋明顯。貝殼螺旋部高，殼頂鈍圓，胚螺層光滑，殼頂第1～3層殼色較淺。殼口內緣螺軸處為粉紅色。刻紋粗，靠近縫合線處不規則且略呈齒狀。螺紋不明顯，與略彎曲的溝槽交叉。體螺層膨大，表面粗糙，呈灰白色。殼口內唇、軸唇和螺軸均為粉紅色，新鮮標本深紅色。殼口寬廣，為卵圓形，口緣簡單，鋒利，易碎。口緣外唇不增厚，不外折，內唇貼覆于體螺層上，形成粉紅色的薄胼胝部。無臍孔。殼高100～140 mm，殼寬45～65 mm。

2.2.2.3螺體

螺體（圖2）足部肌肉發達，一般為淡黃色至淺褐色，背面呈棕黃褐色，體色較非洲大蝸牛淡。蹠面呈灰黃色，黏液無色。

2.2.3虎紋非洲大蝸牛與近似種形態鑒別特征的比對

標本檢查：虎紋非洲大蝸牛（臺灣ZGSDB-WG0374，莫桑比克TCFCDOO01，毛里求斯ZGSDB-WG0409-0410），虎斑瑪瑙螺（加納ZGSDBWG0227-0228），無斑瑪瑙螺（莫桑比克TCFCD0005-0007），非洲大蝸牛（臺灣TCFCD0150-0156，福州TCF-CD0157-0206）。

根據現有文獻[1-5，14-18]和標本檢查結果，將虎紋非洲大蝸牛與近似種的主要形態鑒別特征比對如表1所示。

2.3虎紋非洲大蝸牛COI基因序列分析

本文以福州海關技術中心國家軟體動物檢疫鑒定重點實驗室的冷凍標本（TCFCD0001-00002）為標準樣品，通過DNA提取、PCR擴增和雙向測序獲得的DNA序列，經序列分析軟件BioEdit 7.0[19]拼接和人工校對后，獲得了該物種2個樣品的COI基因序列片段，相似性為100%。將其中較長的，即675 bp的DNA序列作為標準序列提交到Gen-Bank，登錄號為OM980323，這也是在GenBank提交的首條虎紋非洲大蝸牛DNA序列。

3結論和討論

3.1關于近似種的鑒別

虎紋非洲大蝸牛曾被認為是無斑瑪瑙螺的同物異名或種下亞種，親緣關系較近。但從貝殼形態上看，兩者差異明顯（表1），事實上該蝸牛在貝殼外形上與非洲大蝸牛最為接近，而且兩者殼面均有縱向條紋和斑塊狀紋，尤其是一些因環境而變異的標本有時很難鑒別。虎紋非洲大蝸牛與常見的非洲大蝸牛最明顯的區別是：前者軸唇和內唇為粉紅色，后者為藍白色；前者有縱向排列的粗大的溝槽，后者為稠密而纖細的生長線，在實際檢疫工作中應注意準確鑒別。虎紋非洲大蝸牛的有些標本軸唇和內唇處的紅色也會退色，對于這些不典型的待檢樣品，也可以用分子生物學的方法加以佐證。

3.2分子鑒定問題

本文首次獲得了虎紋非洲大蝸牛的CO I基因序列，該基因是公認的無脊椎動物DNA鑒定靶標基因，已在陸生軟體動物分類鑒定和系統發育關系研究中得到廣泛的應用[20-24]。在實際檢疫工作中，常會遇到幼螺、卵粒等形態學上不能最終確認的疑似樣品，可用我們提交到GenBank的OM980323序列作為標準序列，用PCR方法擴增COI基因進行序列比對鑒定。

具體步驟參照本文1.2.2方法，獲得待測樣品coi基因片段，與GenBank OM980323標準序列進行比對和鑒定。當待測樣品的DNA序列與標準樣品的DNA序列相似性≥98%時，鑒定為虎紋非洲大蝸牛A. panthera （Ferussac，1832），當相似性<95%時，鑒定為非虎紋非洲大蝸牛，當相似性介于兩者之間時，確定為虎紋非洲大蝸牛的疑似樣品，仍需要通過飼養或孵化和飼養[6]為成螺后，再做進一步的形態鑒定。

3.3檢疫管理措施

瑪瑙螺屬的物種絕大多數是重要的農業有害生物，美國將該屬所有物種都列為檢疫控制有害生物，世界上許多國家和地區也對其實施檢疫[12-13，25-26]。鑒于瑪瑙螺屬在國際上的檢疫地位、危害性以及虎紋非洲大蝸牛在我國臺灣的快速擴散和對農林生產、人畜健康的影響[5]，中國大陸目前尚未分布，因此必須加強對該蝸牛實施檢疫管理措施。

3.3.1將虎紋非洲大蝸牛列為進境植物檢疫性有害生物

我國大陸東南沿海地區與臺灣一水相隔，生物地理氣候條件十分相似，而且經濟往來密切，虎紋非洲大蝸牛極易隨貨物貿易傳人大陸。建議有關部門專題開展風險分析，及時將其增補到《中華人民共和國進境植物檢疫性有害生物名錄》。

3.3.2嚴禁作為食用螺或寵物引種養殖

非洲大蝸牛是通過人為引種導致其在世界上廣泛分布危害的最為典型的事例之一[8]，也是作為寵物攜帶造成傳播擴散的最經典的案例之一[27]。如20世紀60年代，一個小孩將3只非洲大蝸牛從夏威夷帶回邁阿密州，3年后造成了難以收拾的農業災害，當地政府不得不采取巨資收購的辦法來防治該蝸牛的危害[8，27]，虎紋非洲大蝸牛與非洲大蝸牛生物學習性相似，都有一定的食用價值和觀賞價值，已有的歷史教訓切勿重蹈覆轍。因此，在列入進境植物檢疫性有害生物名錄前，建議有關部門必須明令禁止以任何借口引進該蝸牛作為食用螺或寵物養殖。同時加強宣傳，指出瑪瑙螺屬蝸牛對農作物的有害性和國際市場上的局限性，避免盲目引種。

3.3.3加強口岸檢疫

加強口岸檢疫，對來自中國臺灣和非洲南部疫區的運輸工具、木質包裝箱、集裝箱進行重點檢查，防止該蝸牛隨觀賞性植物、原木、苗木、石材、板材、陶瓷、集裝箱和貨物包裝材料從疫區傳人國內。蝸牛爬行后會留下銀白色痕跡，這是判斷是否有蝸牛污染的重要標志，尤其要注意陰暗潮濕處的檢查。現場檢疫發現的蝸牛標本，需帶回實驗室做進一步的檢驗鑒定。發現盆栽苗木、花卉等攜帶土壤或其他細碎襯墊材料時，需過篩檢查是否有卵或幼螺。對有可能被蝸牛污染的物品進行高壓水槍沖洗或做預防性熏蒸滅蝸處理。