兒童腺病毒肺炎免疫功能變化及免疫治療的臨床研究

陳方根 李蘇寶 藍欣 廖細生

[摘要]?目的?探究兒童腺病毒肺炎免疫功能變化及免疫治療對其影響。方法?回顧性選取2020年12月至2022年3月江西省兒童醫院收治的26例腺病毒肺炎患兒作為病例組，選取同期就診的25例上呼吸道感染患兒作為對照組。觀察治療前后病例組患兒外周血T淋巴細胞亞群（CD16+CD56+、CD4、CD8、CD19、CD4/CD8）、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）（IgM、IgG、IgA、IgE）、補體（complement，C）（C3、C4）、相關細胞因子[白細胞介素（interleukin，IL）-2、IL-6、IL-10、腫瘤壞死因子-α（tumor?necrosis?factor-α，TNF-α）]變化，并比較其與對照組的差異。結果?治療前，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4顯著低于對照組（P<0.05），CD8、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α顯著高于對照組（P<0.05）；治療后，病例組的CD8、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α顯著高于對照組（P<0.05）。治療后病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α均顯著高于治療前（P<0.05），CD8顯著低于治療前（P<0.05），IgM、IgE與治療前比較，差異無統計學意義（P>0.05）。結論?腺病毒肺炎可導致患兒免疫功能變化，免疫治療有助于患兒免疫功能提升，控制患兒病情。

[關鍵詞]?兒童；腺病毒肺炎；免疫功能；免疫治療

[中圖分類號]?R72??????[文獻標識碼]?A??????[DOI]?10.3969/j.issn.1673-9701.2023.20.005

Clinical?study?on?immune?function?changes?and?immunotherapy?in?children?with?adenovirus?pneumonia

CHEN?Fanggen，?LI?Subao，?LAN?Xin，?LIAO?Xisheng

Department?of?Internal?Medicine?of?Pediatric?Infection，?Jiangxi?Provincial?Childrens?Hospital，?Nanchang?330000，?Jiangxi，?China

[Abstract]?Objective?To?explore?the?changes?of?immune?function?in?children?with?adenovirus?pneumonia?and?the?effect?of?immunotherapy.?Methods?A?total?of?26?children?with?adenovirus?pneumonia?admitted?to?Jiangxi?Provincial?Children?s?Hospital?from?December?2020?to?March?2022?were?selected?as?the?case?group，?and?25?children?with?upper?respiratory?tract?infection?attending?the?same?period?were?selected?as?the?control?group.?The?T-lymphocyte?subsets?（CD16+CD56+，?CD4，?CD8，?CD19，?CD4/CD8），?immunoglobulin?（IgM，?IgG，?IgA，?IgE），?complement?（C3，?C4），?and?related?cytokines?[interleukin?（IL）-2，?IL-6，?IL-10，?tumor?necrosis?factor-α?（TNF-α）]?were?observed?in?the?case?group?before?and?after?treatment，?and?the?differences?were?compared?with?the?control?group.?Results?Before?treatment，?CD16+CD56+，?CD4，?CD19，?CD4/CD8，?IgG，?IgA，?C3，?C4?were?significantly?lower?in?the?case?group?than?those?in?the?control?group?（P<0.05），?and?CD8，?IL-2，?IL-6，?IL-10，?TNF-α?were?significantly?higher?in?the?case?group?than?those?in?the?control?group?（P<0.05）.After?treatment，?CD8，?CD4/CD8，?IgG，?IgA，?C3，?C4，?IL-2，?IL-6，?IL-10，?TNF-α?were?significantly?higher?in?the?case?group?than?those?in?the?control?group?（P<0.05）.?After?treatment，?CD16+CD56+，?CD4，?CD19，?CD4/CD8，?IgG，?IgA，?C3，?C4，?IL-2，?IL-6，?IL-10?and?TNF-α?were?significantly?higher?in?the?case?group?than?pre-treatment?（P<0.05），?CD8?was?significantly?lower?than?pre-treatment?（P<0.05），?and?IgM?and?IgE?were?not?statistically?significant?when?compared?with?pre-treatment?（P>0.05）.?Conclusion?Adenovirus?pneumonia?can?lead?to?changes?in?immune?function?of?children，?and?immunotherapy?can?help?improve?the?immune?function?and?control?the?disease?condition?of?children.

[Key?words]?Children;?Adenovirus?pneumonia;?Immune?function;?Immunotherapy

腺病毒是引起兒童病毒性肺炎的常見病原，臨床上易發展為重癥肺炎，對患兒生命安全造成嚴重威脅[1-2]。目前臨床認為腺病毒肺炎導致的肺及肺外臟器損傷，與病毒載量及表型、體內炎癥介質及免疫功能紊亂有關[3-4]。當患兒感染腺病毒后，機體首先發生固有免疫應答，其次發生適應性免疫應答，白細胞介素（interleukin，IL）-2、IL-6、IL-10、腫瘤壞死因子-α（tumor?necrosis?factor-α，TNF-α）等多種細胞因子均參與了上述兩種免疫應答過程[5]。細胞免疫主要受人體T細胞調節，體液免疫則受人體B細胞調節，腺病毒感染對機體的細胞免疫和體液免疫有不同程度的影響，自體免疫功能的紊亂對重癥腺病毒肺炎的發生、發展起重要作用[6-7]。本研究旨在對兒童腺病毒肺炎免疫功能變化及免疫治療對其影響進行探討。

1??資料與方法

1.1??一般資料

回顧性選取2020年12月至2022年3月江西省兒童醫院收治的26例腺病毒肺炎患兒作為病例組，選取同期就診的25例上呼吸道感染患兒作為對照組。病例組納入標準：①符合《諸福棠實用兒科學》[8]中腺病毒肺炎的診斷；②在監護人陪伴下完成相關檢查者；③患兒監護人充分知情同意。對照組納入標準：①上呼吸道感染住院兒童；②無自身免疫性疾病；③無先天性免疫缺陷；④無手術、外傷、精神創傷、無長期藥物服用等病史。排除標準：①臨床資料缺失者；②合并其他病原體感染、支氣管哮喘者；③合并自身免疫性疾病或近期使用免疫抑制劑、糖皮質激素者；④生命垂危者；⑤血液樣本采集困難者；⑥合并與肺炎無關的嚴重合并癥者。病例組患兒中，男16例，女10例，年齡為4個月～4歲11個月，平均（28.71±7.18）個月，病程為7～18d，平均（12.54±3.05）d；對照組患兒中，男16例，女9例，年齡為7個月～3歲，平均（20.47±5.98）個月。本研究經江西省兒童醫院倫理委員會審批通過（倫理審批號：JXSETYY-YXKY-20200031）。

1.2??方法

對照組患兒入組時、病例組患兒治療前和治療7d后，均采集2ml外周靜脈血。使用流式細胞儀（FACSCanto，美國BD公司）檢測外周血淋巴細胞亞群（CD16+CD56+，CD4，CD8，CD19，CD4/CD8）；使用免疫比濁法檢測血清免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）（IgM、IgG、IgA、IgE）及補體（complement，C）（C3、C4），使用儀器為ADVIA2400生化分析儀（德國西門子公司）；使用化學發光法檢測細胞因子[白細胞介素（interleukin，IL）-2、IL-6、IL-10、腫瘤壞死因子-α（tumor?necrosis?factor-α，TNF-α）]，使用儀器為IMMULITE?1000化學發光免疫分析儀（德國西門子公司）。所有病例組患兒均給予丙種球蛋白治療[1g/（kg·d），連用2d]及抗病毒治療。

1.3??觀察指標

觀察病例組患兒治療前后CD16+CD56+、CD4、CD8、CD19、CD4/CD8、IgM、IgG、IgA、IgE、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α變化，及其與對照組的差異。

1.4??統計學方法

采用SPSS?19.0統計學軟件對數據進行處理分析，計量資料以均數±標準差（）表示，組間比較采用t檢驗，計數資料采用例數（百分比）[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2??結果

2.1??外周血T淋巴細胞亞群水平變化比較

治療前，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8均顯著低于對照組，CD8顯著高于對照組（P<0.05）；治療后，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8顯著高于治療前，CD8顯著低于治療前（P<0.05）；治療后病例組的CD8和CD4/CD8均顯著高于對照組（P<0.05），見表1。

2.2??外周血免疫球蛋白與補體水平變化比較

治療前，病例組的IgG、IgA、C3、C4水平均顯著低于對照組（P<0.05）；治療后，病例組的IgG、IgA、C3、C4均顯著高于治療前（P<0.05），IgM、IgE與治療前比較，差異無統計學意義（P>0.05）；治療后，病例組IgG、IgA、C3、C4水平均顯著高于對照組（P<0.05），見表2。

2.3??外周血相關細胞因子水平變化比較

治療前，病例組的IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α水平均顯著高于對照組（P<0.05）；治療后，病例組的IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α水平均顯著高于治療前（P<0.05）；治療后，病例組IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α水平均顯著高于對照組（P<0.05），見表3。

3??討論

由于幼兒氣管及支氣管未發育完善，免疫系統抵抗能力低下，無法有效清除呼吸道微生物，故肺炎是影響小兒身體健康的常見疾病，嚴重者甚至會造成死亡。近幾年腺病毒肺炎發病率升高，其所致的肺炎屬于嬰幼兒病毒性肺炎中最嚴重的一類，對患兒生命安全威脅較大[9]。有研究表明，重癥病毒感染相關性肺炎與機體免疫功能失衡有關[10]。目前，臨床治療腺病毒肺炎的方式主要為抗病毒治療及免疫治療。腺病毒屬于無包膜的雙鏈DNA病毒，可分為7個亞群、90個型別，我國常見的是3型及7型，該病毒在感染機體的過程中會導致細胞溶解及壞死，可使患兒支氣管、細支氣管黏膜充血水腫，分泌大量分泌物影響氣道功能，且能從氣道進入肺部，刺激肺部的巨噬細胞，引起炎癥反應[11-13]。

有研究認為，腺病毒感染與患者體內免疫功能紊亂相關[14]。T細胞介導機體的細胞免疫過程，可分為CD4、CD8兩大亞群，前者具備正調節免疫應答的作用，后者可特異性識別內源性抗原肽，直接殺滅病毒，二者比值可綜合反映機體整體免疫狀態[15-16]。免疫球蛋白屬于免疫活性分子，在患兒體內與抗原特異性結合后可起到抗病毒作用[17]。C3、C4是最常見的補體，臨床認為可通過觀察C3、C4的消耗水平來判斷機體的免疫反應是否過度或仍在進行，以此可判斷機體的疾病程度[18]。IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α均為炎癥因子，其水平與機體炎癥反應程度密切相關[19]。本研究結果顯示，治療前，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4顯著低于對照組，CD8、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α顯著高于對照組；治療后，病例組的CD8、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α顯著高于對照組；治療后，病例組的CD16+CD56+、CD4、CD19、CD4/CD8、IgG、IgA、C3、C4、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α均顯著高于治療前，CD8顯著低于治療前，IgM、IgE與治療前比較，差異無統計學意義。說明腺病毒感染可導致機體發生免疫功能紊亂，而免疫球蛋白治療則對患兒機體免疫功能有一定影響，且在短期內會造成炎癥反應上升。推測其原因可能在于：①CD4具備正調節免疫應答的作用，CD8可特異性識別內源性抗原肽，正常情況下CD4、CD8相互制衡，處于動態平衡[20]，機體感染腺病毒后，導致細胞免疫損傷，使CD4/CD8失衡，進而導致機體促炎、抗炎細胞因子失衡，引起機體損傷[21]；②免疫球蛋白主要通過體液免疫應答對病原體進行殺滅，補體則主要通過介入免疫應答及炎癥反應來參與機體的組織損傷過程，IgA水平低下說明患兒呼吸道或其他部位的黏膜組織免疫屏障功能不足，導致病原體定植或感染[22]；③患兒感染腺病毒后，機體產生炎癥反應，導致IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α等炎癥因子表達上升；④免疫球蛋白治療后，患兒機體短期內免疫功能受外來因素調節，進而對機體炎癥反應產生一定影響；⑤患兒年齡較小，免疫功能發育不完善，故患兒受腺病毒感染后短期內機體的細胞免疫功能受損嚴重，進行免疫球蛋白治療后，能加速患兒體內腺病毒清除，更有利于細胞免疫恢復。此前有研究證實，治療后腺病毒肺炎患兒CD4/CD8比值上升[23]，本研究結果與之相似。

本研究不足之處及改進方法如下：①樣本量較少，有待臨床延長研究時間或與其他醫院聯合進行研究，以便擴大腺病毒肺炎患兒的樣本量，獲取更有說服力的研究結果；②未觀察不同治療方法對腺病毒肺炎患兒的療效差異，有待臨床選擇不同治療方法的患兒進行對比，探究有效的治療方案；③本研究選擇的觀察指標較少，未對患兒其他指標水平進行分析，有待增加檢驗指標，從多方面觀察腺病毒肺炎的影響及治療后患兒機體產生的變化；④本研究屬于回顧性研究，未對患兒進行隨訪，未觀察到腺病毒肺炎患兒治療后的復發情況，有待臨床延長研究時長，并對患兒進行一定時間的隨訪，進一步為免疫球蛋白的應用提供依據。

綜上所述，腺病毒肺炎可導致患兒免疫功能變化，免疫治療可調節腺病毒肺炎患兒T淋巴細胞亞群水平、免疫球蛋白與補體水平，并在短期內影響炎癥反應，本研究結果為臨床治療方案的選擇提供一定參考依據。

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（收稿日期：2022–09–07）

（修回日期：2022–11–16）