貴州八種林果木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長的影響

陳翠翠 鞏玉輝 宋 雕 劉亞雯

（貴州金蟾大山生物科技有限責(zé)任公司，貴州畢節(jié) 553300）

紅托竹蓀Dictyophora rubrovolvata屬竹蓀屬Dictyophora，是一種珍貴食用菌[1-2]，被稱為“菌中皇后”[3]。紅托竹蓀是貴州特有的一種清香型竹蓀[4]，其子實(shí)體潔白，具有裙傘，不僅外形優(yōu)美且味道鮮美，營養(yǎng)豐富，含有大量的氨基酸、蛋白質(zhì)、維生素和多糖等營養(yǎng)物質(zhì)[5]，深受消費(fèi)者青睞，而且也是目前國內(nèi)外市場上價(jià)格比較高的一類食用真菌。紅托竹蓀全株由菌托、菌柄、菌蓋構(gòu)成[6]，菌托約占全株鮮重的25%～30%，含有多糖、氨基酸、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)成分[7-8]。紅托竹蓀不僅食用價(jià)值高，還具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和潛在的藥用價(jià)值[9]。

紅托竹蓀由于生長速度慢，因此，比其他食用菌更容易被雜菌侵染。林果木木屑浸出液含有多種營養(yǎng)物質(zhì)，利用其浸出液培養(yǎng)食用菌，往往能促進(jìn)其菌絲生長[10]。貴州省栽培紅托竹蓀已有30 多年的歷史，同時(shí)也有較為豐富的林果木木屑資源。為此，試驗(yàn)在PDA 培養(yǎng)基中分別加入貴州地區(qū)比較容易獲得的8 種林果木屑浸出液，考察其對紅托竹蓀菌絲生長的影響，以期能夠找到比較適合紅托竹蓀菌絲生長的木屑，為紅托竹蓀的生產(chǎn)和栽培提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試木屑選擇貴州省比較常見的林果木：櫻桃木、核桃木、構(gòu)樹木、杜仲木、青岡木、樺槁木、白楊木，對照木屑選擇金蟾大山生物科技有限責(zé)任公司發(fā)酵用的硬雜木屑。

供試菌株：紅托竹蓀菌株為金蟾大山生物科技有限責(zé)任公司自主馴化選育的14-33（圖1）。

圖1 供試紅托竹蓀菌株子實(shí)體（右）及PDA培養(yǎng)菌種（左）

1.2 試驗(yàn)方法

PDA 培養(yǎng)基：土豆200 g，葡萄糖20 g，瓊脂粉18 g，水1 000 mL。將土豆切片注水后，加入葡萄糖和瓊脂粉，待全部溶解后定容至1 000 mL備用。

將供試木屑于50 ℃烘箱中烘干至恒重，稱取20.0 g，加入1 L 水煮沸20 min，用紗布過濾，濃縮濾液至100 mL 備用[11]。取8 mL、32 mL、54 mL 木屑浸出液加入PDA 培養(yǎng)基中，定容至200 mL，其體積分?jǐn)?shù)分別為4%、16%、27%，空白組為0%。

用蠕動(dòng)泵分裝培養(yǎng)基，每個(gè)培養(yǎng)皿分裝22 mL，每個(gè)木屑處理組9個(gè)平皿。裝好培養(yǎng)基平皿用報(bào)紙包好后，于121 ℃滅菌30 min，待滅菌結(jié)束趁熱置超凈工作臺(tái)，冷卻后接種。用直徑5 mm打孔器取供試菌株菌齡一致的菌絲塊接種至培養(yǎng)皿中央，于22 ℃培養(yǎng)。分別在接種后的10 d、17 d、20 d、24 d 采用畫線法測定菌落直徑并計(jì)算菌絲生長速度。

菌絲平均生長速度(mm/d) =[（第2 次測量直徑-第1次測量直徑）（mm）÷2]÷菌絲生長天數(shù)（d）。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試林果木屑浸出液pH

按照1.2 的試驗(yàn)方法獲得林果木屑浸出液，用pH 測定劑、糖度計(jì)等檢測浸出液的理化指標(biāo)，結(jié)果詳見表1。

表1 供試木屑浸出液理化指標(biāo)

由表1、圖2 可知，樺槁木、白楊木、硬雜木木屑浸出液無沉淀物或較少，顏色清澈，可以透光，而構(gòu)樹木、青岡木、杜仲木、櫻桃木、核桃木木屑浸出液顏色深淺不一且沉淀物較多；不同種類木屑的浸出液pH 也有差異，青岡木、構(gòu)樹木、杜仲木木屑浸出液的糖度要高于其他木屑。

圖2 供試木屑浸出液

2.2 供試木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲長勢的影響

含不同木屑浸出液培養(yǎng)基中紅托竹蓀菌絲生長狀態(tài)見表2、圖3。

表2 含有供試木屑浸出液培養(yǎng)基中紅托竹蓀菌絲生長狀態(tài)

圖3 各處理培養(yǎng)基上紅托竹蓀菌絲生長狀態(tài)

培養(yǎng)10 d、24 d，測定各木屑浸出液處理組紅托竹蓀菌絲菌落直徑（表4）。

由表3、圖3 可知，培養(yǎng)基添加4%櫻桃木木屑浸出液、4%白楊木木屑浸出液、16%白楊木木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長沒有促進(jìn)作用，其他添加量有一定的促進(jìn)作用。未添加木屑浸出液的菌絲均勻度較差，菌絲較稀疏，添加木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長具有不同程度的促進(jìn)作用。由表3可知，菌絲培養(yǎng)24 d，供試木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長促進(jìn)作用排序?yàn)闃彘履灸拘迹径胖倌灸拘迹厩鄬灸拘迹緲?gòu)樹木木屑＞櫻桃木木屑＞硬雜木木屑＞白楊木木屑＞核桃木木屑＞空白對照組。樺槁木木屑浸出液對紅托竹蓀生長具有明顯促進(jìn)作用，且隨著添加量的上升，菌絲越濃密。杜仲木木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長具有較好的促進(jìn)作用，且隨著添加量的上升，效果更明顯。青岡木木屑浸出液添加量不可超過16%，否則對菌絲生長促進(jìn)作用減弱，且菌落不規(guī)則，其最適宜添加量為4%。構(gòu)樹木木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長有促進(jìn)作用，菌絲濃密，生長均勻，均一性好，但菌絲生長速度稍慢。添加16%櫻桃木木屑浸出液有明顯促進(jìn)作用，菌絲生長快，且比較均勻，添加量為4%的菌絲生長狀態(tài)很差，生長慢，添加量超過16%，菌絲生長旺盛，但菌絲生長速度要比添加量16%時(shí)略慢。添加27%硬雜木（CK）木屑浸出液，菌絲生長狀態(tài)較好，菌絲潔白濃密，添加量為4%、16%促進(jìn)菌絲生長作用弱，菌絲一致性較差。添加4%、16%白楊木木屑浸出液，對菌絲生長促進(jìn)作用較弱，菌絲較濃密，但其均勻性、一致性差，與硬雜木木屑浸出液差異不明顯，添加27%白楊木木屑浸出液，比空白組菌絲生長稍快。添加核桃木木屑浸出液，菌絲培養(yǎng)前期（10 d）對菌絲生長促進(jìn)作用較好，后期（24 d）促進(jìn)作用減弱，菌絲生長僅比空白組稍快，但菌落致密潔白。

表3 各處理培養(yǎng)10 d、24 d紅托竹蓀菌落直徑

2.3 供試林果木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長速度的影響

分別在紅托竹蓀菌絲培養(yǎng)10 d、20 d 時(shí)測定菌落直徑，計(jì)算菌絲平均生長速度。

由表4 可知，紅托竹蓀菌絲培養(yǎng)前期（10 d）主要為紅托竹蓀菌絲適應(yīng)培養(yǎng)基的過程，是其適應(yīng)性生長的過程[12]，菌絲平均生長速度較慢，空白對照組為0.7 225 mm/d，添加4%櫻桃木木屑浸出液菌絲生長速度為0.5 811 mm/d，慢于空白組，差異顯著，表明其對紅托竹蓀菌絲生長沒有促進(jìn)作用；菌絲培養(yǎng)20 d，添加27%核桃木木屑浸出液菌絲平均長速最慢，為1.421 1 mm/d，與空白組（1.8 231 mm/d）差異顯著。菌絲培養(yǎng)20 d，對菌絲生長有明顯促進(jìn)作用的分別為添加16%櫻桃木木屑浸出液、16%樺槁木木屑浸出液、16%杜仲木木屑浸出液，菌絲平均生長速度均快于空白組，且差異顯著，可見上述處理對紅托竹蓀菌絲生長具有明顯促進(jìn)作用。

表4 供試木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長速度的影響

由表4、圖3 可知，添加構(gòu)樹木木屑浸出液菌絲培養(yǎng)10 d 內(nèi)對其生長具有促進(jìn)作用，與空白組差異顯著，培養(yǎng)20 d 內(nèi)，菌絲平均生長速度與空白組差異不顯著，但菌落濃密、均勻。

3 小結(jié)與討論

生產(chǎn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)經(jīng)紅托竹蓀菌絲分解后的木屑會(huì)變得非常軟，說明其對木質(zhì)素的分解能力非常強(qiáng)。張晶等[13]研究表明，加入天然物質(zhì)浸出液可以促進(jìn)白腐真菌產(chǎn)酶，促進(jìn)其菌絲生長，與筆者試驗(yàn)結(jié)果相符合。ROBBINS 等[14]研究表明，木材浸出液對羊肚菌菌絲生長的刺激作用明顯。向世華[15]認(rèn)為大多數(shù)食用菌如用其自然發(fā)生的基質(zhì)浸出汁能促進(jìn)其菌絲生長，說明基質(zhì)浸出液中含多種營養(yǎng)物質(zhì)或者生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，但是生長調(diào)節(jié)物質(zhì)并不能被同化為真菌自身組成物，而只是參與一些代謝反應(yīng)，這些刺激物質(zhì)具有熱穩(wěn)定性，不易揮發(fā)，但這些物質(zhì)對真菌生長、發(fā)育至關(guān)重要。

試驗(yàn)結(jié)果表明，貴州省樺槁木、青岡木、杜仲木、構(gòu)樹木木屑浸出液對紅托竹蓀菌絲生長具有比較好的促進(jìn)作用，其適宜添加量分別為27%樺槁木木屑浸出液、4%青岡木木屑浸出液、27 杜仲木木屑浸出液%、27%構(gòu)樹木木屑浸出液。