中草藥漱口顆粒的制備工藝研究 *

林 娟 李玲慧 陳攀振 黃漢明 李 丹△ 潘鴻貞※

（1.福州市中醫院藥學部，福建 福州 350001；2.福建中醫藥大學藥學院，福建 福州 350122）

我國口腔問題仍然嚴峻，國家制定出臺了多項政策，對口腔衛生工作提出了明確要求和具體指標。國家衛生健康委員會發布的《健康口腔行動方案（2019—2025年）》明確到2020年，兒童、老年人等重點人群口腔保健水平穩步提高；到2025年，人群口腔健康素養水平和健康行為形成率大幅提升，口腔健康服務覆蓋全人群、全生命周期［1］。臨床上治療口腔病藥物以含漱液居多，且多含西藥成分，存在刺激性大、口感差、易復發的缺點，治療口腔病的中成藥或中藥復方又很少，效果好的更屬少見。

中草藥漱口方系福州市中醫院口腔科專家與中藥房老主任何建楠（福州時方派名醫何秀春之孫），根據口腔常見疾病特征，結合臨床經驗與心得，總結提煉而成，后經口腔科王小娟、郭秀榕等臨床應用研究略作調整。該方由石膏、地骨皮、燙骨碎補、蟛蜞菊、蒲公英、紫花地丁、白茅根、白術、蒼術、黃芪、甘草共11味中藥組成，具有清熱瀉火、解毒消腫、涼血止痛、健脾益腎的功效，臨床上應用多年，對于口腔疾病，尤其是口腔潰瘍、牙周炎、牙齦炎，療效確切，能緩解疼痛、促進潰瘍愈合，并能顯著降低口腔潰瘍的復發率［2］。

中草藥漱口方在臨床上以湯劑形式給藥，但傳統湯劑存在煎煮麻煩、不及時、服用量大、攜帶不便、藥效物質不穩定、不宜久儲等弊端。根據傳統中藥制劑的備案要求，并經出膏率預試驗后，擬將中草藥漱口方開發成顆粒劑型，解決以上缺陷，增加臨床應用，提高臨床療效，促進醫院特色制劑發展，推動中醫藥的傳承與創新。本研究通過水提工藝和制劑成型工藝研究，優選中草藥漱口顆粒的最佳制備工藝，為該制劑的開發奠定實驗基礎。

1 材料

1.1 儀器設備循環水式多用真空泵［SHZ-D（III），上海秋佐科學儀器有限公司］，旋轉蒸發儀（Rotavapor?R-300，瑞士BUCHI 公司），調溫恒溫電熱套（HDM-2000，常州國華電器有限公司），真空干燥箱（DZF-6050，上海精宏實驗設備有限公司），鼓風干燥箱（DHG-9240A，上海一恒科學儀器有限公司），超純水儀（Milli-Q，美 國Millipore 公 司），精 密 電 子 天 平（XY2000C，常州市幸運電子設備有限公司），搖擺式中藥粉碎機（DFY-500，溫嶺市林大機械有限公司），離心機（Centrifuge 5418 R，德國Eppendorf公司）。

1.2 藥材與輔料制備中草藥漱口顆粒所用的中藥飲片均購自福建鷺燕醫藥發展有限公司（原福建鷺燕中宏醫藥有限公司），經福建中醫藥大學生物醫藥研發中心老師鑒定均符合藥典要求。輔料糊精、可溶性淀粉、蔗糖、微晶纖維素均購于上海阿拉丁生化科技股份有限公司。

2 方法與結果

2.1 中草藥漱口顆粒提取工藝因中草藥漱口方前期臨床采用傳統水煎煮湯劑，患者使用后效果確切，綜合預實驗結果及有關藥材藥效成分特點，本課題選擇水提法。

2.1.1 得膏率的測定稱取1 個處方量的中草藥漱口方中藥飲片（生石膏30 g，地骨皮15 g，燙骨碎補9 g，蟛蜞菊18 g，蒲公英15 g，紫花地丁30 g，白茅根15 g，白術15 g，蒼術15 g，黃芪15 g，甘草片6 g），水提取后以3000 r/min的速度離心15 min（離心半徑10 cm），得到過濾的藥材提取液，精密吸取25 mL，于60 ℃減壓濃縮得浸膏，真空干燥48 h 得干浸膏，計算得膏率。得膏率=［（m×v）/（25×M）］×100%，其中m 表示25 mL 提取液濃縮干燥膏重（g）、v表示提取液體積、M表示復方提取飲片總重量。

2.1.2 單因素考察回流提取工藝

2.1.2.1 浸泡時間的考察 分別稱取6 份1 個處方量的中草藥漱口方中藥飲片，加入10 倍量的超純水約1830 mL，定時取出稱重，計算吸水率。結果顯示，浸泡2.0 h，中藥飲片增重309.56 g，吸水率為169.16%；繼續增加浸泡時間，吸水率變化不大，趨于平緩，說明藥材接近浸泡飽和。從吸水率及時間效率綜合考慮，浸泡時間確定為2.0 h。見表1。

表1 中草藥漱口顆粒提取工藝藥材浸泡時間的考察結果

2.1.2.2 提取時間的考察 稱取5份1/3個處方量的中草藥漱口方中藥飲片，分別加入12倍量超純水，加熱回流0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 h（保持微沸），按照2.1.1計算得膏率。結果顯示，在1.0～2.5 h的范圍內回流提取時間越長，得膏率也相應地增大，但當超過1.5 h后，得膏率基本趨于穩定，說明此時水溶性成分提取已接近飽和狀態。見表2。

表2 中草藥漱口顆粒提取工藝提取時間的考察結果

2.1.2.3 提取溶劑倍量的考察 稱取5 份1/3 個處方量的中草藥漱口方中藥飲片，分別加入8、10、12、15、18倍量超純水，加熱回流1.5 h（保持微沸），按照2.1.1 計算得膏率。結果顯示，提取溶劑為10、12、15、18倍量時得膏率基本穩定，說明10倍量的提取溶劑對水溶性成分的提取接近飽和狀態。見表3。

表3 中草藥漱口顆粒提取工藝提取溶劑倍量的考察結果

2.1.2.4 提取次數的考察 稱取3 份1/3 個處方量的中草藥漱口方中藥飲片，加入12 倍量超純水，加熱回流1.5 h（保持微沸），分別提取1 次、2 次、3 次，按照2.1.1 計算得膏率。結果顯示，提取次數越多，得膏率相應上升。但提取3 次與2 次的相比，提取率略有上升，提取2 次的提取率為提取3 次的99.55%，說明提取2 次時水溶性成分基本被提取完全。見表4。

表4 中草藥漱口顆粒提取工藝提取次數的考察結果

2.1.3 提取工藝正交試驗設計根據上述單因素實驗的考察結果，分別稱取9份1/3個處方量的中草藥漱口方中藥飲片，按表5 中的因素水平進行回流提取，按照2.1.1計算得膏率。結果得知，提取溶劑倍量、提取時間、提取次數3 個因素中對得膏率影響從大到小依次為C＞B＞A，且最佳的提取工藝組合為C2B3A2，即藥材浸泡2 h，提取溶劑倍量為10倍量，提取時間為1.5 h，提取次數為2次。見表5、表6。

表5 中草藥漱口顆粒提取工藝正交試驗結果分析

表6 正交試驗中草藥漱口顆粒得膏率方差分析

2.1.4 提取工藝驗證試驗分別稱取3 份2 個處方量的中草藥漱口方中藥飲片（每份366 g），按照最佳提取工藝提取，計算干浸膏重量和得膏率。結果得知，6 倍量的藥材進行放大試驗，平均干浸膏重量108.72 g，平均得膏率為29.71%，3 次重復得膏率相差無幾，表明優選的提取工藝穩定性良好，該工藝可行。見表7。

表7 放大試驗結果

2.2 中草藥漱口顆粒成型工藝研究

2.2.1 中草藥漱口顆粒的制備方法

2.2.1.1 浸膏的制備 稱取2 個處方量的中草藥漱口方中藥飲片，按照優選的提取工藝提取，濾液減壓濃縮得浸膏約140 g，每1 g浸膏相當于2.61 g原飲片。

2.2.1.2 顆粒的單因素考察 稱取浸膏10 g，與輔料以一定的比例混合，制備中草藥漱口顆粒。見表8。

表8 浸膏與不同輔料配伍

2.2.2 評價指標

2.2.2.1 成型性考察 取1～4 號樣品顆粒，依次通過一號篩與四號篩，計算成型率［3］，成型率＝通過一號篩但不能通過四號篩的顆粒重／樣品重×100%。見表9。

表9 不同輔料與浸膏的配伍處方結果

2.2.2.2 溶化性考察 精密稱定1～4號樣品顆粒5 g，置于干燥至恒重的50 mL 離心管中，精密加入沸水20 mL，并放入3000 r/min 的離心機中離心15 min（離心半徑10 cm），棄去上清液，于80 ℃將殘渣烘干至恒重，精密稱定，計算溶化率［3］，溶化率=溶化的顆粒重/總顆粒重×100%。見表9。

2.2.2.3 吸濕百分率的測定 配置一定量的氯化鈉飽和溶液，將其置于玻璃干燥器的底部放置48 h，使干燥器的相對濕度為75%。精密稱定1～4 號的樣品顆粒各1 g，置于干燥恒重的5 mL扁稱量瓶中，精確稱量后，輕搖使其均勻分布，置于盛有氯化鈉飽和溶液的干燥器內（稱量瓶蓋揭開），96 h 后稱量，計算吸濕百分率［3］。吸濕百分率=（顆粒濕重－顆粒干重）/顆粒干重×100%。見表9。

2.2.2.4 評分標準 以中草藥漱口顆粒的綜合評分為評分標準，根據成型率、溶化率和吸濕率對中草藥漱口顆粒的影響大小設定權重，其中成型率100%得25 分，溶化率100%得25分，最小吸濕率得50分［3，4］，綜合評分=（25/最大成型率）×成型率+（25/最大溶化率）×溶化率+（最小吸濕率×50）/吸濕率。結果顯示，浸膏與單一輔料糊精、可溶性淀粉以及微晶纖維素制成的顆粒綜合評分較高。見表9。為確定最佳成型工藝，選擇這3種輔料進行正交試驗，以優選輔料與浸膏的比例。

2.2.3 正交試驗優化稱取3 個處方量的中草藥漱口方中藥飲片（共549 g），按照2.2.1.1 項下的方法制得中草藥漱口顆粒浸膏。分別取浸膏18 g和表10中的輔料以一定的比例混合制備顆粒劑，采用L9（34）正交表，按照2.2.2 項下的考察方法和評分標準進行試驗，計算綜合評分。通過極差R 得知，各項因素的影響指標從大到小依次為A＞B＞C，結合K值比較，選擇出最佳輔料配伍方案為A2B2C1，即優選出浸膏與輔料的配比為浸膏（g）∶糊精（g）∶可溶性淀粉（g）∶微晶纖維素（g）=18∶10∶10∶1。見表11。

表10 成型工藝L9（34）正交試驗

2.2.4 制劑工藝驗證試驗稱取3 份2 個處方量的中草藥漱口方中藥飲片，按照2.2.1.1 項下的方法制得中草藥漱口顆粒浸膏約140 g。將浸膏140 g 與糊精78 g、可溶性淀粉78 g、微晶纖維素7.8 g，混合均勻，制成中草藥漱口顆粒劑。根據正交試驗的結果穩定，結果3 次重復制得的中草藥漱口顆粒劑重量均在220 g左右，平均綜合評分為93.74 分，表明采用優選的浸膏與輔料配比，制劑成型工藝穩定性良好，該工藝可行。見表12。

表12 制劑工藝放大試驗結果分析

3 討論

根據中草藥漱口顆粒方中石膏的硫酸鈣、骨碎補的柚皮苷、蒲公英的咖啡酸、紫花地丁的秦皮乙素、黃芪的黃芪甲苷等主要藥物的藥效成分特點，結合臨床應用形式，采用水提取工藝制備軟材的浸膏，優選最佳提取工藝為浸泡2 h，提取溶劑倍量為10 倍量，提取時間為1.5 h，提取次數為2次；且當1 g浸膏相當于處方中藥飲片2.61 g 時，制備軟材效果最好。通過單一輔料對成型工藝的研究發現，微晶纖維素對軟材成型較好，因其溶解性較差，所以在成型工藝優化實驗中，選用另外2 個輔料糊精、可溶性淀粉同一水平1∶1 的加入量進行實驗［5］，優選出浸膏與輔料的最佳配比為浸膏（g）∶糊精（g）∶可 溶 性 淀 粉（g）∶微 晶 纖 維 素（g）=18∶10∶10∶1。

通過上述實驗研究，確定了中草藥漱口顆粒的制備工藝：取10 個處方量的中草藥漱口顆粒中藥飲片，用10 倍量純水浸泡2 h，煎煮2 次，每次1.5 h，濾液濃縮至浸膏約700 g（生藥濃度約為3.3 g/mL），加入輔料糊精390 g，可溶性淀粉390 g，微晶纖維素39 g，制備成1000 g 顆粒劑。該工藝簡便穩定可行，為后續該制劑開發奠定良好的實驗基礎。