哈密市非洲豬瘟疫情監測與傳播風險評估

張國新，楊 帆，張志新，張婉琪，張曉曉，玉努斯·阿不都，馬春江，*

（ 1． 哈密市動物疫病預防控制中心，新疆 哈密 839000 ； 2． 伊州區動物疫病預防控制中心，新疆 哈密 839000 ）

非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起家豬、野豬感染的一種急性、熱性和高度致死性傳染病[1]，也是全球當前威脅養豬業最重要的動物疫病之一。世界動物衛生組織（OIE）將其規定為必須報告的一種傳染性動物疾病[2]，我國將其列為一類動物傳染病。截至目前，非洲豬瘟仍缺乏商業疫苗和有效藥物，嚴重威脅養豬業的發展[3]。ASFV 傳播途徑主要有接觸傳播、軟蜱叮咬或經食物傳播等[4]，家豬、野豬、疣豬等宿主動物對ASFV 易感，但癥狀只在家豬和野豬中顯現，病程較短，病死率接近90%～100%[5]。ASFV 為非洲豬瘟病毒科非洲豬瘟病毒屬的雙鏈DNA 病毒，是迄今為止蜱傳病毒中唯一已知的DNA 蟲媒病毒[6]。自1921 年非洲豬瘟疫情首次在肯尼亞發現以來，ASFV 已從非洲蔓延到歐洲、亞洲、北美洲、南美洲等60 多個國家和地區[5]，且仍呈流行擴大趨勢[7-8]。截至2020 年12 月底，中國已有31 個省（市、自治區）發生了173 起非洲豬瘟疫情，累計死亡和撲殺生豬約101.1萬頭，不僅給養豬業帶來巨大損失，還嚴重威脅我國豬肉生產和糧食安全[9]。

近年來，非洲豬瘟在新疆烏魯木齊、哈密等地陸續發生，嚴重威脅當地生豬養殖業的發展。為進一步了解哈密市非洲豬瘟疫情發生后，疫點、疫區、流行病學關聯區域、受威脅區及其他區域ASFV 的污染程度，本研究對哈密市非洲豬瘟疫情發生后的不同風險區域的風險因素進行病原學監測和分析，為今后非洲豬瘟疫情防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集和區域監測

2022 年2 月哈密市伊州區發生非洲豬瘟疫情期間在全市范圍內開展全覆蓋監測，參照農業農村部印發《非洲豬瘟疫情應急實施方案（第五版）》的通知劃分各區域，監測范圍覆蓋疫點、疫區、受威脅區、流行病學關聯區域及其他區域的生豬養殖場戶、屠宰場、商超肉鋪、運輸車輛等各風險區域，在哈密市31個生豬養殖場戶和2個生豬屠宰場共采集樣品3 398份。

1.2 儀器與試劑

實時熒光定量PCR儀購自美國ABI公司；組織研磨儀購自法國BertinTechnologies公司；核酸提取儀及核酸提取試劑盒購自西安天隆公司；非洲豬瘟熒光PCR試劑盒購自洛陽萊普生信息科技有限公司。

1.3 檢測方法

本試驗依據《非洲豬瘟診斷技術》（GB/T 18648—2020），采用實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）法進行檢測。

1.4 數據統計與分析

試驗數據采用Graph Pad Prism軟件進行統計學分析。P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01 表示差異極顯著，P＞0.05 表示差異不顯著。

2 結果與分析

2.1 不同風險區域非洲豬瘟病原學檢測結果（見表1）

表1 不同風險區域非洲豬瘟病原學檢測結果Tab.1 Results of aetiological detection of African swine fever in different risk areas

由表1 可知，在哈密市不同風險區域的3 398 份樣品中，ASFV核酸陽性樣品65份，陽性率為1.91%。其中疫點檢測樣品167份，50份為病毒核酸陽性，陽性率為29.94%；流行病學關聯區域檢測175份，10份為ASFV核酸陽性，陽性率為5.71%；疫區檢測樣品289份，5份為病毒核酸陽性，陽性率為1.73%；受威脅區檢測樣品415份均為陰性；其他區域2 352份樣品均為陰性。

2.2 不同風險區域非洲豬瘟病原學檢測陽性率（見表2）

表2 不同風險區域非洲豬瘟病原學檢測陽性率Tab.2 Positive rate of aetiological detection of African swine feverin different risk regions

由表2可知，疫點ASFV陽性率最高為29.94%，極顯著高于疫區、受威脅區、流行病學關聯區域以及其他區域的陽性率（P＜0.01）；疫區ASFV 陽性率為1.73%，極顯著高于受威脅區、其他區域的陽性率（P＜0.01），顯著低于流行病學關聯區域的陽性率（P＜0.05）；受威脅區ASFV 陽性率為0，極顯著低于流行病學關聯區域的陽性率（5.71%）（P＜0.01）；流行病學關聯區域ASFV 陽性率極顯著高于其他區域的陽性率（P＜0.01）。

從疫點檢測結果來看，ASFV感染豬的抗凝血、分泌物和組織中均檢出ASFV核酸陽性，陽性率分別為100.00%、100.00%和87.50%。從疫區和流行病學關聯區域的檢測結果來看，在飼料和環境樣品中檢出ASFV 核酸陽性。結果顯示，人員、車輛、工具、環境或飼料等風險因素可能是引發非洲豬瘟疫情的主要原因之一。

3 討論

ASFV結構復雜，基因組龐大，迄今為止全球共報告了24 種ASFV 基因型，其中20 種分離自家豬，但只有5 種豬適應基因型（Ⅰ、Ⅱ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ）的病毒在各地廣泛傳播[10]。基因Ⅰ型是傳播最廣泛的ASFV，也是唯一在非洲邊界以外不同時期傳播和確立的毒株[11]。基因Ⅷ型、Ⅸ型和Ⅹ型病毒在非洲具有很長的歷史，而基因型Ⅸ型和Ⅹ型在東非占主導地位，在中非有一定的傳播，但迄今為止沒有進一步傳播[12]。基因Ⅱ型病毒最初在莫桑比克發現，隨后在歐洲和亞洲廣泛傳播，現在已傳播到全球[13]。目前，中國以基因Ⅱ型病毒流行為主，與東歐和俄羅斯流行的病毒密切相關[14]。2021 年，中國報告了基因Ⅱ型和基因I 型ASFV的出現[15]。有研究指出，缺乏早期監測系統、蜱蟲媒介監測、生豬異地調運環節檢測、屠宰環節檢測以及使用不安全的豬血飼料和泔水等因素可能是該病毒在中國31個省份的迅速傳播的主要原因[16]。盡管最初ASFV表現出了極高的遺傳穩定性，然而2020年有研究報告了多個ASFV變異株的出現，變異病毒的產生有可能導致具有新特征的ASFV毒株出現，可能會在未來顯著影響ASFV的流行[17]。

與其他病毒相同，ASFV的傳播也需要傳染源、傳播途徑、易感動物等3 個基本條件。軟蜱和野豬是ASFV 的主要儲存宿主和傳播媒介，家豬、野豬、疣豬等被感染病毒的蜱叮咬而感染[18]，使該病毒在蜱-野豬中長期存在且難以根除，并在一定條件下感染家豬，引起疫情暴發。通常，發病豬和帶毒豬是ASFV 的主要傳染源，病豬組織和體液中含有高滴度的病毒，可經唾液、尿液、糞便和分泌物等排出體外。接觸傳播、經食傳播和軟蜱叮咬傳播是ASFV 的主要傳播途徑[19]，易感豬可通過與發病豬經口鼻直接接觸，或接觸病豬的排泄物、血液以及被污染的圈舍、器具、車輛等發生感染，也可因被攜帶ASFV 的軟蜱叮咬或食入污染的飼料、飲水、泔水等感染。此外，由于ASFV對外界環境具有極強的抵抗力，可在血液、糞便、未熟的豬肉制品、腌肉和泔水中長期存活，在凍肉中可存活數年甚至數十年[20]，導致該病毒在自然界的長期存在，嚴重威脅野豬和家豬等易感動物。因此，要控制病毒傳播，必須做到盡早檢測，發現病毒源頭和傳播風險因素，及時切斷非洲豬瘟的傳播鏈。

盡管安全有效的疫苗是應對當前非洲豬瘟疫情防控的關鍵手段，但是由于ASFV基因組龐大、結構復雜、基因型多樣，導致尚無有效的藥物或商品疫苗可用[21]。目前，該病的防控主要依賴嚴格的動物檢疫、“拔牙”、凈化、撲殺和無害化處理等程序。此外，由于ASFV高度穩定，對外界環境抵抗力較強，傳播途徑和風險因素復雜多樣，給非洲豬瘟的有效防控帶來了巨大挑戰。因此，全面了解ASFV傳播風險因素對于有效控制該病傳播至關重要[22]。然而不同地區豬感染ASFV 的類型和風險因素尚不清楚，不同傳播途徑的傳播風險如何也缺乏研究資料。在整個ASFV傳播過程中，主要的潛在風險因素決定了ASFV 在野豬或家豬中的區域傳播[23]。

有研究發現，ASFV可通過不同途徑引入并傳播，如生豬和豬肉產品貿易，跨區、跨境調運，野豬及蜱蟲媒介，使用被污染的飼料及泔水喂豬，未經有效消毒的受污染運輸車輛或從業者等均是ASFV 的傳播途徑[16,24]。ASFV 能夠在飼料中保持傳染性，豬可通過食用受污染的飼料傳播。Niederwerder 等[25]研究發現，ASFV DNA 在幾乎所有的飼料中均有很高的穩定性，其傳染性在豆粕中最穩定，在4.44 ℃下至少能夠保持112 d，提示飼料中ASFV傳播的風險不容忽視。豬血作為一種重要的蛋白質來源，常作為豬和其他動物的添加飼料。有研究通過qPCR 檢測及ASFV的全基因組測序發現遼寧省、河北省部分公司生產的豬血飼料被ASFV污染，且ASFV基因組與我國豬攜帶的ASFV樣本的基因組相同[26]，提示豬血飼料可能是ASFV 傳播的一個重要來源。本研究對不同風險因素進行分析發現，除感染豬的血液及組織傳播風險最高外，攜帶病毒的人員和車輛的傳播風險較高，其次是受污染的飼料。

4 結論

本研究結果表明，通過對不同風險區風險因素的定時監測與分析，可為預防和控制非洲豬瘟疫情流行提供切實有效的建議。生豬、飼料、豬肉產品以及運輸環節均可能是導致ASFV 傳播的重要因素。因此，有必要加強對傳染源和風險因素的定時監測，包括對野豬和蜱蟲媒介的監測，對養殖場、轉運車輛、易感動物的監測，對水源、飼料等風險因素的監測。應嚴禁疫點、疫區及流行病學關聯區域生豬及生豬產品的調運，加強其他區域的市場調運環節和屠宰環節的檢疫監管力度，嚴禁養殖場（戶）使用有污染風險的飼料（豬源性蛋白飼料、泔水等）喂豬，以有效降低非洲豬瘟疫情的傳播風險。