曾昌平,汪于波,李佳艷,曾凱芳,2,明 建,2,鄧麗莉,2,
(1.西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院,重慶 400700;2.西南大學(xué)食品貯藏與物流研究中心,重慶 400715)
李果實(shí)是中國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)類水果之一,在我國(guó)種植范圍較廣,青脆李(Prunus salicinaL.)也是重慶市重要的特色農(nóng)產(chǎn)品之一,每年為重慶地區(qū)種植業(yè)創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)效益[1]。作為一種典型的呼吸躍變型水果[2],青脆李果實(shí)在采后貯藏過程中會(huì)發(fā)生一系列變化,使果實(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)橄M(fèi)者喜歡的風(fēng)味和較軟的質(zhì)地[3]。但由于青脆李果實(shí)多成熟于潮濕、炎熱、多雨的夏季[4],其在采后也極易出現(xiàn)品質(zhì)劣變[5],如軟化、轉(zhuǎn)黃、腐爛率增加等,給青脆李果實(shí)的貯藏和流通都帶來了一定挑戰(zhàn)。
前期已有研究表明,1-MCP[6]、腐胺[7]、氨基乙氧基乙烯基甘氨酸[8]、一氧化氮[9]、水楊酸[10]、二氧化氯[11]等外源處理在延長(zhǎng)李果實(shí)的采后貯藏壽命,提升李果實(shí)采后品質(zhì)方面均表現(xiàn)出一定的作用,但這些保鮮方式多存在著操作復(fù)雜、成本高、與現(xiàn)有商品化處理設(shè)施匹配性不佳等問題,導(dǎo)致其中真正用于產(chǎn)業(yè)應(yīng)用的處理較少。綜合考慮消費(fèi)者對(duì)食品安全需求的增加以及目前果蔬采后商品化處理程度增加、勞動(dòng)力成本激增等現(xiàn)象,進(jìn)一步尋找安全、便捷、有效的,適用于產(chǎn)業(yè)應(yīng)用的青脆李保鮮方式對(duì)青脆李產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。
青脆李果實(shí)成熟衰老過程中有明顯的質(zhì)地軟化和轉(zhuǎn)色發(fā)生。果實(shí)質(zhì)地變化與細(xì)胞壁的變化具有密切關(guān)系,采后果實(shí)質(zhì)地的改變通常認(rèn)為是果實(shí)細(xì)胞初生壁和胞間層組織中的多糖降解,引起細(xì)胞壁超微結(jié)構(gòu)改變所導(dǎo)致的[12]。而細(xì)胞壁組裝可能受到阿拉伯半乳聚糖蛋白(AGP)的影響[13],同時(shí),AGP 也是組成細(xì)胞壁的一種糖蛋白,參與細(xì)胞壁的構(gòu)成[14]。相關(guān)研究表明,AGP 與番茄和蘋果等果實(shí)的成熟衰老密切相關(guān),AGP 也有可能在植物抗病和生長(zhǎng)過程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用[15-16]。阿拉伯半乳聚糖(AG)是一類長(zhǎng)的、高度支鏈的由阿拉伯糖與半乳糖組成的中性多糖[17-18],是AGP 的重要組成成分。國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)(現(xiàn)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì))《關(guān)于批準(zhǔn)番茄籽油等9 種新食品原料的公告(2014 年第20 號(hào))》中明確規(guī)定,AG 食用量≤15 g/d[19]。表明,AG 具有較高的安全性,且其較好水溶性,為其在大規(guī)模商品化過程使用提供了可能。目前果蔬中AG 的研究主要集中在其結(jié)構(gòu)[20]與功能[13],而將AG 應(yīng)用于果蔬保鮮領(lǐng)域則鮮有探究。
本文通過測(cè)定貯藏過程中青脆李果實(shí)顏色、硬度、可溶性固形物、可滴定酸、抗壞血酸、總酚和類黃酮等品質(zhì)指標(biāo)變化,探討了外源AG 處理對(duì)采后青脆李果實(shí)貯藏特性的影響,以期為AG 在采后青脆李果實(shí)貯藏保鮮方面的應(yīng)用提供理論參考。
實(shí)驗(yàn)所用青脆李 采摘于重慶市北碚區(qū),采后剔除病果、傷果、畸形果,挑選果實(shí)飽滿、色澤鮮亮、無異常斑點(diǎn)、大小相近、成熟度基本一致的青脆李果實(shí),DA-Meter 便攜式水果成熟度檢測(cè)儀測(cè)定IDA值(葉綠素吸收率指數(shù),the chlorophyll absorbance index)在1.8~2.0;阿拉伯半乳聚糖 上海源葉生物科技有限公司;氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁 成都市科隆化學(xué)品有限公司;抗壞血酸、甲醇 上海麥克林生化科技有限公司;草酸 上海滬試實(shí)驗(yàn)室器材股份有限公司;沒食子酸、蘆丁 北京索萊寶科技有限公司;磺基水楊酸 重慶川東化工試劑廠;所用試劑均為分析純。
DA-Meter 便攜式水果成熟度檢測(cè)儀 意大利T.R. Turoni Srl 公司;H1 型全自動(dòng)酶標(biāo)儀 美國(guó)伯騰儀器有限公司;L-8800 型氨基酸自動(dòng)分析儀 日本日立公司;GS-15 型質(zhì)地分析儀 南非GUSS 公司;DW-HL528 型超低溫冷凍儲(chǔ)存箱 中科美菱低溫科技股份有限公司;TGL-18MS 型高速冷凍離心機(jī) 上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司;F920 型CO2分析儀 美國(guó)菲利克斯儀器公司;CR-400 型色差儀日本柯尼卡美能達(dá)公司;PAL-1 型數(shù)顯手持式折射儀 日本ANTAGO 公司;DDS-307A 型電導(dǎo)率儀上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;GC2010 型氣相色譜儀 日本島津公司。
1.2.1 果實(shí)處理及貯藏條件 將受試果實(shí)隨機(jī)分為3 組,一組于5 g/L AG 溶液中浸泡10 min,一組于10 g/L AG 溶液中浸泡10 min,對(duì)照組于清水中浸泡10 min,果實(shí)在常溫下晾干后于常溫下貯藏(20±1 ℃),貯藏期為12 d,每3 d 進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定并取赤道部位果肉樣品用液氮冷凍后于-80 ℃下保存,用于相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定。
1.2.2 色差的測(cè)定 果實(shí)色差值采用色差儀測(cè)定。根據(jù)國(guó)際照明委員會(huì)L*、a*、b*的色彩空間,測(cè)定果實(shí)果皮赤道部位的L*、a*、b*值。其中,L*表示光澤度;a*表示紅綠值;b*表示黃藍(lán)值。每組測(cè)定20 個(gè)果實(shí),每個(gè)果實(shí)測(cè)定赤道對(duì)應(yīng)的3 個(gè)點(diǎn),取其平均值作為該果實(shí)的色差值。
1.2.3 硬度、失重率和腐爛率的測(cè)定 硬度的測(cè)定參考曹建康等[21]的方法,略有修改。通過GS-15 質(zhì)地分析儀測(cè)定青脆李果實(shí)(為去皮)赤道部位的硬度,探頭直徑為8 mm,下壓距離為1.0 mm,在赤道部位等距離測(cè)定3 個(gè)位置的硬度,以3 個(gè)位置硬度的平均值為該果實(shí)的硬度,硬度以kg 表示。
失重率的測(cè)定參考Hossein 等[10]的方法,略有修改。每組隨機(jī)取20 個(gè)果實(shí)用于測(cè)定失重率,按照下式計(jì)算每組果實(shí)的失重率(%),計(jì)算平均值。
腐爛率的測(cè)定參考龔娣[1]的方法,略有修改。每組取60 個(gè)果實(shí)用于測(cè)定腐爛率,每隔3 d 統(tǒng)計(jì)腐爛果實(shí)個(gè)數(shù)。將表面有破裂、有凹陷、發(fā)生褐變、局部軟化的果實(shí)記為腐爛果實(shí),按照下式計(jì)算每組果實(shí)的腐爛率(%),計(jì)算平均值,腐爛率達(dá)到50%時(shí)則認(rèn)為該組果實(shí)失去商品價(jià)值。
1.2.4 相對(duì)電導(dǎo)率、呼吸速率和乙烯生成速率的測(cè)定 相對(duì)電導(dǎo)率的測(cè)定:參考曹建康等[21]的方法,使用電導(dǎo)率測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。
呼吸速率的測(cè)定:測(cè)定青脆李的質(zhì)量以及體積后,將其置于密閉空間中,使用CO2分析儀檢測(cè)30 min 后該密閉環(huán)境中CO2含量的變化,青脆李呼吸速率以μL CO2·min-1·g-1表示。
果實(shí)乙烯生成速率的測(cè)定參考Zaidi 等[22]方法,略有修改。測(cè)定青脆李的質(zhì)量以及體積后,將其置于密閉容器中,30 min 后抽取該容器中氣體保存于取氣袋中用于乙烯含量測(cè)定。使用氣相色譜儀對(duì)乙烯含量進(jìn)行測(cè)定,氣相色譜測(cè)定條件為:色譜柱:DB-5MS(毛細(xì)管柱)30.0 mm×0.25 mm×0.25 mm;進(jìn)樣口(SPL)100.0 ℃,柱溫60 ℃,氫離子火焰檢測(cè)器(FID)溫度130 ℃;載氣氮?dú)饬魉?0 mL/min;燃?xì)鈿錃饬魉贋?0 mL/min;助燃?xì)饪諝饬魉贋?00 mL/min;壓力控制流量,壓力為113.5 kPa;樣品采集時(shí)間為5 min。
1.2.5 可溶性固形物、可滴定酸和抗壞血酸含量的測(cè)定 可溶性固形物含量的測(cè)定參考曹琦[23]的方法,使用數(shù)顯手持式折射儀測(cè)定,單位用%表示。
可滴定酸含量的測(cè)定參考曹建康等[21]的方法,略有修改。稱取1.0 g 果肉磨碎后加入20 mL 蒸餾水,充分搖勻后靜置30 min,離心(8000 r/min,5 min),取上清液用0.05 mol/L 氫氧化鈉溶液滴定。
抗壞血酸含量的測(cè)定參考周婷等[24]的方法,使用2,6-二氯酚靛酚滴定法進(jìn)行測(cè)定。
1.2.6 總酚和類黃酮含量的測(cè)定 總酚和類黃酮含量的測(cè)定參考徐燕紅[25]的方法,并略有修改。稱取1.0 g 青脆李果實(shí),于液氮中研磨成粉末,用4 mL 1%鹽酸-甲醇溶液低溫超聲避光提取1 h,然后離心30 min(4 ℃,8000 r/min),重復(fù)提取兩次,合并上清液,用于總酚、類黃酮的測(cè)定。
總酚含量的測(cè)定:將0.1 mL 提取液、3.9 mL 蒸餾水和0.25 mL 福林酚試劑,混勻后于室溫下放置3 min,隨后加入0.75 mL 20% Na2CO3溶液,混勻后于40 ℃水浴中反應(yīng)30 min,立即置于冰浴中停止反應(yīng),10 min 后取出,再于室溫下放置30 min,隨后在730 nm 下測(cè)定吸光值。根據(jù)沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.008x+0.0453,R2=0.9996)計(jì)算總酚含量,用mg/g表示。
類黃酮含量的測(cè)定:將1 mL 提取液,0.3 mL 5%NaNO2溶液混勻后靜置6 min,再加入10% Al(NO3)3溶液0.3 mL,搖勻后靜置6 min;再加入4% NaOH溶液4 mL,搖勻;最后用蒸餾水定容至10 mL,靜置15 min 后,在510 nm 下測(cè)定其吸光度值。根據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(y=0.0006x+0.0393,R2=0.9988)計(jì)算類黃酮含量,用mg/g 表示。
1.2.7 游離氨基酸含量的測(cè)定 游離氨基酸含量的測(cè)定參考令陽(yáng)[26]的方法,稱取2.0 g 的青脆李樣品,于液氮中研磨成粉末,再將青脆李樣品粉末置于10 mL離心管中,加入6%磺基水楊酸2 mL,振搖約1 min后,離心15 min(4 ℃,10000 r/min)后,使用0.22 μm水相過濾,將濾液于L-8800 型氨基酸自動(dòng)分析儀中進(jìn)行分析,各類氨基酸含量之和記為總氨基酸含量。
1.2.8 轉(zhuǎn)錄組分析 對(duì)0、3 和6 d 的青脆李果實(shí)樣本進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,測(cè)序委托廣州基迪奧生物科技有限公司進(jìn)行,提取質(zhì)量合格的RNA 樣本進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,測(cè)序得到的原始圖像數(shù)據(jù)經(jīng)堿基識(shí)別轉(zhuǎn)化為序列數(shù)據(jù)的原始讀數(shù),利用HISAT2 將數(shù)據(jù)質(zhì)控后得到的clean reads 與參考基因組進(jìn)行比對(duì),本研究中參考的基因組為Prunus salicinaSanyueli Whole Genome v2.0 Assembly & Annotation,組間的差異基因采用DESeq2 軟件分析,以|lg2(Fold Change)|>1且P<0.05 作為篩選差異基因的指標(biāo)。
以上指標(biāo)均設(shè)3 個(gè)平行。所有數(shù)據(jù)用Excel 2019統(tǒng)計(jì)。使用GraphPad Prism 9.0(GraphPad Software,CA,USA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析并繪圖,采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)進(jìn)行方差分析,差異水平為P<0.05。
2.1.1 AG 處理對(duì)采后青脆李果實(shí)外觀和色差的影響 不同濃度AG 處理組青脆李果實(shí)的外觀變化如圖1(a)所示,青脆李果實(shí)在貯藏過程中顏色逐漸由綠色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色,在3 d 和6 d 時(shí),三組青脆李果實(shí)色澤均保持綠色,但是對(duì)照組和10 g/L AG 處理組果實(shí)的綠色較淺,而5 g/L AG 處理組果實(shí)的綠色較深;隨著貯藏時(shí)間的增加,對(duì)照組和10 g/L AG 處理組在12 d 轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色;5 g/L AG 處理組在15 d 仍然保持較淺的綠色,此時(shí),對(duì)照組和10 g/L AG 處理組青脆李果實(shí)幾乎完全轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。

圖1 AG 處理對(duì)青脆李果實(shí)外觀和色差的影響Fig.1 Effects of AG treatment on the appearance and color difference of Qingcui plum fruit
不同濃度AG 處理組青脆李果實(shí)色差的變化如圖1(b~e)所示,青脆李果實(shí)貯藏過程中L*值呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì),表明青脆李果實(shí)貯藏過程中亮度在不斷降低;a*值、b*值和a*/b*值呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì),表明青脆李果實(shí)在貯藏過程中逐漸由綠色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色,與果實(shí)外觀變化一致。如圖1(c~e)所示,5 g/L AG 處理組果實(shí)的a*值、b*值始終顯著低于對(duì)照組和10 g/L AG 處理組(P<0.05),a*/b*值始終顯著低于對(duì)照組和10 g/L AG 處理組(P<0.05),表明5 g/L AG 處理能夠顯著延緩貯藏過程中青脆李果實(shí)由綠變黃的轉(zhuǎn)色過程。
2.1.2 AG 處理對(duì)采后青脆李果實(shí)硬度、失重率和腐爛率的影響 如圖2(a)所示,青脆李果實(shí)在貯藏過程硬度呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì),貯藏3 d 時(shí),5 g/L AG處理組的硬度顯著高于10 g/L AG 處理組(P<0.05),與對(duì)照組無顯著性差異;貯藏6~15 d 時(shí),5 g/L AG處理組的硬度均顯著高于對(duì)照組和10 g/L AG 處理組(P<0.05),在貯藏15 d 時(shí),5 g/L AG 處理組的硬度分別是對(duì)照組的10 g/L AG 處理組的1.22 倍和1.27倍,表明5 g/L AG 處理能夠延緩青脆李果實(shí)貯藏過程中硬度的降低。

圖2 AG 處理對(duì)青脆李果實(shí)硬度、失重率和腐爛率的影響Fig.2 Effects of AG treatment on firmness, weight loss rate and rot rate of Qingcui plum fruit
青脆李果實(shí)貯藏過程中失重率的變化呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)(圖2b),貯藏3 d 和6 d 時(shí),5 g/L AG處理組的失重率略低于對(duì)照組和10 g/L AG 處理組,但并不存在顯著性差異;貯藏到9 d 和12 d 時(shí),5 g/L AG 處理組的失重率顯著低于10 g/L AG 處理組(P<0.05),到15 d 時(shí),5 g/L AG 處理組的失重率分別為對(duì)照組10 g/L AG 處理組的85.6%和80.1%,表明5 g/L AG 處理能夠延緩青脆李果實(shí)貯藏過程中重量的降低。
青脆李果實(shí)貯藏過程中腐爛率呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)(圖2c),貯藏12 d 時(shí),對(duì)照組和10 g/L AG處理組開始發(fā)生腐爛,5 g/L AG 處理組在15 d 才發(fā)生腐爛,且其15 d 時(shí)的腐爛率僅為13.33%,僅為對(duì)照組的44.44%,10 g/L AG 處理組的52.17%。
綜合貯藏過程中不同處理組果實(shí)色差、硬度、失重率、腐爛率指標(biāo)的變化,5 g/L AG 處理組能夠明顯地延緩青脆李果實(shí)的成熟衰老進(jìn)程,后續(xù)針對(duì)該濃度進(jìn)行進(jìn)一步分析。而10 g/L AG 處理組效果明顯較5 g/L 處理組差,這可能與AG 在果實(shí)表面具有一定的成膜性,過高濃度的AG 影響青脆李果實(shí)的正常呼吸作用和蒸騰作用有關(guān),因此后續(xù)選擇5 g/L AG 處理進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。此外,綜合前述指標(biāo)發(fā)現(xiàn),常溫貯藏超過12 d,果實(shí)商品價(jià)值顯著降低,因此,后續(xù)指標(biāo)重點(diǎn)關(guān)注12 d 以內(nèi)變化。
2.1.3 AG 處理對(duì)采后青脆李果實(shí)相對(duì)電導(dǎo)率、呼吸速率和乙烯生成速率的影響 青脆李在貯藏過程中相對(duì)電導(dǎo)率的變化如圖3(a)所示,果實(shí)相對(duì)電導(dǎo)率整體呈現(xiàn)上升趨勢(shì),5 g/L AG 處理的相對(duì)電導(dǎo)率在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均低于對(duì)照組,在6 d 和12 d 顯著低于對(duì)照組(P<0.05),表明5 g/L AG 處理能夠抑制青脆李果實(shí)果皮采后相對(duì)電導(dǎo)率的上升。

圖3 AG 處理對(duì)青脆李果實(shí)相對(duì)電導(dǎo)率、呼吸速率和乙烯生成速率的影響Fig.3 Effects of AG treatment on relative conductivity,respiration rate and ethylene production rate of Qingcui plum fruit
青脆李在貯藏過程中呼吸速率的變化如圖3(b)所示,果實(shí)呼吸速率呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì),在3 d和6 d 時(shí),對(duì)照組和5 g/L AG 處理組青脆李果實(shí)的呼吸速率無顯著差異,貯藏到9 d 時(shí),5 g/L AG 處理組的呼吸速率低于對(duì)照組,12 d 時(shí),5 g/L AG 處理組的呼吸速率顯著低于對(duì)照組(P<0.05),僅為對(duì)照組呼吸速率的73.3%。因此,5 g/L AG 處理能夠降低青脆李的呼吸速率。
貯藏過程中,青脆李果實(shí)乙烯生成速率逐漸上升(圖3c),5 g/L AG 處理果實(shí)的乙烯生成速率在3、6 和12 d 顯著低于對(duì)照組(P<0.05),且整個(gè)貯藏期的乙烯變化幅度明顯小于對(duì)照組果實(shí)。表明5 g/L AG 處理能夠抑制采后青脆李果實(shí)乙烯的生成。
2.2.1 AG 處理對(duì)采后青脆李果實(shí)可溶性固形物含量、可滴定酸含量和抗壞血酸含量的影響 青脆李貯藏過程中可溶性固形物含量呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)(圖4a),對(duì)照組果實(shí)可溶性固形物含量在貯藏9 d時(shí)出現(xiàn)明顯上升;5 g/L AG 處理組果實(shí)可溶性固形物含量在貯藏12 d 時(shí)出現(xiàn)明顯上升,表明5 g/L AG 可以在一定程度上延緩青脆李果實(shí)采后可溶性固形物的上升。貯藏期間青脆李果實(shí)可滴定酸含量無顯著變化,但貯藏后期5 g/L AG 處理組果實(shí)可滴定酸含量略高于對(duì)照組果實(shí)(圖4b)。青脆李貯藏過程中抗壞血酸含量呈現(xiàn)逐漸下降趨勢(shì)(圖4c),5 g/L AG 處理組可以延緩青脆李果實(shí)抗壞血酸含量的下降,貯藏6、9 和12 d,AG 處理組果實(shí)抗壞血酸含量分別比對(duì)照組高5.1%、12.0%和4.4%。

圖4 AG 處理對(duì)青脆李果實(shí)可溶性固形物含量、可滴定酸含量和抗壞血酸含量的影響Fig.4 Effects of AG treatment on soluble solid content,titratable acid content and ascorbic acid content of Qingcui plum fruit
2.2.2 AG 處理對(duì)采后青脆李果實(shí)總酚、類黃酮含量的影響 青脆李果實(shí)貯藏過程中的總酚含量整體呈現(xiàn)出上升的趨勢(shì)(圖5a),但是在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)、各處理之間均未呈現(xiàn)顯著性差異(P>0.05),類黃酮含量變化整體呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)(圖5b),但貯藏過程中各個(gè)時(shí)間點(diǎn)、各處理之間并未呈現(xiàn)顯著性差異(P>0.05)。

圖5 AG 處理對(duì)青脆李果實(shí)總酚、類黃酮含量的影響Fig.5 Effects of AG treatment on the content of total phenols and flavonoids of Qingcui plum fruit
2.2.3 AG 處理對(duì)采后青脆李果實(shí)游離氨基酸含量和游離氨基酸代謝相關(guān)基因表達(dá)量的影響 游離氨基酸含量是采后果實(shí)品質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo)之一,多種氨基酸在果蔬抗逆方面具有重要作用,如組氨酸對(duì)植物的金屬離子穩(wěn)態(tài)、生長(zhǎng)和發(fā)育至關(guān)重要[27];蛋氨酸是具有抗氧化特性的巰基物質(zhì),蛋氨酸處理已被用于保持采后西蘭花的品質(zhì)[28];精氨酸是多種生物活性化合物的前體,可以轉(zhuǎn)化為NO 和多胺,調(diào)節(jié)植物的多種生理過程[29-30],相關(guān)研究表明,外源施用精氨酸可增強(qiáng)采后木瓜的耐寒性[31]。
貯藏過程中青脆李果實(shí)游離氨基酸含量的變化如圖6 所示。5 g/L AG 處理顯著提升了青脆李果實(shí)中多種游離氨基酸的含量。貯藏6 d 時(shí),5 g/L AG處理組青脆李果實(shí)中的組氨酸含量比對(duì)照組高14.88%;蛋氨酸含量為處理組的119.99%;精氨酸含量為對(duì)照組的1.42 倍。此外,5 g/L AG 處理組必需氨基酸苯丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸含量在6 d 均高于對(duì)照組,分別為對(duì)照組的108.16%、110.96%和115.32%,天冬氨酸、絲氨酸、甘氨酸的含量在6 d和12 d 均有一定程度的提升;從總氨基酸含量來看,5 g/L AG 處理組的青脆李果實(shí)6 d 時(shí)總氨基酸含量是對(duì)照組的1.19 倍。因此,5 g/L AG 處理能夠提升與采后青脆李果實(shí)抗逆性和營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)有關(guān)的多種氨基酸含量。

圖6 AG 處理對(duì)青脆李果實(shí)游離氨基酸含量的影響Fig.6 Effects of AG treatment on content of free amino acids of Qingcui plum fruit
青脆李果實(shí)游離氨基酸含量變化表明,5 g/L AG 處理組青脆李果實(shí)多種游離氨基酸含量均在貯藏第6 d 時(shí)出現(xiàn)顯著上升或下降趨勢(shì),這可能與貯藏前期某些氨基酸代謝相關(guān)基因表達(dá)量變化有關(guān),因此,進(jìn)一步重點(diǎn)關(guān)注了貯藏第3 d 時(shí)果實(shí)游離氨基酸代謝相關(guān)基因表達(dá)情況。轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析表明(圖7),5 g/L AG 處理組青脆李果實(shí)中與天冬氨酸合成有關(guān)的L-天冬酰胺水解酶基因(At3g16150)表達(dá)量在6 d顯著高于對(duì)照組(P<0.05),與天冬氨酸分解有關(guān)的天冬酰胺合成酶基因(AS)表達(dá)量在3 d 和6 d 顯著低于對(duì)照組(P<0.05),與絲氨酸合成有關(guān)的磷酸絲氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶基因(PSAT1)表達(dá)量在3 d 和6 d 均呈現(xiàn)顯著的上調(diào)表達(dá)(P<0.05),與精氨酸分解代謝有關(guān)的多胺氧化酶基因(PAO5)和脯氨酸脫氫酶基因(POX2)表達(dá)量在3 d 和6 d 均呈現(xiàn)出下調(diào)表達(dá),表明5 g/L AG 處理能夠通過調(diào)控氨基酸代謝相關(guān)基因的表達(dá)量提升其天冬氨酸、絲氨酸和精氨酸含量。

圖7 AG 處理對(duì)青脆李果實(shí)游離氨基酸代謝相關(guān)基因表達(dá)量的影響Fig.7 Effects of AG treatment on expression of free amino acid metabolism-related genes of Qingcui plum fruit
青脆李果實(shí)是一種極易發(fā)生品質(zhì)劣變的水果[32],在采后貯藏過程中,青脆李果實(shí)品質(zhì)逐漸下降,可滴定酸、可溶性固形物、抗壞血酸、總酚、類黃酮、游離氨基酸含量逐漸改變。本研究結(jié)果表明,5 g/L AG 處理降低了青脆李果實(shí)采后的呼吸速率,這可能與殼聚糖處理類似[33],部分AG 附著于青脆李果皮表面,形成物理保護(hù)屏障,減少了青脆李果皮與空氣的接觸面積,減少青脆李果實(shí)水分的散失,進(jìn)而降低李果實(shí)貯藏過程中的失重率,但濃度過高時(shí)可能產(chǎn)生不良影響。此外,呼吸速率的降低也有助于延緩李果實(shí)代謝和酶的活動(dòng),從而延緩細(xì)胞壁成分的降解過程,提升青脆李果實(shí)的硬度,延緩其貯藏過程中相對(duì)電導(dǎo)率和乙烯生成速率的上升。同時(shí),AGP 參與植物下包多種代謝調(diào)控過程[13],AG 處理可能會(huì)影響李果實(shí)中AGP 含量,從而激活李果實(shí)中與抗逆性相關(guān)的某些代謝途徑,進(jìn)而提升李果實(shí)的耐貯藏性,對(duì)照組和處理組總酚和類黃酮含量差距不大的原因可能是由于AGP 未參與其代謝調(diào)控,從而導(dǎo)致其含量變化并不顯著。
綜上所述,5 g/L AG 處理能夠延緩青脆李果實(shí)采后顏色的改變,抑制青脆李果實(shí)的軟化,延緩青脆李果實(shí)采后的相對(duì)電導(dǎo)率、呼吸速率、失重率、腐爛率、乙烯生成速率的上升以及抗壞血酸含量的下降,提升果實(shí)組氨酸、蛋氨酸、精氨酸、苯丙氨酸等與果實(shí)抗逆有關(guān)氨基酸和天冬氨酸、絲氨酸、甘氨酸、亮氨酸、纈氨酸等與果實(shí)營(yíng)養(yǎng)有關(guān)氨基酸的含量,并能將常溫貯藏青脆李果實(shí)的貨架期延長(zhǎng)3 d 以上。即5 g/L AG 處理能有效延緩青脆李果實(shí)采后的衰老進(jìn)程,維持青脆李果實(shí)采后貯藏過程中的品質(zhì),在采后青脆李常溫貯藏保鮮中具有一定的應(yīng)用前景。