單胞藻餌料培養的技術要點

李志剛

摘要：總結了單胞藻餌料培養的主要技術，包括培養種類選擇，一級培養、二級培養、三級培養的設施條件、培養器具、培養用水的處理與消毒、營養鹽的配制及日常管理等環節。

關鍵詞：單胞藻；餌料培養；營養鹽

單胞藻是指天然水域中生長的一類個體微小，呈單個細胞或多個細胞相連的低等級植物，是水體的初級生產力。幾十年來，廣大水產科研工作者經過不懈努力，陸續分離、提純出了一些營養豐富，適口性好，比較易于大規模培養的單細胞藻類品種如金藻、角毛藻、扁藻、塔胞藻、小球藻、小新月菱形藻等等，并在雙殼類貝類育苗中獲得了廣泛的、大規模的應用。筆者多年來在貝類苗種生產中從事單胞藻餌料培養工作，積累了較多的生產經驗，現將這些經驗和工作中的一些心得體會加以總結，供同行們借鑒參考。

1 培養品種的選擇

培養品種的選擇應遵循營養豐富、適口性好、廣溫、廣鹽、比較易于培養的原則。基于上述原則，進行貝類苗種生產，選擇金藻（叉鞭金藻或等鞭金藻）、角毛藻、扁藻（或塔胞藻）、小球藻這幾個品種作為餌料，即可以完全滿足貝苗不同發育階段的營養需求。

2 單胞藻的一級培養

2.1 一級培養室的設施條件

單胞藻一級培養室一般要求采光條件好，要具備日光燈或LED白光燈照明條件，以備連續陰雨天氣時補充光照；要具備空調可以調節室內溫度。

2.2 培養器具

一級培養所需的容器及工具主要有：5000mL三角燒瓶；1000mL量筒或量杯；500mL燒杯；20mL注射器；液化氣爐具；酒精棉球；A4紙或濾紙；橡皮筋以及稱量工具等。

2.3 藻種的引進

要選擇專業的保種單位引進藻種，引進的藻種要求品種純正，無雜藻及細菌污染，處于指數生長期。引種所用的容器要經過嚴格的消毒處理以防止污染。

2.4 培養用水的處理與消毒

單胞藻一級培養用水要求潔凈清澈，砂濾效果不理想時，要采用紗布和脫脂棉進行二次過濾。一級培養用水采用5000mL三角燒瓶煮沸消毒法進行消毒處理，沸騰時間保持1min。煮沸好的三角燒瓶要及時用濾紙或A4紙封口。

2.5 營養鹽的配制

營養鹽的主要成分為氮肥和磷肥，氮肥可選擇硝酸鈉或尿素，磷肥可選擇磷酸二氫鉀，此外還有鐵、錳等微量元素、維生素、氨基酸等輔助成分以及絡合劑乙二胺四乙酸二鈉。配制時按營養鹽配方準確稱取各種成分放入三角燒瓶中，加入定量的淡水，配制成1000倍母液。搖動三角燒瓶，待營養鹽全部溶解后燒至沸騰，如此可避免營養鹽堆積瓶底，散熱不均造成燒瓶炸裂。加熱易分解的成分如維生素、氨基酸等要待營養鹽冷卻至室溫后再加。

2.6 分瓶擴種

當三角燒瓶中單胞藻濃度較高時，要及時分瓶擴種。擴種所需的燒杯、注射器等要經煮沸消毒后再用。擴種時用酒精棉球將手仔細擦拭消毒，用注射器吸取營養鹽，按1：1000的比例向消毒海水中加入營養鹽，搖勻后即可進行分瓶擴種。分瓶擴種的比例通常為1：2，如果急于擴大培養，也可以按1：4的比例進行。

2.7 一級培養的日常管理

2.7.1 搖瓶一級培養過程中，每日早、午、晚三次搖瓶，通過搖瓶，一方面使空氣中的二氧化碳融入藻液中，以補充單胞藻的光合作用對二氧化碳的消耗，降低藻液pH值，同時使沉淀的單胞藻懸浮起來，避免沉淀堆積影響單胞藻的光合作用和生長。

2.7.2 調節光照單胞藻喜漫射光，要根據天氣情況隨時調整光照，晴天要調整遮光簾，避免陽光直射。陰雨天氣要打開人工光源補充光照的不足。

2.7.3 控制溫度大多數單胞藻的適宜生長溫度在20～25℃，低溫和高溫期間，利用空調升溫或降溫，使一級培養室溫度控制在單胞藻的最佳生長溫度。

2.7.4 觀察監測要經常觀察單胞藻的生長和運動情況，根據不同單胞藻的習性和特點，結合顯微鏡觀察，及時發現問題并做出判斷。對光照、溫度等因素造成的問題，要及時加以調整。對受到細菌微生物污染而造成的問題，要及時更換藻種。

3 單胞藻的二級培養

單胞藻的二級培養通常在室外塑料大棚中進行。大棚內上方要設有遮光簾可以便利地調節光照。具備充氣設施。二級培養容器比較多樣化，20L左右的礦泉水桶、50～100L塑料桶均可。如果進行中繼培養，也可以使用500～2000L的塑料缸。

3.1 培養用水的消毒與處理

單胞藻二級培養用水通常采用氯制劑消毒處理，常用的有漂白粉、三氯異氰尿酸消毒片等。由于單胞藻二級藻種存放時間較長，水的消毒處理必須完全徹底。以漂白粉為消毒劑時，漂白粉有效氯要求30％～32％，使用濃度100～200mg／L。罐裝時用水泵將上清液注入培養容器并溢出，使容器上口邊緣及外部也能同時得到消毒處理。注滿水的容器要及時用浸泡過消毒液的塑料布或桶蓋封口，以免氯氣揮發影響消毒效果。

3.2 單胞藻二級擴種

二級擴種最好在晴天的上午進行。擴種所需要的增氧管、氣泡石、燒杯、量筒、注射器等物品以及中和漂白粉余氯用的硫代硫酸鈉溶液以及營養鹽均需經過煮沸消毒處理，容器封口所用的塑料布亦需提前用漂白粉溶液浸泡消毒處理。擴種時先將容器中消毒好的海水倒掉一部分，安裝好充氣管充氣；加入漂白粉的1／3～1／2的硫代硫酸鈉中和余氯；將1000倍的營養鹽母液按1：1000的比例加入營養鹽；將一級藻種加入二級培養容器中，容器封口，完成二級擴種。二級擴種的比例可根據生產需要進行調整，以50L塑料桶為例，可以1瓶擴1桶，也可以1瓶擴多桶。

3.3 單胞藻二級培養的日常管理

單胞藻二級培養通常在常溫下進行，其日常管理主要是根據天氣調節光照；根據溫度情況保溫或通風降溫；經常檢查充氣管是否正常充氣；同時要注意觀察容器中藻類的生長情況，及時發現問題，查明原因，妥善予以處理。

4單胞藻的三級培養

單胞藻的三級培養通常在水泥池中進行，在貝類大規模苗種生產中三級培養池通常在20～50m3。培養用水通常采用漂白粉消毒法進行消毒處理。

4.1 三級培養用水的處理

三級培養用水的處理通常在下午進行。水泥池加好砂濾水后，充氣狀態下將漂白粉用20～40目篩絹網袋洗入池內，保持充氣10～20 min左右，待漂白粉完全散布均勻后關閉氣閥，增氧管摘下全部浸沒在水中，以使得增氧管內壁得到充分的消毒處理。漂白粉要求粉末細膩，殘渣少，有效氯30％以上。漂白粉使用量一般50～100mg／L，應根據砂濾效果和水溫進行適當調整，砂濾效果好、水溫低時可適當少些；砂濾效果較差、高溫期細菌和微生物繁殖活躍時應適當增加使用量。

4.2 單胞藻的三級擴種

單胞藻三級擴種前，安裝好增氧管充氣，排掉部分池水，排水量除了加入藻種的量外，還要在擴種完成后在水面以上留出8～10cm的無菌帶。按漂白粉用量的三分之一左右加入硫代硫酸鈉中和余氯，待中和反應完成后，加入營養鹽，然后加入二級藻種，完成三級擴種。

單胞藻三級培養中，營養鹽的添加量以氮肥計算一般5～20mg／L，可一次性添加，也可以分次添加，具體用量因當地水質條件和天氣條件而加以調整。如果當地自然條件下終年水質較瘦，說明水中營養鹽較為貧乏，三級培養時營養鹽要適當增加。溫度適宜、天氣晴好、藻類生長旺盛時，營養鹽可以適當增加，反之應適當減少。

三級培養擴種時，要挑選顏色深而濃，色澤純正，生長旺盛的二級種作為種源，以提高三級培養的成功率。三級培養接種比例應因天氣的變化而變化，低溫和連續陰雨天氣，接種比例適當提高，水溫適宜，天氣晴好，接種比例可適當降低。

4.3 單胞藻三級培養的日常管理

單胞藻三級培養期間，每日通過目視觀察與顯微鏡相結合的方式，密切關注藻類的生長繁殖情況，發現異常及時采取措施。根據天氣變化情況及時調整光照強度，低溫天氣注意保溫，高溫季節注意開窗通風，盡可能為藻類快速增長創造一個良好的環境條件。

5 小結與討論

5.1 單胞藻餌料培養工作的核心和重點

單胞藻餌料培養工作的核心和重點是預防細菌及原生動物的污染，無論是一級培養、二級培養，還是三級培養，都必須把防范細菌微生物污染放在首位，各個生產環節必須嚴格、規范地實行無菌操作，這是單胞藻餌料培養成功的基礎和前提條件。

5.2 單胞藻三級培養中營養鹽的使用

營養鹽是單胞藻生長繁殖的物質基礎，其多寡直接影響單胞藻的繁殖速度和藻液濃度。由于三級培養后的單胞藻要直接投喂給貝苗，殘留過多的營養鹽并不利于貝苗的生長發育，因此三級培養中營養鹽并不是越豐富越好。在實際生產當中，要根據天氣、水溫、培養品種來適當調整。天氣晴好，水溫適宜，藻類繁殖速度快，營養鹽可適當多一點，反之應減量使用。對于小球藻、扁藻這類抗污染能力較強，培養時間較長的品種，營養鹽可以多一些，以期獲得較高的藻液濃度。如何以最少的營養鹽、最少的營養鹽殘留，獲得較好的繁殖速度和較高的藻液濃度，是每一個單胞藻餌料培養工作者需要細心觀察、總結和研究的問題。這不僅是生產成本問題，更是安全生產的一個重要環節。

參考文獻：

［1］陳明耀．生物餌料培養［M］北京：中國農業出版社，1995：25-26.

Technical key points for unicellular algae cultivation

LI Zhigang

（Dandong Fishery Development Service Center，Dandong，Liaoning，118000）

Abstract：The key technique for cultivating unicellular algae was summarized， including the selection of algae species， facility conditions， cultivation equipment， treatment and disinfection of cultivation water， preparation of nutrient salts， and daily management for primary， secondary， and tertiary culti- vation.

Key words：unicellular algae， feed cultivation，nutrient salts

（收稿日期：2023—04—19）