Cofilin1和Twist1表達與食管癌臨床病理特征及預后的關系

李亞莉 何世陽 魏山林

食管癌為臨床多發(fā)癌癥,近年隨著生活方式與飲食習慣的變化,該病的發(fā)生率不斷上升[1-2]。臨床針對該病多采取以手術(shù)為主的綜合診治措施,通過切除病灶控制病情,但該病復發(fā)風險較高,少數(shù)患者治療后易發(fā)生局部復發(fā)與轉(zhuǎn)移,預后較差[3-4]。因而,臨床若能及時發(fā)現(xiàn)食管癌患者腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移情況,并盡早施行有效的治療,對于改善預后意義重大[5]。伴隨對腫瘤發(fā)病機制有關研究的持續(xù)推進,臨床發(fā)現(xiàn)絲切蛋白1(Cofilin1)與堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子1(TWist1)表達在食管癌癌細胞組織中呈高表達,并會干擾癌變組織的生長[6]。但臨床關于Cofilin1、TWist1與食管癌患者的病理特征與預后聯(lián)系的研究報道較為缺乏,還有待進一步研究。基于此,本研究以本院診治的62例食管癌患者為研究對象,探究Cofilin1、TWist1表達在食管癌組織內(nèi)的表達與意義。信息如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年11月于本院診治的62例食管癌患者為研究對象,采集所有患者的病灶組織(觀察組)與癌旁組織(對照組)。納入標準:所有患者均經(jīng)病理檢查證實;均為首次患病;患者的病歷有關資料齊全;患者納入均遵循自愿原則,依從性較高,且簽署知情同意書。排除標準:合并其他惡性腫瘤者;存在食管狹窄者;合并凝血功能異常者;存在免疫系統(tǒng)病癥者;存有精神疾患,難以配合進行研究者;存有嚴重的腦器質(zhì)性疾病者;伴有血液系統(tǒng)病癥者。所有患者中男性38例,女性24例;年齡37～69歲,平均年齡(55.24±6.69)歲;腫瘤直徑2.1～7.2 cm,平均直徑(4.45±0.83)cm;腫瘤部位:20例上胸段,15例中胸段,27例下胸段;臨床分期:20例Ⅰ期,18例Ⅱ期,24例Ⅲ期;分化程度:25例高分化,19例中分化,18例低分化;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:33例轉(zhuǎn)移,29例未轉(zhuǎn)移。

1.2 方法

標本采集:取手術(shù)切除癌組織與癌旁組織(距離癌組織邊緣5 cm)標本,以免疫組織化學法檢測Cofilin1、TWist1。檢測方法:以甲醛固定12 h,石蠟包埋,切成4 μm厚切片,以65 ℃烤片過夜;二甲苯浸泡、梯度乙醇脫水,高壓鍋內(nèi)抗原熱修復,以3%的過氧化氫溶液孵育0.5 h,去除內(nèi)源性過氧化物酶;之后以山羊血清封閉2 h,滴加鼠抗Cofilin1、TWist1一抗(1∶200),4 ℃孵育過夜;之后滴加二抗,室溫孵育2 h,二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色,蘇木精復染;梯度脫水、封片;以磷酸鹽緩沖液(PBS)替代一抗為陰性對照,在顯微鏡下觀察,Cofilin1、TWist1大部分定位在細胞膜與細胞質(zhì),少數(shù)定位在細胞核,呈棕黃色或棕褐色,以半定量法分析Cofilin1、TWist1表達情況。陽性細胞染色程度評分:0分:無色;1分:淺黃色;2分:棕黃色;3分:棕褐色。陽性細胞百分占比評分:0分:在5%之下;1分:5%～25%;2分:25%～50%;3分;在50%之上。陽性細胞染色程度評分與陽性細胞百分占比評分相乘為總分,0～2分為陰性,3～9分為陽性。

1.3 觀察指標

(1)2組Cofilin1、TWist1陽性表達率對比。(2)Cofilin1、TWist1陽性表達與食管癌患者臨床病理特征關系。(3)隨訪3年,統(tǒng)計分析Cofilin1、TWist1陽性表達與食管癌患者預后的關系。

1.4 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 2組Cofilin1、TWist1陽性表達率對比

癌組織中的Cofilin1、TWist1陽性表達率均高于癌旁組織,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。見表1。

表1 2組Cofilin1、TWist1陽性表達率對比(例,%)

2.2 Cofilin1、TWist1陽性表達與食管癌患者臨床病理特征關系

Cofilin1、TWist1陽性表達與年齡、性別、腫瘤直徑、腫瘤部位、分化程度無關,無統(tǒng)計學差異(P>0.05);Cofilin1、TWist1陽性表達與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。見表2。

表2 Cofilin1、TWist1陽性表達與食管癌患者臨床病理特征關系(例,%)

2.3 Cofilin1、TWist1陽性表達與食管癌患者預后的關系

Kaplan-Meier結(jié)果顯示:Cofilin1、TWist1陽性表達的食管癌患者3年生存率明顯低于Cofilin1、TWist1陰性表達患者,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。見圖1-2。

圖1 Cofilin1陽性表達者Kaplan-Meier生存曲線分析

圖2 TWist1陽性表達者Kaplan-Meier生存曲線分析

3 討論

食管癌在臨床的發(fā)病率處于較高水平,且存在高致死率,給患者的身心安全構(gòu)成較多危害[7-8]。臨床對于食管癌的治療已取得長足進步,可有效改善短期預后,提高生存質(zhì)量。然而大部分的患者經(jīng)臨床診斷時癌變細胞已出現(xiàn)轉(zhuǎn)移,導致多發(fā)轉(zhuǎn)移灶的出現(xiàn),降低了患者3年生存率[9-10]。因此,及時明晰食管癌癌組織的浸潤與轉(zhuǎn)移機制,指導臨床制定更為規(guī)范、更為合理化的診治方案,對于改善患者預后至關重要。

腫瘤細胞的浸潤與侵襲是造成食管癌治療后復發(fā)及誘發(fā)患者死亡的重要原因,由于相關機制較為復雜,故臨床尚未得出統(tǒng)一結(jié)論[11]。既往研究顯示,機體中細胞因子及基因與惡性腫瘤產(chǎn)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)移存在明顯相關性[12]。Cofilin1在真核生物內(nèi)大范圍表達,可結(jié)合、解聚絲狀肌動蛋白,以PH依賴形式阻礙球狀肌動蛋白單體聚合,與細胞發(fā)育、分裂等過程聯(lián)系緊密,其過高表達與腫瘤轉(zhuǎn)移等生物學行為聯(lián)系緊密[13]。TWist1參與調(diào)控細胞分化、遷移等過程,在子宮內(nèi)膜癌等癌變細胞內(nèi)表達水平較高,可加快腫瘤細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化,從而造成腫瘤惡性進展[14-15]。本研究結(jié)果顯示,癌組織的Cofilin1、TWist1陽性表達率均高于癌旁組織,表明Cofilin1、TWist1與食管癌的發(fā)生發(fā)展密切相關。本研究結(jié)果顯示,Cofilin1、TWist1陽性表達與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關。其原因為Cofilin1參與細胞骨架絲狀肌動蛋白重新塑造,可促使癌變細胞入侵與轉(zhuǎn)移。而TWist1能夠促進N-鈣黏素與波形蛋白表達,并阻礙上皮性標志物E-鈣黏素表達,促使腫瘤細胞黏附水平降低,繼而加速腫瘤局部浸潤與遠處轉(zhuǎn)移,加重患者病情。本研究Kaplan-Meier結(jié)果顯示:Cofilin1、TWist1陽性表達的食管癌患者3年生存率明顯低于Cofilin1、TWist1陰性表達患者,提示Cofilin1、TWist1陽性表達的食管癌患者預后較差。因此,臨床對于Cofilin1、TWist1陽性表達患者需予以重視,盡早施行個體化治療,以最大程度控制病情進展,延長患者生存周期。

綜上所述,食管癌患者的癌組織中Cofilin1、TWist1呈高表達,與患者臨床分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關,且陽性表達患者預后較差。