乳腺癌組織中人表皮生長因子受體-2、雌激素受體、磷酸酶張力蛋白同源物的表達及其與臨床病理特征和預后的關系

黃曉玲，趙芳芳，陳香菊

（臨汾市中心醫院病理科，山西 臨汾 041000）

乳腺癌乳腺上皮細胞是在多種致癌因子作用下出現增殖失控而形成的惡性病變，是女性常見的惡性腫瘤類型之一，部分患者接受手術、放化療等治療后仍存在不良預后，因此臨床需尋找特異性與敏感性較高的指標，評估患者病情的進展與預后情況。人表皮生長因子受體-2（HER-2）是細胞膜上的一種蛋白質受體，其可以控制正常細胞的生長與分裂，與多種腫瘤的增殖、生長及轉移密切相關[1-2]。雌激素受體（ER）為基因調節蛋白，主要參與調節生長因子受體通路，可以通過其表達情況預測患者的預后[3-4]。磷酸酶張力蛋白同源物（PTEN）是一種抑癌基因，在細胞核與細胞質中均可表達， PTEN 與乳腺癌的發生、發展及預后密切相關[5-6]。本研究旨在探討乳腺癌組織中HER-2、 ER、 PTEN 的表達情況及其與臨床病理特征和預后的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2018 年1 月至2022 年1 月臨汾市中心醫院收治的225 例女性乳腺癌患者的臨床資料，收集其癌旁正常組織與浸潤性導管癌組織，將其分為正常組與癌化組。納入標準：①符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范（2015 版）》[7]中乳腺癌的診斷標準者；②經檢查腫瘤未發生遠處轉移者；③未接受放化療或性激素類藥物治療者；④既往無乳腺癌或其他惡性腫瘤病史者等。排除標準：①臨床資料不完整者；②合并有結締組織疾病者；③妊娠期乳腺癌者等。本研究經院內醫學倫理委員會審核批準。

1.2 檢測方法取所有患者乳腺癌手術切除病灶組織與癌旁正常組織，固定于10%中性福爾馬林，常規制作石蠟組織切片，厚4 μm，微波加熱進行抗原修復，梯度酒精脫水，滴入濃度為1∶300 的HER-2、ER、PTEN 第一抗體，4 ℃濕盒孵育過夜，而后滴加Envision 第二抗體，37 ℃濕盒孵育30 min。最后顯色、沖洗、復染、封片。HER-2 主要定位于細胞膜或細胞漿中，HER-2 表達判定：細胞無染色或染色細胞≤ 10%為0；細胞染色＞10%、呈不完整的微弱細胞膜染色為1+；細胞染色＞10%、呈不完整的中等強度細胞膜染色，或腫瘤染色＜10%、腫瘤呈完整的細胞膜染色為2+；細胞染色＞10%，呈完整的強度細胞膜染色為3+；HER-2 免疫組化2+者再行熒光原位雜交（FISH）檢測，FISH 檢測無擴增為陰性，2+FISH 檢測擴增與3+均為陽性。ER 定位于細胞核內，ER 的表達分為陽性、陰性和無法判讀，以1%為陽性界值， ≥ 1%的腫瘤細胞核任何強度著色時即判為陽性；在理想的內外陽性對照前提下，＜1%的腫瘤細胞核著色時判為陰性；標本中正常乳腺上皮細胞和腫瘤細胞均無著色時，結果為無法判讀。 PTEN 定位于細胞核與細胞質內，陽性著色表達呈黃色、棕黃色、褐色；著色程度按照無色、淡黃色、棕黃色、棕褐色分別計0、1、2、3 分；陽性細胞所占比例＜5%計0 分，5% ≤ 陽性細胞所占比例＜25%計1 分， ≤ 25%陽性細胞所占比例＜50%計2 分，50% ≤ 陽性細胞所占比例＜75%計3 分，陽性細胞所占比例≥ 75%計4 分；兩積分之和≤ 3 分為陰性，＞3分為陽性[8]。

1.3 觀察指標①比較正常組與癌化組組織中HER-2、ER、PTEN 的表達情況。②HER-2、ER、PTEN 表達與乳腺癌患者臨床病理特征（年齡、組織學分級、TNM 分期、神經/脈管侵犯、淋巴結轉移情況）的關系。③所有患者均隨訪1 年，隨訪期間根據患者預后結果，將其分為生存組（202 例）與死亡組（23 例），比較不同預后患者腫瘤組織中HER-2、ER、PTEN 的表達。④將生存組和死亡組患者的一般資料進行單因素與多因素Logistic 回歸分析，篩選出影響乳腺癌患者預后生存的危險因素。

1.4 統計學方法應用SPSS 22.0 統計學軟件分析數據，計數資料以[ 例(%)] 表示，采用χ2檢驗；計量資料首先采用S-W 法檢驗，對于符合正態分布的計量資料以(±s)表示，采用t檢驗；危險因素分析采用多因素Logistic 回歸分析。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 正常組與癌化組組織中HER-2、ER、PTEN 的表達差異正常組中HER-2 陽性和陰性表達率分別為15.11%（34/225）、84.89%（191/225），ER 陽性和陰性表達率分別為23.11%（52/225）、76.89%（173/225），PTEN 陽性和陰性表達率分別為69.78%（157/225）、30.22%（68/225）；癌化組HER-2 陽性和陰性表達率分別為80.00%（180/225）、20.00%（45/225），ER 陽性和陰性表達率分別為82.22%（185/225）、17.78%（40/225），PTEN 陽性和陰性表達率分別為33.78%（76/225）、66.22%（149/225），見圖1。與正常組比，癌化組HER-2 和ER 的陽性表達率及PTEN 陰性表達率均更高，差異均有統計學意義（χ2=189.930、157.684、58.394，均P＜0.05）。

圖1 癌化組組織中ER、HER-2 及PTEN 免疫組織化學染色圖片（×100）

2.2 HER-2、ER、PTEN 表達與患者臨床病理特征的關系HER-2、ER 陽性及PTEN 陰性患者中組織學分級為3 級、TNM 分期為Ⅲ+Ⅳ、神經/脈管侵犯、淋巴結轉移患者占比分別高于HER-2、ER 陰性及PTEN 陽性患者，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 HER-2、ER、PTEN 表達與乳腺癌患者臨床病理特征的關系[例(%)]

2.3 影響乳腺癌患者預后生存的單因素分析225 例患者均完成隨訪，隨訪期間根據患者預后結果，將其分為生存組（202 例）與死亡組（23 例），死亡率為10.22%。與生存組患者比，死亡組組織學分級3 級、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神經/脈管侵犯、淋巴結轉移、HER-2 陽性表達、ER陽性表達、PTEN 陰性表達的患者占比均更高，組織學分級1+2 級、TNM 分期Ⅰ+Ⅱ期占比均更低，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

表2 影響乳腺癌患者預后生存的單因素分析[例(%)]

2.4 影響乳腺癌患者預后生存的多因素Logistic 回歸分析將表2 中差異有統計學意義的因素納入多因素Logistic 回歸模型分析，結果顯示，組織學分級3 級、TNM 分期Ⅲ+ Ⅳ期、神經/ 脈管侵犯、淋巴結轉移、HER-2 陽性表達、ER 陽性表達、PTEN 陰性表達均為影響乳腺癌患者預后生存的危險因素，差異均有統計學意義（OR=1.672、1.863、1.866、1.548、1.471、1.704、1.525，均P＜0.05），見表3。

表3 影響乳腺癌患者預后生存的多因素Logistic 回歸分析

3 討論

隨著外科手術技術的進步，乳腺癌的臨床治療方法也不斷地改良、優化，但部分患者預后效果仍不理想，亟需探尋更為可靠的指標進行病情評估與療效預測[9-10]。

HER-2 在正常狀況下處于非激活狀態，而病理狀態下HER-2 過度表達提示患者預后較差，且腫瘤細胞的侵襲性會增加，因此其水平可判斷病情嚴重程度[11-12]。ER 陽性表達表示癌細胞的生長需依靠雌激素，其生長增殖與內分泌因素調節相關，給予患者內分泌治療可取得較好的預后效果[13-14]。PTEN 是抑癌基因，能夠抑制細胞增殖，促進細胞分化，在細胞周期調控中具有重要作用，是阻礙乳腺癌細胞增生活躍的重要因素，因此其水平能夠反映病情進展程度[15-16]。本研究中，與正常組比，癌化組HER-2、ER 陽性表達率，PTEN 陰性表達率均更高，HER-2、ER 陽性組織學分級為3 級、TNM 分期為Ⅲ+Ⅳ、神經/脈管侵犯、淋巴結轉移患者占比高于HER-2、ER 陰性患者；PTEN 陽性組患者織學分級為3 級、TNM 分期為Ⅲ+Ⅳ、神經/脈管侵犯、淋巴結轉移均低于PTEN 陰性患者，表明乳腺癌組織中HER-2、ER 蛋白呈高表達狀態，PTEN 蛋白呈低表達狀態，并且與患者的臨床病理資料具有一定的相關性。HER-2 與ER 蛋白陽性表達越高則提示乳腺癌患者腫瘤分化程度越高，轉移風險越大；組織學分級3 級屬于高級別腫瘤，患者病情進展快速，極易出現癌細胞的淋巴結或遠處器官組織轉移；TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期屬于中晚期、晚期，癌細胞已出現一定轉移；浸潤性導管癌的轉移速度較快，侵襲性較強，一旦出現淋巴結轉移或神經/脈管侵犯，臨床治療困難程度會增加，會對患者預后造成不良影響，與蔡冰等[17]及霍翔等[18]研究結果較為一致。本研究中，經單因素與多因素Logistic 回歸分析顯示，組織學分級3 級、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神經/脈管侵犯、淋巴結轉移、HER-2陽性、ER 陽性、PTEN 陰性均為影響乳腺癌患者預后生存的危險因素，提示乳腺癌患者HER-2、ER、PTEN 的表達情況與病情進展與預后具有相關性。該結果與賀新等[19]、張國平等[20]研究結果較為一致。

綜上，乳腺癌組織中HER-2、ER 高表達，PTEN 低表達，乳腺癌組織學分級、TNM 分期、神經/脈管侵犯、淋巴結轉移與乳腺癌組織中HER-2、ER、PTEN 的表達均具有相關性，組織學分級3 級、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神經/脈管侵犯、淋巴結轉移、HER-2 陽性、ER 陽性、PTEN陰性均為乳腺癌患者預后生存的危險因素，進行乳腺癌組織HER-2、ER、PTEN 的檢測能夠為乳腺癌的診治與預后提供一定參考依據，建議臨床進一步研究。