外周血細(xì)胞參數(shù)對(duì)蜜蜂蟄咬后出現(xiàn)器官損傷的預(yù)測(cè)價(jià)值*

查 茜,李 清,李 倩,鄭 瑞,馮 鋼△

皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院:1.檢驗(yàn)科;2.急診科,安徽蕪湖 241001

蜜蜂蟄咬是常見(jiàn)的戶外受傷之一,多發(fā)在春夏兩個(gè)季節(jié)?；颊呔驮\常見(jiàn)原因是蜜蜂蟄咬引起的疼痛。有研究表明,低劑量的蜂毒會(huì)引起過(guò)敏反應(yīng),包括腫脹、紅斑、瘙癢、水皰和疼痛[1]。這些過(guò)敏反應(yīng)通常造成輕度的機(jī)體損傷,在蜜蜂蟄咬后短時(shí)間內(nèi)能夠自身緩解。然而,在某些情況下,如多次蜜蜂蟄咬或機(jī)體免疫反應(yīng)異?？梢l(fā)心肌損傷、橫紋肌溶解、急性腎損傷和肝損傷等器官損傷[2-5]。此外,在一些嚴(yán)重的情況下,蜂毒可以引起多器官功能障礙綜合征(MODS),甚至可能導(dǎo)致死亡[6]。目前,急診科對(duì)于預(yù)測(cè)哪些患者在蜜蜂蟄咬后可能存在器官損傷的風(fēng)險(xiǎn)是困難的。血常規(guī)檢查是一種常見(jiàn)且方便的檢查方法,可以在所有臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。血常規(guī)主要檢測(cè)白細(xì)胞系統(tǒng)、紅細(xì)胞系統(tǒng)和血小板系統(tǒng)。血常規(guī)檢查可通過(guò)外周血細(xì)胞參數(shù)的變化快速提供患者的炎癥狀態(tài)信息[7]。然而,關(guān)于蜜蜂蟄咬后血常規(guī)參數(shù)變化的研究較少。本研究旨在探討蜜蜂蟄咬后外周血細(xì)胞參數(shù)的變化,并評(píng)價(jià)其對(duì)預(yù)測(cè)器官損傷的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年7月至2021年8月在本院急診科收治的233例蜜蜂蟄咬患者作為蟄咬組。其中男135例,女98例;年齡12～87歲,平均44.0歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)蟄咬后6 h以內(nèi)就診急診科;(2)不合并血液病、炎癥、傳染病等其他基礎(chǔ)疾病;(3)標(biāo)本采集良好,無(wú)溶血、凝固等異常情況。根據(jù)7 d內(nèi)的癥狀將蟄咬組分為無(wú)器官損傷組和有器官損傷組。從體檢中心臨床數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選年齡、性別匹配的100例健康者作為對(duì)照組。其中男66例,女34例;年齡14～86歲,平均46.7歲?；颊呒捌浼覍賹?duì)研究知情同意并簽署同意書,本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)(IRB D:2019-021)審批通過(guò)。

1.2儀器與試劑 由急診科采集外周血2 mL,使用邁瑞B(yǎng)C5380血細(xì)胞分析儀檢測(cè)標(biāo)本的外周血細(xì)胞參數(shù)。檢測(cè)試劑為邁瑞血細(xì)胞分析溶血?jiǎng)㎝-68LD。

1.3方法 收集符合納入標(biāo)準(zhǔn)患者的外周血細(xì)胞參數(shù):白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)等指標(biāo)。分別計(jì)算中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞之比(NLR)、血小板與淋巴細(xì)胞之比(PLR)和系統(tǒng)免疫炎癥指數(shù)(SII,計(jì)算公式為PLT×中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 將收集的數(shù)據(jù)使用SPSS19.0軟件進(jìn)行分析,圖片繪制采用GraphPad Prism5.0軟件。上述所收集的數(shù)據(jù)變量采用Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)。非正態(tài)分布的計(jì)量資料以M(P25,P75)表示,組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)或百分率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)。篩選出單因素Logistic回歸分析中被驗(yàn)證為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量,將其帶入多因素Logistic回歸進(jìn)行計(jì)算。采用受試者工作特征(ROC)曲線確定各變量的預(yù)測(cè)值。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1對(duì)照組與蟄咬組的外周血細(xì)胞參數(shù)比較 蟄咬組的WBC、中性粒細(xì)胞、Hb、NLR、PLR、SII均高于對(duì)照組,淋巴細(xì)胞、PLT均低于對(duì)照組(P<0.05)。兩組RBC、性別、年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 健康對(duì)照組與蜜蜂蟄咬組的外周血細(xì)胞參數(shù)比較[M(P25,P75)或n/n]

2.2無(wú)器官損傷組與有器官損傷組的外周血細(xì)胞參數(shù)比較 在隨訪時(shí)間(7 d)中,有22例(9.4%)患者被蜜蜂蟄咬后出現(xiàn)器官損傷。單器官損傷16例(其中急性腎損傷7例、心肌損傷5例、橫紋肌溶解2例、肝損傷2例),多器官損傷6例。與無(wú)器官損傷患者相比,有器官損傷患者外周血WBC、中性粒細(xì)胞、NLR、PLR、SII明顯升高(P<0.05),淋巴細(xì)胞明顯降低(P<0.05)。有無(wú)器官損傷的患者在年齡、性別、RBC、Hb和PLT方面比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 無(wú)器官損傷組與有器官損傷組的外周血細(xì)胞參數(shù)比較[M(P25,P75)或n/n]

2.3單、多因素Logistic回歸分析 PLR升高為蜜蜂蟄咬后出現(xiàn)器官損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)(P=0.019)。見(jiàn)表3。PLR預(yù)測(cè)蜜蜂蟄咬后器官損傷的ROC曲線下面積(AUC)為0.847。PLR預(yù)測(cè)蜜蜂蟄咬后器官損傷的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV)和陰性預(yù)測(cè)值(NPV)分別為77.3%、86.3%、37.0%和97.3%,最佳截?cái)嘀禐?54.57。見(jiàn)圖1。

圖1 PLR預(yù)測(cè)蜜蜂蟄咬后器官損傷的ROC曲線

表3 預(yù)測(cè)蜜蜂蟄咬后患者臟器損傷的單、多因素Logistic回歸分析

3 討 論

蜜蜂蟄咬是人類過(guò)敏最常見(jiàn)的原因之一,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致器官損傷甚至死亡。此外,被蜜蜂蟄咬的死亡率超過(guò)了其他有毒動(dòng)物,如蛇、蜘蛛或蝎子蟄咬的死亡率[8]。目前,毒液特異性抗體測(cè)試可用于預(yù)測(cè)蜜蜂蟄咬后的過(guò)敏反應(yīng)。然而,毒液特異性抗體檢測(cè)很難在急診室常規(guī)進(jìn)行[9]。血液常規(guī)檢查是急診科一種快速、簡(jiǎn)便、廉價(jià)的檢查方法,可提供WBC、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、RBC、Hb、PLT等多種外周血細(xì)胞參數(shù)。最近有研究表明,外周血細(xì)胞參數(shù)可用于多種感染性疾病[10]及多種非感染性疾病的早期預(yù)警和風(fēng)險(xiǎn)分層[11-13]。本研究分析了蜜蜂蟄咬后外周血細(xì)胞參數(shù)的變化,并評(píng)價(jià)其對(duì)預(yù)測(cè)器官損傷的價(jià)值。蜂毒由多種生物活性化合物組成,包括酶、肽、胺和非肽化合物,其中最重要的過(guò)敏原是磷脂酶A2,占干重的20%[14]。這種物質(zhì)被抗原呈遞細(xì)胞(APCs)吸收和處理,將抗原信息呈遞給T細(xì)胞,然后機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答[15]。機(jī)體的B細(xì)胞在抗原刺激下合成特異性IgE抗體。特異性IgE抗體與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面結(jié)合,從而釋放致敏介質(zhì),包括組胺、慢性反應(yīng)物質(zhì)、緩激肽、5-羥色氨酸等[16],進(jìn)而使機(jī)體產(chǎn)生嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)及外周血WBC增加,尤其是中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞增加。磷脂酶A2除了引起過(guò)敏反應(yīng)外,還具有嚴(yán)重的毒性作用,可導(dǎo)致嚴(yán)重溶血和PLT聚集[17-19]。因此,被蜂蟄咬的患者外周血細(xì)胞參數(shù)可出現(xiàn)一系列的變化,如WBC、中性粒細(xì)胞、Hb等參數(shù)顯著上升,淋巴細(xì)胞、PLT等參數(shù)顯著下降。

近些年來(lái),NLR、PLR、SII作為可以反映總體免疫狀態(tài)的全身免疫參數(shù),逐步得到人們的重視[20-21]。在本研究中,筆者發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,蟄咬組的NLR、PLR、SII明顯增高,并且當(dāng)蟄咬組出現(xiàn)器官損傷時(shí),這些參數(shù)變化更為明顯(P<0.05)。該機(jī)制可能與蜂毒引起機(jī)體產(chǎn)生一系列的炎癥免疫反應(yīng)有關(guān)。并且當(dāng)器官出現(xiàn)損傷時(shí),機(jī)體會(huì)自主釋放內(nèi)源性介質(zhì)作為危險(xiǎn)信號(hào),該介質(zhì)可被機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別,進(jìn)一步引發(fā)機(jī)體的炎癥免疫反應(yīng)[22]。

本研究是一項(xiàng)回顧性研究,共收集因蜜蜂蟄咬被送進(jìn)急診室就診的患者233例。在這些患者中,有22例(9.4%)發(fā)生器官損傷,如急性腎損傷、心肌損傷、橫紋肌溶解等。單、多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示,PLR升高可作為蜂蟄咬后產(chǎn)生器官損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,并且PLR判斷蜜蜂蟄咬后器官損傷的靈敏度為77.3%,特異度為86.3%(AUC=0.847,95%CI:0.747～0.947)。過(guò)去的研究發(fā)現(xiàn),PLR可用于某些疾病的預(yù)測(cè)或評(píng)價(jià),如子癇前期[23]、乳腺癌預(yù)后[24]、胃癌轉(zhuǎn)移[25]。PLR是由兩種因素決定的,一個(gè)是PLT水平,另一個(gè)是淋巴細(xì)胞水平。當(dāng)蜜蜂蟄咬后,PLT水平在有器官損傷者和無(wú)器官損傷者之間無(wú)明顯差異,可能是因?yàn)楫?dāng)機(jī)體被蜜蜂蟄咬后,由于磷脂酶A2的毒性作用,導(dǎo)致機(jī)體溶血及出現(xiàn)PLT聚集的現(xiàn)象[18],使體內(nèi)的PLT被消耗,故即使蜜蜂蟄咬后出現(xiàn)器官損傷,PLT水平也不會(huì)進(jìn)一步出現(xiàn)顯著性的變化。有器官損傷者和無(wú)器官損傷者之間淋巴細(xì)胞比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。有研究表明,當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)器官損傷時(shí),T細(xì)胞可以通過(guò)分泌修復(fù)細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子,或者與其他免疫細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞相互作用,參與器官組織修復(fù)的過(guò)程[26],故淋巴細(xì)胞被大量消耗,而機(jī)體的代償功能不足,導(dǎo)致淋巴細(xì)胞大量減少。

本研究結(jié)果表明,PLR可能是蜜蜂蟄咬后器官損傷的預(yù)測(cè)因子。PLR在預(yù)測(cè)蜜蜂蟄咬后器官損傷方面具有較高的NPV(97.3%)。因此,PLR可以快速排除蜜蜂蜇傷后器官損傷的低風(fēng)險(xiǎn)患者。如果本研究結(jié)果得到進(jìn)一步地證實(shí),PLR可以很容易地在急診科得到,以評(píng)估蜜蜂蜇傷的臨床嚴(yán)重程度。但本研究?jī)H招募了相對(duì)較少的蜜蜂蜇咬后器官損傷患者,因此本研究結(jié)果的外部有效性仍有待確定。此外,本研究未對(duì)蜂毒誘導(dǎo)的免疫因子水平變化進(jìn)行研究。

蜜蜂蟄咬后患者的許多外周血細(xì)胞參數(shù)發(fā)生了顯著變化,尤其是器官損傷患者。在外周血細(xì)胞參數(shù)中,PLR升高是蜜蜂蟄咬后器官損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。對(duì)于蜜蜂蟄咬后PLR較高的患者,需要進(jìn)行積極的護(hù)理和干預(yù)。