血清Cys-C、KIM-1 聯合尿NAG 檢測在急性腎損傷診斷及預后評估中的作用

上官緒鋒 錢鵬 趙維維

（河南省職工醫院檢驗科，河南 鄭州 450002）

急性腎損傷（AKⅠ）是嚴重創傷、地震擠壓綜合征及臨床上各種疾病所致的急危重癥[1]。在過去數十年里，盡管血液凈化技術、危重醫學有了很大進步，但敗血癥、休克及嚴重創傷所致的AKⅠ死亡率仍高達50%以上[2]。其死亡率高的主要原因之一是缺乏系統的病情評估及預后判斷的指標，導致在診斷、治療及預后評估方面存在難度。

血清胱抑素C（Cys-Ctatin c，Cys-C）是一種半胱氨酸蛋白酶抑制物，其表達不受患者年齡、性別、肝臟疾病等因素影響[3]。腎損傷分子-1（Kidney injury molecule-1， KⅠM-1）屬于一種脂質運載蛋白，在正常腎臟中無表達，但當腎臟受到藥物毒性或缺血性損傷時，其表達會明顯增高，在患有急性腎小管損傷患者血液及尿液中均可檢測到KⅠM-1[4]。尿N-乙酰β-D 氨基葡萄糖昔酶（urinary N-acetyl β- D-glucosaminidase，uNAG）是一種水解酶，主要存在于近曲腎小管上皮細胞，尿中的NAG 可直接反應腎小球損傷情況[5]。因此，Cys-C、KⅠM-1 及uNAG 等在在一定程度上可診斷AKⅠ，并預測患者預后情況[6]。

但目前有關上述因子聯合檢測在AKⅠ診斷、預后評估中作用的研究較少。基于此，本研究通過分析AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 變化情況，探討其在AKⅠ診斷、預后評估中的價值與意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集本院2018 年7 月至2020 年7 月收治的104 例AKⅠ患者的臨床資料。納入標準：患者均符合AKⅠ臨床診斷標準[7]；腎功能48 h 內迅速減退；臨床資料齊全，無缺損或丟失；無既往手術史。排除標準：合并慢性腎功能不全、慢性肝病、甲狀腺功能異常者；近期內存在腎毒性藥物使用史；妊娠期或哺乳期孕婦；合并泌尿系統感染者；心律失常者。

將104 例AKⅠ患者納入研究組，男性67 例，女性 37 例，年齡 34～81 歲，平均年齡為61.36±6.85 歲；臨床分期：1 期51 例，2 期33 例，3 期20 例；慢性疾病史：糖尿病36 例，高血壓28 例。另同期選取在本院接受健康體檢的62 例受檢者納入對照組，男性37 例，女性25 例，年齡35～81 歲，平均年齡65.52±7.46 歲；慢性疾病史：糖尿病25 例，高血壓14 例。兩組資料比較無差異（P＞0.05）。本研究經醫院倫理委員會同意，患者及家屬知曉且簽署《知情同意書》。

1.2 方法

1.2.1 標本采集

清晨空腹抽取所有受檢者3 mL 外周靜脈血及5-15 mL 中段尿；血清標本以4000 r·min-1離心10 min，分離血清，置于-70℃低溫保存。

1.2.2 血清Cys-C、KIM-1、uNAG 的檢測方法

采用全自動生化分析儀測定uNAG；采用酶聯吸附免疫法檢測血清Cys-C、KⅠM-1 水平。試劑盒均由上海江萊生物科技有限公司提供，具體實驗方法嚴格按照說明書執行。

1.3 觀察指標

（1）比較對照組、研究組血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平；（2）分析不同分期AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平；（3）根據預后存活情況分為死亡組與存活組，對比兩組血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平；（4）繪制受試者工作特征曲線（ROC），分析上述因子水平聯合診斷AKⅠ的價值。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 兩組血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平比較

兩組血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平比較，研究組血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平均明顯高于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。表1。

表1 兩組血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比較（±SD）

表1 兩組血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比較（±SD）

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2.2 對照組與研究組不同分期AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平

對照組血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平均明顯低于1 期、2 期及3 期組（P＜0.05）；不同分期AKⅠ患者中，3 期組上述因子水平均顯著高于1期、2 期組，以1 期組最低（P＜0.05）。見表2。

表2 對照組與不同分期AKI 患者血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比較（±SD）

表2 對照組與不同分期AKI 患者血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比較（±SD）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與1 期組比較，bP＜0.05；與2 期組比較，cP＜0.05。

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2.3 不同預后AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG水平比較

104例AKⅠ患者中，預后存活77例（74.04%），預后死亡27 例（25.96%）。存活組Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平均明顯低于死亡組（P＜0.05）。見表3。

表3 不同預后AKI 患者血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比較（±SD）

表3 不同預后AKI 患者血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比較（±SD）

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2.4 Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平對AKⅠ的診斷價值

ROC 曲線分析結果顯示，Cys-C、KⅠM-1、uNAG 診斷AKⅠ的ROC 下曲線面積（AUC）分別為0.785、0.778、0.736；但三者聯合檢查的AUC更高，為0.819。見表4 與圖1。

圖1 Cys-C、KIM-1、uNAG 水平診斷AKI 的ROC 曲線

表4 Cys-C、KIM-1、uNAG 水平對AKI 的診斷價值

3 討論

AKⅠ是一種常見病、多發病，多數可進展為嚴重腎損傷，具有較高的病死率，且該病的發生與住院病死率具有一定關系，其高死亡的風險歸結于尚缺乏早期診斷、評估預后的特異性生物標志物[1-3]。Cys-C 是一種半胱氨酸蛋白酶抑制物，其表達不受患者年齡、性別、肝臟疾病等因素影響[3]。當腎臟出現輕微損傷時，在肌酐升高2d 前，Cys-C 水平已開始上升，且其水平會隨患者病情嚴重程度增加而上升。且腎小管不分泌 Cys-C，只經過腎小球自由濾過，因此腎臟是唯一清除循環中 Cys-C 的器官。KⅠM-1 屬于一種脂質運載蛋白，在正常腎臟中無表達，但當腎臟受到藥物毒性或缺血性損傷時，其表達會明顯增高，在患有急性腎小管損傷患者血液及尿液中均可檢測到KⅠM-1[2,3]。該因子作為AKⅠ標志物的優勢在于正常腎臟組織中無表達，在損傷的腎小管上皮細胞中持續表達存在[2,3]。

Sun[9]等研究發現，KⅠM-1 在重癥感染合并腎損傷中的陽性表達率可高達95%。NAG 是一種水解酶，主要存在于近曲腎小管上皮細胞，血液中的NAG 無法通過腎小球膜，因此尿中的NAG 可直接反應腎小球損傷情況[5]。國內外多項研究顯示，uNAG 是評估早期腎損傷的有效指標之一[5,10]。

近幾年來，對AKⅠ研究較多的生物標志物有近十種，這些單個標志物敏感性、特異性有限，通過聯合檢測可很好的彌補單一檢測的不足，提高診斷價值。陳國新[10]等人通過聯合檢測5 項指標診斷AKⅠ發現，其AUC 可高達0.925，敏感性、特異性可高達80%以上，較單項檢測均有所提高。趙海霞[11]等通過高齡老年AKⅠ患者尿NGAL、NAG 及KⅠM-1 水平發現，聯合檢測上述因子使AKⅠ的早期敏感性顯著提高。本研究檢測AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平發現，三者聯合檢測診斷AKⅠ的敏感性、特異性及AUC 均高于單個標志物，大大提高了診斷價值。

研究發現，Cys-C、KⅠM-1 不僅可早期判斷AKⅠ的發生，并與患者死亡率有關[12]。本研究通過進一步分析不同分期、預后AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平發現，隨著患者分期增高，血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平亦逐漸上升；且與存活組相比，死亡組上述因子水平均更高，提示血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平與AKⅠ患者病情嚴重程度密切相關。提示血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平聯合檢測不僅可有效診斷AKⅠ，還可更為準確的評估患者預后。

綜上所述，血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平在AKⅠ患者中呈異常高表達，可能與AKⅠ患者病情、預后密切相關，檢測上述因子水平有助于評估患者預后。