地中海貧血患者輸注不同Rh抗原匹配紅細胞后的血清學特征及免疫功能變化

簡曉毅　胡靜美　梁少清

【摘要】? 目的? ? 調查地中海貧血患者輸注不同Rh抗原匹配紅細胞（RBC）后的血清學特征及免疫功能變化。方法? ? 選取中山市博愛醫院2020年1月—2021年6月收治的地中海貧血患者200例為研究對象，輸注不同Rh抗原匹配紅細胞，按照受試者Rh抗原與獻血者Rh抗原匹配程度，分為Rh抗原完全匹配型（n=67）、部分匹配型（n=90）和Rh抗原隨機組（n=43）。比較不同Rh抗原抗體匹配程度組的不規則抗體陽性率、直接抗人球蛋白試驗（DAT）陽性率、不良輸血反應率和輸血有效率；比較不同Rh抗原抗體匹配程度組輸血后免疫功能指標（白細胞介素-2、IgM、CD₄⁺、CD₈⁺、CD₄⁺/CD₈⁺）。結果? ? 3組間的DAT陽性率和不規則抗體陽性率差異有統計學意義（P<0.05），隨機組的DAT陽性率和不規則抗體陽性率最高；3組間的輸血效果有效率和不良反應發生率差異有統計學意義（P<0.05），完全匹配組的輸血效果有效率最高，隨機組的不良輸血反應發生率最高。3組患者輸血后白細胞介素-2、IgM均升高，CD₄⁺、CD₈⁺和CD₄⁺/CD₈⁺均降低，且隨機組白細胞介素-2、IgM最高，CD₄⁺、CD₈⁺和CD₄⁺/CD₈⁺最低（P<0.05）。結論? ? 在臨床工作中，應盡量選擇與受試者Rh抗原相匹配的紅細胞輸注，減少不規則抗體產生和反復輸血對免疫功能的損傷，提高輸血有效率。

【關鍵詞】? 地中海貧血； Rh抗原； 紅細胞； 不規則抗體陽性率

中圖分類號：R556? ? ? ? 文獻標識碼：A

文章編號：1672-1721（2023）20-0093-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.20.031

地中海貧血是一類單基因遺傳性溶血性血液疾病，全世界中有1%～5%的人口是地中海貧血基因攜帶者，我國廣西地區有24.5%的人口攜帶地中海貧血基因[1]。骨髓干細胞移植是唯一可徹底治愈地中海貧血的方法，但配型困難且治療費用高昂，因此臨床上主要采用反復輸注紅細胞血制品維持患者機體血紅細胞的濃度，避免機體缺氧。地中海貧血往往需要終生輸血治療，長期反復的輸血治療可引起不規則抗體產生，隨著輸血次數的增加，該抗體的含量也相應上升，導致患者難以找到配血相合的紅細胞血制品，對后期治療造成嚴重不良影響[2]。目前，地中海貧血患者的紅細胞制品輸注治療主要依靠受試者Rh抗原與獻血者Rh抗原匹配程度來進行，可分為Rh抗原完全匹配、部分匹配和Rh抗原隨機。本研究擬對3種Rh抗原抗體匹配程度患者的血清學特征及其免疫功能變化進行分析，明確何種受試者Rh抗原與獻血者Rh抗原匹配程度更為安全、有效。

1? ? 資料與方法

1.1? ? 一般資料? ? 選取中山市博愛醫院2020年1月—2021年6月收治的地中海貧血患者200例為研究對象，輸注不同Rh抗原匹配紅細胞。納入標準：符合地中海貧血的診斷標準[3]；自愿行輸注不同Rh抗原匹配紅細胞治療。排除標準：研究期間轉院治療、終止輸血治療的患者。按照受試者Rh抗原與獻血者Rh抗原匹配程度，分為Rh抗原完全匹配型（n=67）、部分匹配型（n=90）和Rh抗原隨機組（n=43）。其中Rh抗原完全匹配型（n=67）：男性30例，女性37例，年齡2～20歲，平均年齡（14.15±4.71）歲；部分匹配型（n=90）：男性43例，女性47例，年齡1～19歲，平均年齡（13.30±4.43）歲；Rh抗原隨機組（n=43）：男性23例，女性20例，年齡3～18歲，平均年齡（13.58±3.69）歲。3組患者一般資料差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2? ? 研究方法? ? 所有患者在輸注不同Rh抗原匹配紅細胞后48 h抽取靜脈血，進行血常規、直接抗人球蛋白試驗（DAT）、不規則抗體鑒定，檢測血清白細胞介素-2、IgM、T淋巴細胞表面分子CD₄⁺、CD₈⁺的含量并計算CD₄⁺/CD₈⁺比值，統計所有患者從血液輸注日期至結束后的28 d內發生的不良反應例數和種類。

1.3? ? 觀察指標? ? 比較不同Rh抗原抗體匹配程度組的不規則抗體陽性率、直接DAT陽性率、不良輸血反應率和輸血有效率；比較不同Rh抗原抗體匹配程度組輸血后免疫功能指標（白細胞介素-2、IgM、CD₄⁺、CD₈⁺、CD₄⁺/CD₈⁺）。

1.3.1? ? 不規則抗體的篩查和鑒定? ? 采用全自動血型儀（瑞士Bio-Rad公司，型號IH-1000）及其配套的低離子抗人球蛋白卡對不規則抗體進行篩查；對不規則抗體陽性的標本采用微柱凝膠法和試管法（長春博德生物技術有限公司）進行鑒定，并與譜細胞（廣東營安生物科技有限公司）反應格局進行對比，明確RBC對應抗原和不規則抗體的類別。由同一位具有10年以上不規則抗體鑒定檢驗的輸血科醫師，嚴格按照使用說明書進行操作和鑒定。

1.3.2? ? DAT陽性率? ? 首先用生理鹽水洗滌紅細胞3次，再采用低離子介質將洗滌過的紅細胞配制成0.8%的紅細胞懸液，取50 μL紅細胞懸液到微柱凝膠抗人球蛋白檢測卡中，專用離心機（亞達美公司，轉速1 030 r/min，10 min），觀察結果。由于抗原抗體凝集反應，紅細胞凝集，分子量增大，不能通過微柱管中的凝膠介質，停留在其中上部，由此可鑒定為DAT陽性。

1.3.3? ? 免疫功能? ? 白細胞介素-2、IgM采用酶聯免疫法（南京建成生物技術有限公司）進行檢測；CD₄⁺、CD₈⁺采用流式細胞儀（美國Beckman公司）檢測。

1.3.4? ? 輸血有效率? ? 輸血后的血紅蛋白（Hb）含量采用全自動血細胞分析儀（深圳邁瑞醫療生物有限公司，型號BC-6900）進行檢測，輸血后Hb升高值≥Hb升高預計值的80%為有效，其余為無效。Hb升高預計值（g/L）=供血者的Hb含量（g/L）×輸入量（L）/患者的體質量（kg）×90%（輸入量需要以全血量為標準，將各種紅細胞制劑折算為其相對應的全血量；供血者若為兒童，按照0.09 L/kg進行計算；其中90%為檢驗誤差）。

1.4? ? 統計學方法? ? 采用SPSS 24.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以x±s表示，行t檢驗和單因素方差分析，計數資料以百分比表示，行χ²檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2? ? 結果

2.1? ? 地中海貧血患者血清學特征? ? 3組間的DAT陽性率（χ²=18.785，P<0.001）和不規則抗體陽性率（χ²=25.624，P<0.001）差異有統計學意義，隨機組的DAT陽性率和不規則抗體陽性率最高，具體不規則抗體類型見表1。

2.2? ? 地中海貧血患者輸血效果和不良輸血反應發生情況? ? 3組間的輸血效果有效率（χ²=12.585，P=0.001）和不良反應發生率（χ²=18.775，P<0.001）差異有統計學意義，完全匹配組的輸血有效率最高，隨機組的不良輸血反應發生率最高，具體不良輸血反應類型見表2。

2.3? ? 輸血前后免疫功能變化? ? 3組患者輸血前白細胞介素-2、IgM、CD4+和CD8+差異無統計學意義（P>0.05）；輸血后白細胞介素-2、IgM升高，CD₄⁺、CD₈⁺和CD₄⁺/CD₈⁺降低，且隨機組白細胞介素-2、IgM最高，CD₄⁺、CD₈⁺和CD₄⁺/CD₈⁺最低，差異具有統計學意義（P<0.05），見表3。

3? ? 討論

不規則抗體是指患者血清中含有除抗-A、抗-B外的其他血型的抗體，大多數為IgG抗體，可由反復輸血、Rh陰性孕婦孕育Rh陽性胎兒等免疫刺激因素引發，后期可引起血型鑒定正反不符、新生兒溶血性疾病、血液輸注無效等嚴重不良后果[4]。目前，人類現存的36個紅細胞血型系統中，Rh血型是除ABO血型之外的最重要、最復雜的血型之一，其中的E、e、C、c、D不僅是臨床上的常見血型，而且輸血不良反應發生率也較高[5-6]。因此，對輸注不同Rh抗原匹配紅細胞后的地中海貧血患者的血清學特征進行調查，對于日后輸血安全具有重要意義。

本研究中，不規則抗體陽性率為15%（30/200），其中Rh血型不規則抗原最高，其次為MNS血型，與洪毅等[7]研究報道一致。其中，隨機組的DAT陽性率和不規則抗體陽性率最高，完全匹配組的輸血效果有效率最高，隨機組的不良輸血反應發生率最高，與賀峰等[8]研究報道一致。CD₄⁺和CD₈⁺是機體內兩類重要的免疫細胞表面因子，而CD₄⁺/CD₈⁺比值的增高與降低可表示機體免疫功能的亢進和低下。輸血后，3組患者白細胞介素-2、IgM升高，CD₄⁺、CD₈⁺和CD₄⁺/CD₈⁺比值降低，隨機組白細胞介素-2、IgM最高，CD₄⁺、CD₈⁺、CD₄⁺/CD₈⁺比值最低。這是因為反復輸血治療不僅可增加機體單核-巨噬細胞的負荷，使得巨噬細胞Ⅱ類抗原表達減少，促進了白細胞介素-2和IgM的表達和釋放；而且可產生外源性沉淀產物，誘導T淋巴細胞凋亡，使得CD₄⁺、CD₈⁺比值降低，機體免疫功能被抑制，導致輸血效果降低[9-10]。在臨床工作中，有時可能達不到Rh抗原抗體完全相合的治療原則。有研究表明，即使在抗原抗體完全相合的情況下，患者每輸注1 U的異體紅細胞，有1.0%～1.6%的概率會產生不規則抗體[11]。因此，患者在首次輸血治療后有可能已經產生了不規則抗體，隨機組產生不規則抗體的概率最高。首次產生的不規則抗體含量較低，并無特異的臨床表現，隨著輸血治療次數的增加，不規則抗體含量上升，可出現發熱、過敏，甚至嚴重溶血反應，嚴重影響輸血效果。DAT陽性是由于患者自身抗體或機體接收異源紅細胞產生的免疫復合物黏附在紅細胞膜表面所導致的，IgG-紅細胞復合物更容易被巨噬細胞識別、吞噬，導致急慢性溶血反應的發生[12]。

綜上所述，在臨床工作中，應盡量選擇與受試者Rh抗原相匹配的紅細胞輸注，減少不規則抗體產生和反復輸血對免疫功能的損傷，提高輸血有效率。

參考文獻

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[11]? ? 余旭琦，陳俊妍，嚴海雅.產科回收式自體輸血的研究進展和應用[J].中國輸血雜志，2018，31（5）：568-572.

[12]? ? 周朝霞，楊小紅.74例直接抗人球蛋白試驗陽性患者臨床特征和RBC輸注效果分析[J].湖南師范大學學報（醫學版），2020，17（3）：60-63.

（收稿日期：2023-04-13）