FZD7 在肝癌組織中的表達及對預后的影響

林穎烽

福建醫科大學腫瘤臨床醫學院·福建省腫瘤醫院 （福建福州 350014）

肝癌是一種繼發于肝炎病毒感染、肝硬化和遺傳性代謝性疾病的多因素疾病，在我國屬于高發性疾病，發病率和死亡率在惡性腫瘤中均排名第三，并呈逐年上升趨勢[1-2]。在臨床診療中，大多數肝癌患者就診時已發展至晚期，治療手段較單一且受局限[3-5]。因此，尋找肝癌早期診斷和預后生物標志物，對于提高患者預后水平具有重要意義。FZD（frizzled）家族是Wnt 信號通路的一類跨膜受體，與腫瘤的發生發展存在相關性，其中FZD7 是FZD 10 個亞型中的一種[6-7]。研究發現，FZD7 在肝癌中呈特異性表達，可能促進肝癌的惡性行為[8-9]。基于此，本研究探討FZD7 在肝癌中的表達及對預后的影響，以期為臨床診療活動提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 UALCAN 數據庫分析

UALCAN[10]數據庫是一個開放式、資源共享的公共數據庫，內容涵蓋TCGA 數據庫，收錄了超過31 種公開發表的腫瘤基因轉錄數據及預后信息。本研究基于UALCAN 數據庫收集已經發表的肝癌組織和正常組織的樣本信息，研究FZD7 在肝癌組織和正常組織中的表達水平及FZD7 在肝癌不同臨床分期中的表達水平。

1.2 Kaplan-Meier Plotter 分析

Kaplan-Meier Plotter[11]是一個基于GEO、TCGA、EGA 數據庫存在的生存隨訪信息，在線分析21 種腫瘤預后的工具。本研究利用Kaplan-Meier Plotter 在線工具及網站已收集的肝癌預后數據，繪制FZD7 高表達患者和低表達患者的預后曲線圖，研究FZD7 在肝癌中的預后價值。

1.3 GO 分析和KEGG 富集分析

GO 分析是一種被廣泛應用于注釋特定基因和基因產物生物學功能的工具，可分為生物過程（bioprocess，BP）、分子功能（molecular function，MF）和細胞成分（cell component，CC）。KEGG 是一個高通量數據庫，在基因組水平上解釋細胞和其他生物的高級生物學功能。本研究基于DAVID[12]在線網站收集的高通量樣本數據和算法程序，分析FZD7基因在肝癌組織中GO 分布和KEGG 富集情況。

2 結果

2.1 FZD7 在肝癌組織和正常組織中的表達

FZD7 在肝癌組織中呈高表達，且表達水平明顯高于正常組織，差異有統計學意義（P＜0.05），見圖1。

圖1 FZD7 在肝癌組織和正常組織中的表達水平

2.2 FZD7 在肝癌不同臨床分期中的表達

隨著肝癌臨床分期增加，FZD7 表達水平不斷升高，由圖2 可知，FZD7 在肝癌Ⅳ期的表達水平最高。

圖2 FZD7 在肝癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期中的表達水平

2.3 FZD7 的預后分析

如圖3 所示，FZD7 高表達患者的生存率明顯低于FZD7 低表達患者，FZD7 表達與肝癌患者的預后成負相關（P＜0.05）。

圖3 FZD7 在肝癌患者中的預后價值

2.4 FZD7 的GO 分析與KEGG 富集分析

FZD7 的GO 分 析 結 果 顯 示，BP 主 要 富 集在extracellular matrix organization、extracellular structure organization、external encapsulating structure organization，CC 主 要 富 集 在collagen-containing extracellular matrix、fibrillar collagen trimer、banded collagen fibril，MF 主 要 富 集 在extracellular matrix structural constituent、extracellular matrix structural constituent conferring tensile strength、platelet-derived growth factor binding，KEGG 通路主要富集在Protein digestion and absorption、Wnt signaling pathway、AGE-RAGE signaling pathway，見圖4。由此可知，FZD7 基因在BP、CC、MF 功能方面主要富集在細胞外基質、細胞外膜等結構上，FZD7 基因在KEGG 通路主要富集在蛋白消化、Wnt 等轉移相關的信號通路上。

圖4 FZD7 在肝癌組織中的BP、CC、MF、KEGG富集分析結果

3 討論

肝癌是我國組織常見的一種惡性腫瘤，每年新發病例達38.8 萬人。由此可見，我國肝癌的診治形勢較為嚴峻[13-15]。肝癌的早期癥狀較為隱匿，患者不易察覺，當患者出現癥狀時往往已經發展到中晚期，晚期患者手術治療的存活率及療效均欠佳，化療藥物的效果也較為有限。因此，早期診斷及治療干預對于提高肝癌患者預后、降低疾病死亡率具有重要意義。

FZD7 是FZD 家族中唯一一個在進化過程中高度保守的成員，其在生物的生長發育過程中能夠調節人胚胎干細胞分化與自我更新，同時在腫瘤發生發展過程中存在不同表達，可能與腫瘤的惡性行為相關[16]。賀子秋等[17]研究發現，前列腺癌患者FZD7 陽性率較高，提示FZD7 可能是前列腺癌的一類早期診斷標志物。于冰等[18]的研究顯示，在三陰乳腺癌中FZD7 的表達明顯升高，且高表達的患者預后不佳。本研究結果顯示，FZD7 在肝癌組織中呈高表達，且表達水平明顯高于正常組織，隨著肝癌臨床分期的增加，FZD7 表達水平不斷升高，此結果與Merle 等[19]在乙型肝炎致癌模型中獲得的結果相似。此外，本研究結果還顯示，FZD7 高表達患者的生存率明顯低于FZD7 低表達患者，提示FZD7 可能是肝癌的一個預后生存指標。

Wnt 信號通路在腫瘤的發生發展過程中起著重要作用，可通過影響EMT 過程促進腫瘤細胞轉移[19-21]，而FZD7 作為Wnt 信號通路的一類跨膜受體，可能通過此途徑促進腫瘤惡性行為。于冰[18]等人研究發現乳腺癌患者中FZD7 差異表達最明顯，并通過Wnt 通路調節三陰乳腺癌EMT。本研究結果顯示，FZD7 基因在肝癌組織中的GO 主要富集在細胞外基質、細胞外膜等結構上，FZD7 基因在KEGG 通路主要富集在蛋白消化、Wnt 等轉移相關的信號通路上。這些結果與Vincan 等[22]在結直腸癌中的研究結果及預測的通路相似。因此，本研究推測肝癌組織中FZD7 可能通過改變細胞外膜結構促進細胞外基質分解，調節Wnt 信號通路，促進腫瘤細胞EMT 過程，加快惡性轉變及轉移進程。

綜上所述，FZD7 在肝癌組織中呈高表達，且與肝癌不良預后存在相關性，可作為肝癌預后診斷的有效指標，并可能進一步成為關鍵的治療靶點，為靶向FZD7 藥物對肝癌作用的研究提供一定的參考依據。