HPV檢測與腫瘤標志物檢測在卵巢癌診斷中的價值

朱大柱 程凌利 中國人民解放軍聯勤保障部隊第90醫院,福建省泉州市 36000; 泉州市第一人民醫院

卵巢腫瘤是一種在臨床治療中較為常見的女性生殖疾病,近年來惡性卵巢腫瘤的發病率呈逐年升高,僅次于宮體癌和宮頸癌,且其死亡率占首位[1]。卵巢位于女性盆腔的深部,缺乏行之有效的篩查方法,大部分患者首次就診已是晚期。研究[2]發現,卵巢癌Ⅰ期患者5年生存率高達90%,而卵巢癌晚期患者下降至30%,絕大多數患者錯過了治療時機。因此,早期的診斷與治療有助于提高卵巢癌患者的生存率。人類乳頭瘤病毒(HPV)可根據其致病性分為低危型和高危型兩大類。研究[3]發現,超過90%的卵巢癌患者與HPV的高危型有關。腫瘤標志物通常在正常組織中低表達或不表達,以此特性用于早期腫瘤疾病的診斷、治療及預后評估等。目前臨床出現較多的腫瘤標志物用于診斷卵巢癌,其準確性及特異性也各不相同?；诖?本研究通過HPV檢測和腫瘤標志物糖鏈抗原125(CA125)、血清人附睪蛋白4(HE4)、癌胚抗原(CEA)、糖鏈抗原199(CA199)的檢測在卵巢腫瘤患者的診斷中探究其診斷價值,報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2019年1月—2021年12月期間就診的卵巢腫瘤患者89例為研究對象,根據手術病理檢查結果按腫瘤的良惡性分為惡性組38例和良性組51例。納入標準:(1)患者臨床資料齊全者;(2)意識清晰,可配合研究者;(3)惡性組患者經病理學檢查為卵巢癌,且明確其病理組織分型;(4)患者手術前均經HPV及相關腫瘤標志物的檢測;(5)知悉本研究內容且簽署知情同意書。排除標準:(1)合并有全身感染者;(2)合并有智力、精神障礙,不能溝通者;(3)合并有嚴重的其他惡性腫瘤者;(4)哺乳或妊娠期患者;(5)合并有嚴重的心腦血管病者;(6)已放化療或手術治療的卵巢癌患者;(7)依從性差,不能配合本研究者。本研究通過我院倫理委員會審批。

1.2 方法

1.2.1 收集患者的一般資料。包括體重、年齡、糖尿病、身高、高血壓、飲酒吸煙史等。

1.2.2 血清樣本的采集。在89例患者治療前分別抽取其在空腹時的靜脈血5ml,靜置1h后經離心機以3 000r/min的速度離心,持續離心10min,并分離其上清液保存于-70℃的冰箱中備用。

1.2.3 腫瘤標志物的檢測。采用美國Abbott Architect i2000SR免疫檢測儀以化學發光免疫法對腫瘤標志物CA125、HE4、CEA、CA199、AFP指標水平進行檢測,其中以Abbott試劑檢測所選患者的血清中有關的腫瘤標準物,嚴格以本院儀器操作的SOP及試劑盒上的說明書進行操作。

1.2.4 HPV檢測。采用潮州凱普生物化學有限公司生產的試劑盒以基因擴增技術和導流雜交理論,再通過PCR-反向點雜交法檢測擴增及與包被的特異性的探針膜的雜交結果,最后以堿性磷酸酶系統進行定性檢測,同時對21種HPV的基因型分型,其中出現任一種基因型被確認為陽性就可定性為陽性。可根據HPV的基因分型的致病性進行分類,分為高危型和低危型兩大類。

1.3 觀察指標 (1)分析兩組患者的一般資料,包括患者的體重指數(BMI)、年齡、合并高血壓、吸煙飲酒史、糖尿病等;(2)對兩組患者體內的腫瘤標志物CA125、HE4、CEA、CA199、AFP進行單因素分析;(3)比較兩組患者的HPV檢測的情況;(4)對兩組患者的HPV檢測和各腫瘤標志物的單因素分析中存在明顯統計學差異的指標進行二元Logistic回歸分析,并進行受試者工作特征曲線(ROC)的繪制。

2 結果

2.1 兩組患者臨床資料比較 兩組患者的年齡、BMI、合并高血壓、糖尿病、飲酒、吸煙史等一般臨床資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。見表1。

表1 兩組患者臨床資料比較

2.2 兩組患者各腫瘤標志物指標單因素分析比較 惡性組患者的腫瘤標志物CA125、HE4、CEA、CA199指標水平比良性組患者高(P<0.05),見表2。

表2 兩組患者各腫瘤標志物指標單因素分析比較

2.3 兩組患者HPV檢測情況比較 惡性組患者的HPV檢查中高危型HPV陽性率比良性組患者高(χ2=58.234,P=0.000<0.05),其中良性組患者的HPV檢查中76.47%的患者未感染HPV,見表3。

表3 兩組患者HPV檢測情況比較[n(%)]

2.4 Logistic回歸分析結果 對兩組患者的HPV檢測和各腫瘤標志物的單因素分析中存在明顯統計學差異的指標進行二元Logistic回歸分析,CA125、CEA、CA199水平升高及高危型HPV呈陽性是卵巢癌發生的獨立危險因素(P<0.05),見表4。

表4 二元Logistic回歸分析結果

2.5 ROC分析結果 以CA125、CEA、CA199、HPV作為檢驗變量,將惡性組和良性組作為參考標準,制作ROC曲線。CA125、CEA、CA199、HPV的AUC分別為0.840、0.822、0.841、0.764,而四個指標聯合預測概率AUC為0.963,相較于每個指標均提升(P<0.01),見表5和圖1。

圖1 CA125、CEA、CA199、HPV預測卵巢癌的ROC曲線下面積

表5 各因素的ROC曲線下面積比較

3 討論

卵巢疾病是女性常見的生殖器疾病,包括卵巢癌、卵巢上皮內瘤變等。卵巢癌是一種惡性腫瘤,早期癥狀不明顯,且目前臨床上缺乏有效的早期診斷技術,其復發率及死亡率為婦科惡性腫瘤首位,嚴重威脅女性的生命健康[4]。而早期診斷對降低卵巢癌患者的死亡率具有重要意義,醫學科研者也一直致力于對早期卵巢癌診斷的研究。而腫瘤標志物發生異常通常要比影像學早[5]。因此對于不能明確診斷的早期卵巢腫瘤患者可借助腫瘤標志物提高其檢出率。

傅志勤等[6]研究發現,患者手術前CA125水平可對卵巢癌FIGO分期進行評估,也可術前協助預測患者的5年生存率。石慧等[7]研究發現,CA125與其他指標聯合檢測能提高對卵巢癌患者的診斷靈敏度,上述研究與本研究結果一致。然而,血清CA125在對卵巢癌的診斷中也存在爭議。相關研究[8-9]發現,卵巢癌晚期患者的CA125水平與陽性率均較高,但在早期卵巢癌患者檢測的CA125水平與陽性率變化不大,同時也檢測到CA125水平在良性卵巢腫瘤、子宮內膜異位癥、盆腔炎、胰腺癌、肺癌、乳腺癌中都有程度不一的升高。僅以CA125作為卵巢癌的診斷的單一腫瘤標志物進行檢測,其檢測的準確性較低。

研究[10]發現,CEA在胃腸道等相關的癌癥患者血清中水平上升明顯,可作為女性生殖器相關的惡性腫瘤的診斷中有很好的參考價值。本研究結果顯示,惡性組患者的腫瘤標志物CEA水平比良性組患者高,證明CEA對卵巢癌的診斷與評估中可作為重要的參考指標。CA199作為一種糖類蛋白在膽管、胰腺等多器官中的上皮細胞均有表達,但在健康人群中其水平較低,目前廣泛應用于診斷各種腫瘤疾病。有研究[11]發現,在卵巢癌患者的血清中CA199水平顯著升高。還有研究[12]發現,血清CA199對卵巢癌患者的診斷與分期存在一定的價值。本研究結果顯示,惡性組患者的腫瘤標志物CA199水平比良性組患者高,說明CA199可作為一種對卵巢癌診斷的腫瘤標志物。鄭紅云等[13]研究發現,卵巢癌患者的血清中CA199水平異常升高。李向榮等[14]研究發現血清CA199在卵巢癌患者的血清中呈現高表達水平,其水平與卵巢癌的疾病進展有緊密的聯系。以上研究均佐證了本研究結果。

宣飛蘭[15]研究發現,卵巢癌的發生可能與高危型HPV的感染有關。另一研究[16]發現,卵巢癌患者的預后也與高危型HPV的感染關系密切,尤其對病灶的發展及轉移的診斷有較高的價值。本研究結果顯示,惡性組患者的HPV檢查中高危型HPV陽性率比良性組患者高,說明卵巢癌的發生可能與高危型HPV的感染有關,與上述結果一致。其致癌機制可能是通過基因產物E6、E7原癌蛋白對Rb蛋白和P53(細胞周期因子),進而細胞周期調控被干擾,導致細胞由無限增殖向惡性轉化。而高危型HPV DNA跟機體細胞基因的連接位點通常緊靠細胞癌基因,因此,容易引起癌基因的表達。

本研究結果顯示,CA125、CEA、CA199、高危型HPV的AUC分別為0.840、0.822、0.841、0.764,而四個指標聯合預測概率AUC為0.963,相較于每個指標均顯著提升(P<0.01),說明CA125、CEA、CA199、高危型HPV聯合檢測有助于提高卵巢癌診斷的預測概率。此結果與郝淑琴等[17]、伍麗等[18]研究結果一致,合理選擇腫瘤標志物及指標,將其聯合檢測有利于提高對卵巢癌診斷的預測概率,為手術提供可靠的臨床依據。

綜上所述,HPV檢測與血清CA125、CEA、CA199聯合對卵巢癌的診斷價值較高,在一定程度上能提高對卵巢癌的檢出率,可作為卵巢癌早期診斷及預后評估的重要指標。由于本研究樣本量較少,有一定的數據偏倚,今后需加大樣本量的收集,以進一步驗證本研究的結果。