敗醬草粉對(duì)采精應(yīng)激公羊體況與精液品質(zhì)影響的研究

劉金輝 李 平 祖克熱古麗·蘇力坦 陳 榮＊

（1.昌吉州農(nóng)畜產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 新疆昌吉 831100；2.塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 新疆阿拉爾 843300）

我國(guó)種公羊存欄量一直不高，使用率也不高，其主要原因是公羊精液品質(zhì)得不到保障， 羊凍精技術(shù)尚不成熟。 影響精液品質(zhì)的因素很多，環(huán)境因素、飼養(yǎng)條件、品種、年齡等因素都可能影響精液品質(zhì)。 目前國(guó)內(nèi)外都在集中研究提高精液品質(zhì)的技術(shù)方法，包括生物藥物肌肉注射、激素條件藥物、保存液等方面[1]，雖然取得了較好的效果，但在實(shí)際應(yīng)用時(shí)發(fā)現(xiàn)，單純的透支性挖掘會(huì)降低公羊使用年限， 也會(huì)降低精液質(zhì)量。因此，如何在保證精子品質(zhì)的前提下培育種羊非常重要。

敗醬草為我國(guó)傳統(tǒng)中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有清熱解毒、消癰排膿、祛瘀止痛和利咽消腫之功效。 現(xiàn)代研究表明， 敗醬草含有多樣的化學(xué)成分，具有廣泛的藥理作用和臨床應(yīng)用， 有很高的藥用價(jià)值[2]。 敗醬草中含有多種有效成分，如敗酸和黃酮類化合物等，這些成分具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等作用。近年來(lái)，針對(duì)敗醬草的現(xiàn)代研究也逐漸受到關(guān)注。有研究表明，敗醬草對(duì)人體的免疫系統(tǒng)有一定的調(diào)節(jié)作用，能夠提高機(jī)體免疫力，增加免疫細(xì)胞數(shù)量。此外，敗醬草還在泌尿生殖系統(tǒng)如前列腺增生、精液不液化方面得到廣泛應(yīng)用[3]。 敗醬草還廣泛用于治療慢性疾病， 如闌尾炎、 腸炎、 婦科炎癥等[4]。 近年來(lái)，白花敗醬草在治療前列腺增生上也有良好的效果[5]。

影響公羊精液品質(zhì)的原因包括種公羊的先天因素、營(yíng)養(yǎng)因素、飼養(yǎng)管理因素、環(huán)境因素、疾病因素等，這些因素均會(huì)引起種公羊的精液品質(zhì)下降[6]。 在對(duì)種公羊進(jìn)行采集精子時(shí)， 要隨時(shí)關(guān)注采精的時(shí)間間隔，避免采精時(shí)間的無(wú)規(guī)律化，從而防止種公羊出現(xiàn)早衰現(xiàn)象[7]。 公羊采精應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致公羊采集到的精液量減少，精液品質(zhì)下降，導(dǎo)致母羊受胎率降低，生產(chǎn)水平下降，造成嚴(yán)重?fù)p失。

公羊的體況是評(píng)估羊只健康和生產(chǎn)性能的重要指標(biāo)，也是羊只管理和營(yíng)養(yǎng)調(diào)控的重要依據(jù)之一。動(dòng)物健康與飼料攝入量密切相關(guān)， 飼料攝入量是反映動(dòng)物健康狀況的重要指標(biāo)[8]。 公羊飲水量是指動(dòng)物在一定時(shí)間內(nèi)飲水的總量， 動(dòng)物體內(nèi)的新陳代謝和消化所需的水分需要通過(guò)飲水來(lái)攝入， 飲水量主要受體重、采食量及飼料含鉀量影響[9]。 飲水量的多少和體況與動(dòng)物的健康狀態(tài)、 生產(chǎn)性能和環(huán)境溫度等因素有關(guān)。

因此， 本試驗(yàn)研究敗醬草粉對(duì)種公羊體況與精液品質(zhì)的影響， 進(jìn)一步開(kāi)發(fā)其在動(dòng)物繁殖生長(zhǎng)的應(yīng)用技術(shù)，為提高我國(guó)公羊繁育力奠定一定的基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 挑選2～3 歲且精液檢測(cè)合格的健康公羊15 只， 公羊均來(lái)自吉鑫生態(tài)養(yǎng)殖基地，并且按照種公羊日常飼料配方飼養(yǎng)。

1.1.2 主要試驗(yàn)儀器 高速萬(wàn)能粉碎機(jī) （YXA-1000）購(gòu)自北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司；獸醫(yī)塑料注射器（2 mL、5 mL）購(gòu)自滄州龍之驛塑業(yè)有限公司；生物顯微鏡（BM1000）購(gòu)自深圳瑞帕特特技有限公司；蓋玻片（158105）和載玻片（10127107P-G）均購(gòu)自泰州盛創(chuàng)醫(yī)療器械有限公司；計(jì)數(shù)板（02270113號(hào)）購(gòu)自上海市求精生化試劑儀器有限公司；精子稀釋液（生理鹽水）自配；羊用采精器（SJ020）購(gòu)自北京沃爾特科牧業(yè)科技有限公司；電刺激采精器（BTSDC1）購(gòu)自河南愛(ài)牧爾之家生物科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)分組 試驗(yàn)分為五組，分別為對(duì)照組（精飼料30%、粗飼草70%，采精頻率1 次/2 d）；應(yīng)激組（精飼料30%、粗飼料70%，采精頻率1 次/d）；敗醬草粉處理1 組（精飼料30%、粗飼料67%、敗醬草粉3%，采精頻率1 次/d）；敗醬草粉處理2 組（精飼料30%、粗飼料64%、敗醬草粉6%，采精頻率1 次/d）；敗醬草粉處理3 組（精飼料30%、粗飼料58%、敗醬草粉12%，采精頻率1 次/d）。

1.2.2 敗醬草粉制備方法 將洗凈的新鮮敗醬草攪碎，放置室溫下晾干；待水分完全蒸發(fā)，將干燥的敗醬草放入研磨機(jī)中，研磨成細(xì)粉；將敗醬草粉裝入密封容器中，存放在干燥的地方即可。 需要注意的是，制作時(shí)要使用干凈的工具和容器，避免細(xì)菌污染。也可以直接購(gòu)買成品敗醬草粉來(lái)使用， 但需要注意選擇質(zhì)量可靠的產(chǎn)品。

1.2.3 公羊日糧設(shè)計(jì)方案 蛋白質(zhì)是種公羊生成精子的重要物質(zhì)來(lái)源， 日糧中蛋白質(zhì)缺乏或質(zhì)量過(guò)于低劣必然影響精液的品質(zhì)， 種公羊日糧中必須含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)[10]。公羊在采精期需要特定的日糧設(shè)計(jì)方案來(lái)保證身體的營(yíng)養(yǎng)需求，除日糧外每日可額外添加2 枚雞蛋， 有助于提高精液品質(zhì)。實(shí)行一定的飼喂計(jì)劃，保證公羊在采精期每天攝入充足的蛋白質(zhì)和能量。 公羊的日糧成分及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，其中玉米、麥麩和豆粕作為日糧中的精飼料；玉米青貯和油菜干草作為日糧中的粗飼料。

表1 日糧成分及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2.4 公羊的采食量、 飲水量和體重測(cè)定方法 公羊的采食量、飲水量和體重通過(guò)以下方法進(jìn)行測(cè)量。采食量：通過(guò)飼喂一定量的飼料或草料后，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)再次稱重飼料或草料， 用后一次稱量減去前一次稱量即可得到公羊的采食量。飲水量：通過(guò)定量給公羊飲水的方法來(lái)測(cè)量；可以使用專用的飲水器，并記錄初始水位和結(jié)束水位， 然后用結(jié)束水位減去初始水位即可得到飲水量。體重測(cè)量：用體重計(jì)進(jìn)行測(cè)量。將公羊放在稱上，記錄體重即可。需要注意的是，測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性應(yīng)該通過(guò)多次試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證，才能保證公羊的真實(shí)狀態(tài)。 同時(shí)，為了減少公羊的采精應(yīng)激和不影響正常采精， 應(yīng)盡量減少測(cè)量的次數(shù)及其影響。 每天記錄每組試驗(yàn)羊的采食量和飲水量。 每10 d 記錄一次每組試驗(yàn)羊的體重。

1.2.5 公羊精液品質(zhì)檢測(cè)方法 采精量： 精液采集后，使用2 mL 注射器測(cè)定精液量；鮮精活力：400 倍顯微鏡觀察測(cè)定；精子密度：使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板測(cè)定；精子畸形率：400 倍顯微鏡觀察測(cè)定。

1.2.6 數(shù)據(jù)分析方法 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS16.0 軟件處理，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（X±S）”表示，組間差異性比較采用單因素方差分析，P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 各組公羊的采食量、飲水量和體重 結(jié)果見(jiàn)表2。 對(duì)照組公羊采食量平均為2.67 kg/d·只，飲水量平均為6.67 L/d·只，體重平均為44.57 kg/只。 與對(duì)照組相比，應(yīng)激組采食量和飲水量均下降，但差異不顯著（P＞0.05）；敗醬草粉處理組采食量和飲水量均上升，但差異不顯著（P＞0.05）；與對(duì)照組相比，應(yīng)激組體重降低，差異不顯著（P＞0.05）。 與應(yīng)激組相比，敗醬草粉處理1 組體重上升但差異不顯著 （P＞0.05），敗醬草粉處理2 組體重顯著上升（P＜0.05），敗醬草處理3 組體重極顯著上升（P＜0.01）。

表2 各組公羊的采食量、飲水量和體重

2.2 敗醬草粉對(duì)公羊采精量的影響 由表3 可知，在11～20 d 和21～30 d 試驗(yàn)期間， 應(yīng)激組高頻采精應(yīng)激導(dǎo)致公羊精液量與對(duì)照組相比極顯著下降（P＜0.01），且在兩個(gè)時(shí)間段分別下降20%和32%；敗醬草粉處理1 組與對(duì)照組相比升高9%和18%， 但差異不顯著（P＞0.05）；敗醬草粉處理2 組在兩個(gè)時(shí)間段與對(duì)照組相比升高18%和24%，且差異顯著（P＜0.05）；敗醬草粉處理3 組在兩個(gè)時(shí)間段與對(duì)照組相比分別升高28%、37%，且差異極顯著（P＜0.01）。

表3 敗醬草粉對(duì)公羊采精量的影響結(jié)果

2.3 敗醬草粉對(duì)公羊精子活力的影響 由表4 可知，在11～20 d 和21～30 d 試驗(yàn)期間，應(yīng)激組高頻采精應(yīng)激導(dǎo)致公羊精液活力與對(duì)照組相比明顯下降，且在兩個(gè)時(shí)間段分別下降2.43%、5.83%， 差異顯著（P＜0.05）； 敗醬草粉處理1 組與對(duì)照組相比有略微升高，分別為0.56%、0.92%，差異不顯著（P＞0.05）；敗醬草粉處理2 組在兩個(gè)時(shí)間段與對(duì)照組相比升高1.26%、3.6%，差異不顯著（P＞0.05）；敗醬草粉處理3 組在兩個(gè)時(shí)間段與對(duì)照組相比分別升高4.12%、4.44%，差異顯著（P＜0.05）。

表4 敗醬草粉對(duì)公羊精子活力的影響

2.4 敗醬草粉對(duì)公羊精子密度的影響 由表5 可知，在11～20 d 和21～30 d 試驗(yàn)期間，應(yīng)激組高頻采精應(yīng)激導(dǎo)致公羊精液密度與對(duì)照組相比極顯著下降（P＜0.01）， 且在兩個(gè)時(shí)間段分別下降14%、23%；敗醬草粉處理1 組與對(duì)照組相比分別升高12.5%、16.5%，差異極顯著（P＜0.01）；敗醬草粉處理2 組在兩個(gè)時(shí)間段與對(duì)照組相比分別升高24%、27%，差異極顯著（P＜0.01）；敗醬草粉處理3 組在兩個(gè)時(shí)間段與對(duì)照組相比分別升高32%、36%，差異極顯著（P＜0.01）。

表5 敗醬草粉對(duì)公羊精子密度的影響

2.5 敗醬草粉對(duì)公羊精子畸形率的影響 由表6可知，在11～20 d 和21～30 d 試驗(yàn)期間，應(yīng)激組高頻采精應(yīng)激導(dǎo)致公羊精畸形率與對(duì)照組相比明顯升高，分別為25%、40%，差異極顯著（P＜0.01）；敗醬草粉處理1 組與對(duì)照組相比精子畸形率下降， 但差異不顯著（P＞0.05）；敗醬草粉處理2 組在兩個(gè)時(shí)間段與對(duì)照組相比精子畸形率分別降低5.6%、9.3%，差異顯著（P＜0.05）；敗醬草粉處理3 組在兩個(gè)時(shí)間段與對(duì)照組相比精子畸形率分別降低7.1%、13%，差異極顯著（P＜0.01）。

表6 敗醬草粉對(duì)公羊精子畸形率的影響

3 討 論

試驗(yàn)表明， 使用不同劑量的敗醬草粉混合飼料后，公羊的采食量有不同程度增加。 其中，低劑量組的采食量增加， 每只羊每天相應(yīng)多吃了90 g 飼料；中劑量組每只羊每天相應(yīng)多吃了190 g 飼料； 高劑量組每只羊每天相應(yīng)多吃了320 g 飼料。 需要注意的是，過(guò)度喂養(yǎng)敗醬草粉可能會(huì)導(dǎo)致公羊采食過(guò)量、消化不良等問(wèn)題，因此，建議在實(shí)際應(yīng)用中根據(jù)公羊品種、體重和飼養(yǎng)環(huán)境等因素綜合考慮，避免采食過(guò)多影響健康。研究結(jié)果表明，公羊飲水量與敗醬草粉無(wú)關(guān)。 無(wú)論是在低劑量組、中劑量組還是高劑量組，公羊的飲水量均沒(méi)有明顯變化， 符合公羊日常飲水量的范圍。使用不同劑量的敗醬草粉混合飼料后，公羊的體重增加速度均有所提高，而且劑量越大，體重增加速度越快， 其中高劑量組公羊體重增加速度最快。康琛喆等[11]研究表明，敗醬草多糖對(duì)小鼠體重有一定影響。 總體來(lái)說(shuō)，敗醬草粉對(duì)公羊的采食量、飲水量和體重有一定影響。 每只公羊每天的食量和劑量應(yīng)根據(jù)公羊品種、 體重、 飼養(yǎng)環(huán)境等因素綜合考慮，確保公羊獲得足夠的營(yíng)養(yǎng)攝入，保持健康成長(zhǎng)。

試驗(yàn)結(jié)果表明， 與對(duì)照組相比高頻采精應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致公羊精液品質(zhì)各項(xiàng)指標(biāo)均下降； 使用敗醬草粉飼料后，公羊的精液質(zhì)量有所提高。 具體來(lái)說(shuō)，使用敗醬草粉飼料的公羊精子密度有所增加， 形態(tài)和活力也有所改善， 精液總量和精子質(zhì)量均有一定程度提高。這是因?yàn)閿♂u草粉中富含敗醬草多糖，具有很強(qiáng)的抗氧化活性和潛在的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值[12-13]，可以提高公羊的精子質(zhì)量。使用敗醬草粉飼料后，試驗(yàn)中高劑量組公羊的精子形態(tài)、 活力等指標(biāo)最大程度上得到了改善。胡孌倩等[14]研究表明，敗醬草和紅藤對(duì)生殖道的各種炎癥也有一定效果， 并且敗醬草粉的有效成分能改善血液循環(huán)和調(diào)節(jié)免疫功能[15]，對(duì)公羊精子形態(tài)和活力產(chǎn)生了積極的影響。 值得注意的是，以上研究結(jié)果都是基于試驗(yàn)條件下得出的，對(duì)于不同品種、年齡、季節(jié)、飼養(yǎng)環(huán)境等因素，可能會(huì)有不同的影響。因此，牧場(chǎng)在使用敗醬草粉時(shí)應(yīng)該綜合考慮，根據(jù)實(shí)際情況靈活調(diào)整使用劑量，確保公羊精液品質(zhì)的穩(wěn)定提高。

本研究發(fā)現(xiàn)在公羊日糧中添加12%敗醬草粉能夠增強(qiáng)公羊采食量和飲水量， 明顯緩解采精刺激應(yīng)激，提高精液品質(zhì)，并對(duì)敗醬草粉的的添加量有劑量依賴性。