微柱凝膠技術(shù)在新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗價值

王梅娟

（遼寧省北票市中心醫(yī)院臨床輸血科，遼寧 北票 122100）

新生兒溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）指的是因母子血型不合，母親體內(nèi)產(chǎn)生了與胎兒血型抗原不相匹配的抗體，此種血型抗體進入胎兒以后，可引發(fā)同族免疫性溶血，常見新生兒溶血病情況有ABO血型系統(tǒng)溶血以及Rh血型系統(tǒng)溶血兩種情況[1]。溶血病新生兒的主要臨床癥狀是手足徐動、貧血、黃疸等，若患兒未及時接受治療，可對運動發(fā)育和智力發(fā)育造成影響，嚴重時還可危及生命安全。對于新生兒溶血病的治療，主要原則是預(yù)防心力衰竭和膽紅素腦病，糾正貧血，降低血清膽紅素。此外，臨床還應(yīng)積極進行診斷，加強對于危險孕產(chǎn)婦的管理，以提高新生兒生命質(zhì)量。目前我國對于新生兒輸血尚缺乏詳細的策略，部分臨床醫(yī)師對于新生兒溶血病實施輸血時，同類型輸血和符合血型的輸血檢測是常見的輸血原則。根據(jù)國際規(guī)定，新生兒輸血時需全面、充分考慮是否存在溶血病，提前篩查血清內(nèi)是否有母體抗體A或者是抗體B，主要的篩查方式為交叉配血。因而保證科學(xué)的輸血前檢驗，尤其是選擇更為合理、準確的交叉配血，可充分保證輸血的安全性。新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗方式中，微柱凝膠法（MGT）與微孔板凝聚胺法（MPT）是目前國內(nèi)外常用的方式，為進一步探討微柱凝膠技術(shù)對于新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗價值，本文特以我院收治的47例溶血病新生兒進行研究，報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇我院兒科2018年2月至2020年2月收治的47例新生兒溶血病患兒作為研究對象，均給予輸血治療，并接受MPT和MGT檢驗。本研究獲得本院醫(yī)院倫理委員會批準。

納入標準：①診斷符合新生兒溶血病，需給予輸血治療。②患兒家長簽署知情同意書。③患兒無藥物過敏情況。④無其他血液系統(tǒng)疾病。

排除標準：①存在意識障礙、精神病家族史患兒。②傳染性疾病患兒。③先天性心臟病。④免疫及循環(huán)系統(tǒng)疾病。⑤合并心肝腎等重要器官疾病。

1.2 方法 47例患兒均采取MGT和試管法（血型鑒定的金標準）來鑒定血型，并均采用MGT、MPT進行交叉配血。所用儀器包括FYQ型免疫微柱孵育器、TD-A血清學(xué)離心機以及試劑。

血型鑒定：①MGT。對血標本離心處理后分別取6支凝膠微管，每個滴入紅細胞懸液（5%），于其中2支中滴血血清和已知的A、B型紅細胞懸液（5%），以3 000 r/min進行離心處理，時間為5 min，觀察結(jié)果。②試管法。以《全國臨床檢驗操作流程》對血標本實施離心處理后對反定結(jié)果進行觀察，實施陰性排除冷凝集[2]。

交叉配血：①MGT。對全部血清進行離心處理，取2支凝膠微管并標記為主側(cè)和次側(cè)，制作紅細胞懸液（0.5%～1.0%），將50 μL輸血標本和50 μL的供血標本紅細胞懸液分別加入主側(cè)和次側(cè)凝膠微管中，主次側(cè)加入患者及獻血者血漿各50 μL，置于37 ℃中進行孵育，時間為15 min，以3 000 r/min離心處理，時間為5 min，觀察結(jié)果[3]。②MPT。對全部血清進行離心處理，取2支凝膠微管并標記為主側(cè)和次側(cè)，制作紅細胞懸液（3%～5%），在主側(cè)凝膠微管中加入1滴供血標本和1滴輸血標本，后分別加入0.6 mL的低離子介質(zhì)溶液，均勻混合后放置1 min，繼續(xù)加入2滴凝聚胺溶液后放置15 s，以3 000 r/min離心處理，時間為1 min，在管底中取0.1 mL的凝集液體，加入2滴重懸液后觀察結(jié)果[4]。

1.3 觀察指標 比較MGT、試管法對血型正反定型的不符合率；比較MGT、MPT的交叉配血不合格率。

1.4 判定標準 MGT交叉配血的判定標準為：在凝膠管底部有紅細胞沉積情況，上清液呈正常血清顏色視為匹配；在凝膠管的上面或者中間存在紅細胞凝集情況，上清液呈紅色即有溶血現(xiàn)象，視為不匹配。

MPT交叉配血的判定標準為：凝聚胺引發(fā)的非免疫性凝集在1 min內(nèi)散開，視為匹配；若凝集不散，則為存在異體抗體引發(fā)的免疫性凝集，視為不匹配。試驗結(jié)果均在3 min內(nèi)進行判斷[5]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 將SPSS 22.0作為本研究的數(shù)據(jù)處理軟件，計數(shù)資料以率（%）表示，兩組間比較用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 在4 7 例患兒中，男患兒2 6 例（55.32%）；日齡為1～22 d，平均日齡（11.62±2.58）d；體質(zhì)量為2.5～4.4 kg，平均（3.45±0.34）kg。

2.2 MGT、試管法對血型正反定型結(jié)果分析 經(jīng)檢驗發(fā)現(xiàn)，MGT、試管法對血型正反定型的不符合率均較低[1（2.13%）vs.2（4.26%），P=0.557]，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

2.3 MGT、MPT的交叉配血結(jié)果分析 交叉配血結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，MGT的交叉配血不合格率低于MPT[1（2.13%）vs.7（14.89%），P=0.027]，存在統(tǒng)計學(xué)差異。

3 討論

新生兒溶血病發(fā)病原因主要是紅細胞抗原與血型抗體結(jié)合而引起的免疫性溶血反應(yīng)，孕母體內(nèi)產(chǎn)生了針對父源的血型特異性抗體，這種抗體能夠通過胎盤進入胎兒體內(nèi)與紅細胞結(jié)合，通過免疫細胞介導(dǎo)的細胞毒作用導(dǎo)致胎兒紅細胞溶血[5]。IgG型抗體是唯一能夠通過胎盤屏障的抗體，臨床檢測確診需要測定致敏紅細胞和血型抗體，常見的有抗體釋放試驗、游離抗體試驗、抗人球蛋白試驗[6]。新生兒溶血病患兒主要表現(xiàn)為水腫、貧血、黃疸等，若未及時接受干預(yù)，疾病發(fā)展可造成繼發(fā)膽紅素腦病，威脅生命[7-8]。因此，對患兒實施早期評估和治療，對于改善預(yù)后具有積極意義。對于新生兒溶血病患兒的治療，主要方式為輸血治療，因而需加強臨床檢驗工作，及時發(fā)現(xiàn)不合理情況[9]。實施輸血前，應(yīng)對患兒體內(nèi)是否存在母體抗體進行檢驗，以免發(fā)生溶血反應(yīng)，保證輸血安全[10]。

MGT和MPT均是檢驗新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗方式，本研究結(jié)果顯示，MGT、試管法正反定型的不符合率分別是2.13%、4.26%，結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異。MGT、MPT的交叉配血的不合格率分別是2.13%、14.89%，差異存在統(tǒng)計學(xué)意義，結(jié)果表明MGT的檢驗價值優(yōu)于MPT。MPT是一種利用凝聚胺的正電荷，中和紅細胞表面帶有的負電荷，促使紅細胞發(fā)生非特異性的凝聚反應(yīng)，最后加入懸浮液，中和凝聚胺的作用，使聚集的紅細胞散開，試驗結(jié)果則為隱形；但如果紅細胞被相應(yīng)抗體致敏，則發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，就會凝集不散，則試驗結(jié)果為陽性，配血結(jié)果不相合[11-12]。MPT用于不完全抗體的測定與鑒定以及交叉配血等血清學(xué)試驗已在國內(nèi)迅速推廣使用。該方法簡便、時間短、結(jié)果明顯但漏診率和假陽性率較高[13]。MGT在一些先進國家已成為常規(guī)的紅細胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)，具有較強的特異性和較高的靈敏度，主要應(yīng)用在輸血前的篩查[14]。MGT指的是將與血清學(xué)標準相符合的稀釋液制成凝膠取微管柱進行灌注，凝膠顆粒分子可對紅細胞進行過濾，同時還可保留凝集紅細胞，以確定反應(yīng)結(jié)果[15-16]。MGT的檢驗結(jié)果可通過肉眼進行觀察，無須借助顯微鏡，且檢驗的準確性較高，基本不存在假陽性率[7]。但是MGT的不足之處就是檢驗的時間較長，并不能夠滿足急診配血的要求，無法分辨出紅細胞中的不完全抗體，但是相較于MPT而言，MGT的時間更短、操作更為簡便，可省略紅細胞洗滌步驟，因此價值更優(yōu)[18-19]。既往研究發(fā)現(xiàn)，新生兒輸血可考慮以下幾點：①在新生兒需要接受輸血治療前，若患兒同時存在黃疸、貧血等情況，需進一步實施輸血前檢驗，明確是否存在ABO溶血癥，同時也可明確患兒血型，保證相容性輸血[20]。②對于無條件篩查確診ABO溶血病的情況下，需詳細考慮ABO血型抗原表達情況[21]。③若診斷新生兒溶血病結(jié)果為陽性，但是交叉配血中為陰性，可能與溶血癥檢測中檢測酶處理細胞過程中提高了抗體的吸收能力有關(guān)，從而增加了陽性可能性，同時也可能是因為交叉配血采用的血液樣本來自于成年人，兩種血液的細胞方面存在一定的差異，可導(dǎo)致配血結(jié)果與溶血性抗原抗體反應(yīng)結(jié)果不相符[22-23]。

綜上所述，無論是輸血室人員或是新生兒科室臨床醫(yī)師在對患兒進行輸血時，應(yīng)充分、全面考慮患兒的免疫血液學(xué)特點和生理特點，完善輸血前檢驗工作，充分保證輸血的安全性。通過實施輸血前檢驗，可避免盲目按照ABO同型血進行輸血，進而有效提高了新生兒溶血病患兒的輸血安全。研究發(fā)現(xiàn)，在新生兒溶血病患兒輸血前實施微柱凝膠技術(shù)進行檢驗，可準確地判斷患兒血型，有效發(fā)現(xiàn)交叉配血不合格情況，從而保證輸血安全性，可在臨床進行推廣。