禽組織滴蟲病研究進(jìn)展和防治措施

文│李小倫（山東省博興縣畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心）

組織滴蟲病又被稱為傳染性斑疹傷寒、傳染性腸肝炎和黑頭病，于1893年首次被描述為火雞的一種致命疾病，1901年確認(rèn)雞也會(huì)感染這種疾病，如今該病主要發(fā)生在火雞、散養(yǎng)蛋雞和肉雞種雞中。黑頭病是一種誤稱，因?yàn)榘l(fā)紺的頭部既不具有病理特征，也不常見。由于有效的藥物治療在20世紀(jì)中葉開始施用，使得該病一度消失，但后來(lái)由于這類用于預(yù)防和治療的藥物被停用，導(dǎo)致近年來(lái)該病再次出現(xiàn)。盡管雞、雉雞和孔雀等其他雞科鳥類也可能受到感染，但火雞尤其容易感染組織滴蟲病。據(jù)估計(jì)，火雞群感染后的死亡率由小于10%到全群死亡不等，火雞養(yǎng)殖業(yè)每年因該病造成的經(jīng)濟(jì)損失超過200萬(wàn)美元，2020年的一項(xiàng)調(diào)研將其列為火雞產(chǎn)業(yè)當(dāng)前面臨的重大問題。雞感染后死亡率上升，蛋雞產(chǎn)蛋量下降高達(dá)30%蛋殼質(zhì)量下降，雞感染引起較輕的臨床癥狀和較低的死亡率，但很多研究者認(rèn)為該疾病至少與球蟲病一樣嚴(yán)重。臨床癥狀包括無(wú)精打采、翅膀下垂和眼睛緊閉，死后剖檢發(fā)現(xiàn)盲腸和肝的嚴(yán)重炎癥。不同品種的家禽單獨(dú)飼養(yǎng)至關(guān)重要，因?yàn)殡u被認(rèn)為對(duì)組織滴蟲病具有部分抵抗力，經(jīng)常作為寄生蟲宿主和無(wú)癥狀攜帶者。

一、病原學(xué)和發(fā)病機(jī)理

組織滴蟲是一種單細(xì)胞寄生蟲，屬于Parabasalia門Tritrichomonadea綱Tritrichomonadida目Dientamoebidae科。根據(jù)盲腸或肝內(nèi)的位置，寄生蟲形態(tài)可能會(huì)發(fā)生變化，平均組織單體大小為10～14微米。通常在盲腸管腔內(nèi)表現(xiàn)出單鞭毛形式，但這種鞭毛在入侵黏膜時(shí)隨著假足的發(fā)育而喪失。由此可將組織滴蟲分為有鞭毛的盲腸管腔型和無(wú)鞭毛的組織型，盲腸管腔型在盲腸內(nèi)繁殖，可以在體外分離后的液體培養(yǎng)基中觀察到，形狀為圓形或變形蟲狀，組織型位于宿主器官的細(xì)胞間。Histomonas wenrichi是一種非致病性的物種，體積更大，為20～30微米。組織滴蟲通過二元裂變繁殖，由于缺乏線粒體，依靠氫化酶體作為修飾的細(xì)胞器進(jìn)行能量代謝。體外實(shí)驗(yàn)表明，組織滴蟲可以在36.5～37℃的溫度下生長(zhǎng)，但在18～22℃條件下48小時(shí)以上或5℃條件下超過24小時(shí)不能生長(zhǎng)，這表明從受感染的禽類中脫落的原生動(dòng)物難以在環(huán)境中存活。組織滴蟲在非氯化水和糞便中可存活9小時(shí)，在羽毛和飼料等材料上可存活6小時(shí)，組織滴蟲在未經(jīng)保護(hù)的情況下進(jìn)入環(huán)境時(shí)是脆弱的。如果在禽類死亡后不久裝運(yùn)到實(shí)驗(yàn)室，且溫度保持在30℃以上，則可從受感染的尸體特別是盲腸樣本中培養(yǎng)出現(xiàn)場(chǎng)分離的組織滴蟲。

發(fā)病機(jī)理始于盲腸寄生蟲的定植，導(dǎo)致嚴(yán)重的炎癥和壞死，腸道組織被破壞后，寄生蟲可滲透到肝門靜脈血管，并通過肝門靜脈血到達(dá)肝，由此產(chǎn)生的病變表現(xiàn)為靶樣肝病變和干酪樣盲腸，在最后階段，當(dāng)寄生蟲擴(kuò)散到宿主的各個(gè)器官時(shí)，疾病可能發(fā)展為全身性的。組織滴蟲也被證明可以感染大腦、胰腺、心臟、肺、腎和脾。雖然火雞經(jīng)常出現(xiàn)明顯的肝損傷，但在雞中卻不太明顯，甚至不存在。剖檢后肉眼可見盲腸壁增厚、黏膜出血和盲腸腔內(nèi)纖維團(tuán)塊，肝的變化表現(xiàn)為圓形局部性壞死，壞死區(qū)域大小不一。這種病變?cè)诨痣u和雞身上都可以看到，盡管它們病理變化的嚴(yán)重程度有所不同。顯微鏡下，炎癥的特征是混合的白細(xì)胞浸潤(rùn)和壞死。通常，雞組織滴蟲病與以輸卵管炎和腹膜炎為特征的大腸桿菌感染一起出現(xiàn)。因此，建議在大腸桿菌病的情況下，特別關(guān)注盲腸，對(duì)盲腸進(jìn)行全面的死后調(diào)查。

與火雞相比，雞的泄殖腔傳播在組織滴蟲病的傳播中沒那么重要，因?yàn)樵跊]有載體的情況下不會(huì)發(fā)生水平傳播，并且不會(huì)因Eimeria adenoeides攻擊而加劇，因?yàn)檫@種艾美耳球蟲屬是火雞特有的。盡管泄殖腔和飲水接觸在雞和火雞中是一種常見的現(xiàn)象，但水平傳播的物種差異可能是由于火雞比雞的窩料濕度更高和更多的蜷縮行為導(dǎo)致的，這使得在沒有媒介物的情況下，組織滴蟲的存活率和隨后的傳播率更高。同時(shí)飼養(yǎng)火雞和肉雞的有機(jī)農(nóng)場(chǎng)中肉雞和火雞的死亡率分別高達(dá)67.2%和100%，可能是由于都感染了艾美耳球蟲。同時(shí)感染Eimeria tenella可加重肉雞病情的發(fā)展，特別是增加肝病變，組織學(xué)觀察可用于區(qū)分組織滴蟲病和球蟲病。在雞中，品種、性別差異和環(huán)境不同影響了腸道結(jié)構(gòu)和功能，因此這些差異可能會(huì)影響組織滴蟲病的發(fā)病率和嚴(yán)重程度。在火雞中，無(wú)論品系、年齡、性別或感染強(qiáng)度如何，組織滴蟲在火雞中導(dǎo)致相似的死亡率和病理，組織滴蟲在感染火雞兩周即可達(dá)到100%的死亡率。

二、防治

最早有效地用于預(yù)防和治療組織滴蟲病的藥物是砷化合物，干擾DNA修復(fù)過程和細(xì)胞能量代謝。幾種三價(jià)砷化合物（包括亞砷酸、氨基苯胂酸鈉、新胂凡納明和錐蟲胂胺）被用作抗組織滴蟲病的藥物，與三價(jià)砷化合物相比，五價(jià)砷化合物如4-硝基苯基胂酸、4-氨基苯基胂酸和3-硝基苯基胂酸對(duì)家禽的毒性更小，其中4-氨基苯基胂酸防治效果最好。硝基咪唑化合物（包括二甲基咪唑、甲硝唑、氯醇硝唑和磺甲硝咪唑）在體外有效，濃度為≥10微克/毫升，在飼料中的體內(nèi)濃度為200ppm，但過量則有毒。其中二甲基咪唑?qū)χ委熾u和火雞組織滴蟲病非常有效，給藥后3天火雞可快速代謝，無(wú)檢測(cè)水平的組織殘留（＜0.02ppm）。在飼料中使用0.05%的2-乙酰氨基-5-硝基噻唑，可有效預(yù)防組織滴蟲病，藥物用量與火雞的平均體重成正比。1-乙基-3-（5-硝基-2-噻唑基）尿素在感染后3天給藥，對(duì)火雞是一種有效的治療方法，且毒性更小。苯并咪唑類化合物如阿苯達(dá)唑和芬苯達(dá)唑在預(yù)防性治療時(shí)在體內(nèi)有效，其作用機(jī)制可歸因于寄生在盲腸腔中的組織滴蟲幼蟲的損傷，或者苯并咪唑類的驅(qū)蟲作用降低了組織滴蟲和其他寄生蟲混合感染家禽的風(fēng)險(xiǎn)。8-羥基喹啉復(fù)合物基于作為轉(zhuǎn)錄抑制劑的功能表現(xiàn)出防腐、消毒和殺蟲劑性質(zhì)，體外研究表明，加入8-羥基喹啉復(fù)合物可抑制組織滴蟲的生長(zhǎng)。但雞能感知到喹啉的苦味，喹啉在飼料中的添加量不能超過0.2%，但火雞的閾值水平尚未確定。基于螯合金屬離子（如鋅）的作用，二乙基二硫代氨基甲酸鹽能夠抑制超氧化物歧化酶和金屬蛋白酶等酶，有可能治療組織滴蟲病。在雞和火雞飼料中使用硝呋腙作為飼料添加劑時(shí)具有預(yù)防作用，但沒有觀察到相關(guān)化合物的治療效果。泰妙菌素在體外實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了其抗組織滴蟲作用，然而，與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果并不一致。卡巴多司導(dǎo)致細(xì)菌DNA突變，在體外顯示可抑制組織滴蟲的生長(zhǎng)，然而，由于組織滴蟲的繁殖強(qiáng)烈依賴于細(xì)菌的存在，因此需要進(jìn)一步研究抑制作用是直接針對(duì)組織滴蟲還是僅針對(duì)細(xì)菌。

有效的抗組織鞭毛蟲藥物緩解了疾病的暴發(fā)，但在歐盟和美國(guó)從家禽養(yǎng)殖中去除了有效藥物和飼料添加劑后，由于缺乏治療而導(dǎo)致疾病再次出現(xiàn)。硝基咪唑和硝基呋喃分別于1987年和1991年在美國(guó)被禁用。硝苯胂酸是組織滴蟲病的最后一種預(yù)防性藥物，2015年因公眾致癌擔(dān)憂而退出美國(guó)市場(chǎng)，而且該藥物的持續(xù)使用可能會(huì)對(duì)鳥類的產(chǎn)蛋量和生長(zhǎng)速度有不利影響。硼酸、脫氧膽酸、氯酸鈉和硝酸鈉是少數(shù)的化學(xué)預(yù)防候選藥物，體外評(píng)估顯示出顯著的抗組織鞭毛蟲特性，但在體內(nèi)沒有表現(xiàn)出有效的預(yù)防作用。組織滴蟲在體外和體內(nèi)對(duì)候選化合物的敏感性各不相同使問題更加復(fù)雜化。實(shí)驗(yàn)研究表明，在預(yù)防性使用氨基糖苷類抗生素帕羅霉素（paromomycin）時(shí)，可有效地將組織滴蟲病造成的損失降至最低，在飼料中加入200ppm和400ppm的帕羅霉素減少了排泄物中組織滴蟲的數(shù)量，同時(shí)減少了與組織滴蟲病相關(guān)的死亡率。但它與當(dāng)前減少飼料中抗菌素的趨勢(shì)相矛盾，而且帕羅霉素僅限于預(yù)防性而非治療性。硫酸帕羅霉素正被進(jìn)一步評(píng)估為飼料中或水中給藥的預(yù)防性化合物。

在缺乏經(jīng)批準(zhǔn)的有效的組織滴蟲病藥物或疫苗的情況下，疾病預(yù)防的主要措施是盡量減少家禽與組織滴蟲的接觸。防止蛔蟲和輔助宿主如蚯蚓和擬步甲蟲，將有助于減少組織滴蟲病的發(fā)病率，因?yàn)槿绻M織滴蟲不受保護(hù)地直接排入環(huán)境中，就無(wú)法長(zhǎng)時(shí)間存活。控制嚙齒動(dòng)物、昆蟲或污染垃圾等媒介物對(duì)減少潛在感染至關(guān)重要。迅速清除受感染的家禽嚴(yán)禁隨意重新分群、控制家禽跨群流動(dòng)是防止快速水平傳播的重要控制策略。定期寄生蟲檢查和定期實(shí)施驅(qū)蟲程序?qū)p少蛔蟲和組織滴蟲非常重要，建議使用對(duì)蟲卵有效的物質(zhì)進(jìn)行清潔和消毒，如含有過乙酸的消毒劑。飼料質(zhì)量和飲用水清潔也很重要，當(dāng)飲用水衛(wèi)生條件較差時(shí)，死亡率往往很高。然而，不需要更多的研究數(shù)據(jù)來(lái)證明組織滴蟲進(jìn)入家禽群的可能途徑，由此進(jìn)一步確定防治或限制感染的措施。

一些植物提取物被研究發(fā)現(xiàn)可以防治組織滴蟲病。植物精油，測(cè)試了從肉桂、檸檬、迷迭香、大蒜和百里香等不同植物中提取的精油作為抗組織滴蟲病藥物的潛力，當(dāng)添加到組織滴蟲的體外培養(yǎng)物中時(shí)，這些植物精油能夠抑制寄生蟲的生長(zhǎng)，不過結(jié)果非常矛盾，從預(yù)防性作用到無(wú)效。乙醇和水提取物，對(duì)來(lái)自不同植物（如百里香、葡萄、木樨、駱駝蓬、銀杏和歐洲七葉樹）的乙醇和水提取物的測(cè)試表明在預(yù)防組織滴蟲感染方面沒有任何明顯的效果。生物堿和倍半萜內(nèi)酯，在體外研究中，使用了從植物苦瓜中提取的生物堿哈曼烷、哈曼烷、哈曼烷以及甾體甙生物堿皂苷，證明了這些物質(zhì)對(duì)組織滴蟲的生長(zhǎng)速度的有抑制作用。抗瘧植物及化合物，如草本青蒿和青蒿提取物，已經(jīng)在體外對(duì)組織滴蟲病進(jìn)行了測(cè)試，但成效有限，但在體內(nèi)測(cè)試時(shí)，對(duì)家禽沒有任何保護(hù)作用。

組織滴蟲病疫苗的接種嘗試在受控的實(shí)驗(yàn)條件下取得了一些成功，但尚未開發(fā)出可用于研究工作的疫苗。