探討微生物檢驗(yàn)中細(xì)菌培養(yǎng)、涂片鏡檢的診斷價(jià)值

信統(tǒng)艷

鄒平市疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科，山東鄒平 256200

近些年受到社會(huì)整體環(huán)境的影響，我國(guó)感染類(lèi)疾病患者的基數(shù)持續(xù)攀升，而感染疾病患者的感染類(lèi)型不同，治療方案也不同；若沒(méi)有明確患者的病原菌類(lèi)型便行抗感染治療，不僅無(wú)法取得理想的治療效果，甚至?xí)?dǎo)致患者病情進(jìn)一步惡化，給患者的生命安全預(yù)埋隱患[1]。此外，臨床現(xiàn)階段的感染疾病多以抗生素進(jìn)行治療，抗生素濫用是普遍存在的問(wèn)題，也在一定程度上增加了感染疾病發(fā)生、發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn)[2]。由此可見(jiàn)，為了有效提升細(xì)菌的抗生素敏感性，增加感染疾病的臨床治療有效率，在患者治療前通過(guò)微生物檢驗(yàn)鑒別病原菌類(lèi)型，并以此為依據(jù)指導(dǎo)用藥，對(duì)患者的治療及預(yù)后意義重大[3]。微生物檢查的常用技術(shù)為涂片鏡檢，即細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本后涂片檢查，不過(guò)細(xì)菌培養(yǎng)需要一定的時(shí)間，完成細(xì)菌培養(yǎng)后再行涂片檢查可能導(dǎo)致患者病情進(jìn)一步發(fā)展，延誤治療時(shí)機(jī)。有學(xué)者研究指出，原始標(biāo)本涂片檢查結(jié)果、細(xì)菌培養(yǎng)后檢查結(jié)果具有較高的一致性，可直接對(duì)原始標(biāo)本行涂片檢查[4]。本文選取2021 年1 月—2023 年1 月間鄒平市疾病預(yù)防控制中心收檢的200 例標(biāo)本作為本次研究對(duì)象，為探討不同檢查方法在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值展開(kāi)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將本中心檢驗(yàn)科收檢的200 例標(biāo)本設(shè)為研究對(duì)象，包括痰液標(biāo)本57 例、尿液標(biāo)本58 例、膿液標(biāo)本46 例、胸腹水標(biāo)本39 例。

1.2 方法

涂片鏡檢法：壓片法標(biāo)本制作，常規(guī)涂片，以無(wú)菌消毒棉簽將原始標(biāo)本置入生理鹽水中，充分混合二者后以酒精燈進(jìn)行加熱處理，繼而自然風(fēng)干涂片；抗酸染色、革蘭染色后鏡檢，單個(gè)涂片觀(guān)察視野為10 個(gè)，記錄結(jié)果。

細(xì)菌培養(yǎng)+涂片鏡檢法：于血平板、沙氏平板性畫(huà)線(xiàn)接種操作，35℃、5%～10%CO2培養(yǎng)18～72 h，分別使用蛋白胨水、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液、革蘭氏陰性菌增菌液、肉湯溶解、復(fù)蘇凍干菌種，培養(yǎng)環(huán)境恒定為37℃，時(shí)間控制在24～120 h，菌種渾濁生長(zhǎng)并存在菌膜可停止[5]。

鑒定方法：VITEK 2 Compact 系統(tǒng)鑒定標(biāo)本內(nèi)的微生物、優(yōu)勢(shì)菌落、致病菌，微生物鑒定過(guò)程中可重點(diǎn)篩選涂片鏡檢中的病原菌；檢驗(yàn)用具均產(chǎn)自珠海貝索生物技術(shù)有限公司，ATB 微生物檢定儀、配套板條則產(chǎn)自發(fā)過(guò)生物梅里埃公司。

精密度驗(yàn)證法：制備致病菌的菌懸液，濃度設(shè)定為可進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)度數(shù)的最高值，系列稀釋為10 cfu/min 以下，單個(gè)致病菌使用的菌懸液至少為5 種濃度，且每種濃度檢驗(yàn)頻次至少為10 次[6]。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

以精密度驗(yàn)證法為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)比單一的涂片鏡檢、涂片鏡檢聯(lián)合細(xì)菌培養(yǎng)在不同標(biāo)本的微生物檢出陽(yáng)性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

本次研究過(guò)程中由SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件全程負(fù)責(zé)對(duì)觀(guān)察指標(biāo)的采集、統(tǒng)計(jì)，對(duì)于計(jì)數(shù)資料，以例數(shù)（n）和率（%）表示，組間比較進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 微生物檢驗(yàn)結(jié)果分析

精密度驗(yàn)證法顯示200 例標(biāo)本中有均存在微生物，微生物類(lèi)型包括53 例革蘭陽(yáng)性菌、96 例革蘭陰性菌、51 例真菌，見(jiàn)表1。

表1 微生物檢驗(yàn)結(jié)果分析（n）

2.2 不同檢驗(yàn)方法在不同標(biāo)本中的診斷符合率比較

細(xì)菌培養(yǎng)聯(lián)合涂片結(jié)果顯示痰液標(biāo)本、尿液標(biāo)本、膿液標(biāo)本、胸腹水標(biāo)本的診斷符合率與涂片鏡檢結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同檢驗(yàn)方法在不同標(biāo)本中的診斷符合率比較[n（%）]

2.3 不同檢驗(yàn)方法在不同微生物類(lèi)型中的檢出符合率比較

細(xì)菌培養(yǎng)聯(lián)合涂片鏡檢、涂片鏡檢在痰液標(biāo)本、尿液標(biāo)本、膿液標(biāo)本及胸腹水標(biāo)本中的微生物類(lèi)型診斷符合率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同檢驗(yàn)方法在不同微生物類(lèi)型中的檢出符合率比較[n（%）]

3 討論

微生物檢驗(yàn)技術(shù)在臨床診治感染性疾病中具有至關(guān)重要的作用，可以幫助臨床對(duì)患者的致病菌類(lèi)型進(jìn)行準(zhǔn)確鑒別，從而指導(dǎo)用藥，在保證患者用藥安全有效的同時(shí)，減少抗生素濫用現(xiàn)象[7]。涂片鏡檢是現(xiàn)階段臨床使用頻率較高的一種微生物檢驗(yàn)技術(shù)，但其使用方案有兩種，①原始標(biāo)本涂片鏡檢，②細(xì)菌培養(yǎng)后涂片鏡檢；由于細(xì)菌培養(yǎng)需要耗費(fèi)較長(zhǎng)的時(shí)間，此階段患者病情進(jìn)展則會(huì)延誤治療，所以原始標(biāo)本涂片鏡檢更受青睞。原始標(biāo)本涂片鏡檢的優(yōu)勢(shì)可以概括為以下3 個(gè)方面：①可對(duì)致病菌類(lèi)型進(jìn)行可靠鑒別，以此判斷患者疾病類(lèi)型；如痰液標(biāo)本中檢出葡萄球菌，患者有較高的概率為肺炎[8]；若檢出結(jié)核分枝桿菌，患者有較高的概率為肺結(jié)核；而患者機(jī)體因特殊形態(tài)致病菌侵襲引發(fā)的感染多表現(xiàn)為胸膜炎、膿腫[9]；因此涂片鏡檢可以幫助臨床判斷患者疾病類(lèi)型。②可判斷標(biāo)本質(zhì)量，如標(biāo)本質(zhì)量不合格，會(huì)引發(fā)檢查誤差，導(dǎo)致患者延期治療、治療不當(dāng)?shù)龋黾蛹膊〉奈：π裕辉紭?biāo)本涂片鏡檢需要進(jìn)行革蘭染色，若此階段標(biāo)本顯示鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)量較多，且伴有膿性細(xì)胞，則表明標(biāo)本質(zhì)量不合格，需要重新取材[10-11]。③可鑒定致病菌，該方法檢測(cè)過(guò)程中一些微生物具有典型形態(tài)，所以鑒別結(jié)果更為可靠。

周九英[12]研究指出，經(jīng)過(guò)涂片檢出及細(xì)菌培養(yǎng)后分析痰液、尿液、膿液及腹水的符合率分別為72.72%、75.00%、88.89%、77.78%；涂片檢出及細(xì)菌培養(yǎng)后分析痰液的陽(yáng)性球菌、陰性桿菌及真菌符合率分別為100.00%、92.85%、100.00%；尿液的陽(yáng)性球菌、陰性桿菌及真菌符合率分別為100.00%、85.71%、92.30%；膿液的陽(yáng)性球菌、陰性桿菌及真菌符合率分別為100.00%、85.71%、80.00%；腹水的陽(yáng)性球菌、陰性桿菌及真菌符合率分別為100.00%、83.33%、75.00%；在本次研究中發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌培養(yǎng)聯(lián)合涂片結(jié)果顯示痰液標(biāo)本診斷符合率為82.46%、尿液標(biāo)本診斷符合率為86.21%、膿液標(biāo)本診斷符合率為84.78%、胸腹水標(biāo)本診斷符合率為79.49%，涂片鏡檢結(jié)果顯示痰液標(biāo)本診斷符合率為89.47%、尿液標(biāo)本診斷符合率為89.66%、膿液標(biāo)本診斷符合率為86.96%、胸腹水標(biāo)本診斷符合率為84.62%，涂片鏡檢、涂片鏡檢聯(lián)合細(xì)菌培養(yǎng)的觀(guān)察指標(biāo)組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；另外在不同微生物檢出結(jié)果方面顯示，涂片鏡檢、細(xì)菌培養(yǎng)+涂片檢查結(jié)果也高度一致，即統(tǒng)計(jì)學(xué)分析涂片鏡檢、涂片鏡檢聯(lián)合細(xì)菌培養(yǎng)的觀(guān)察指標(biāo)組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究結(jié)果與前人結(jié)果趨于一致，可見(jiàn)原始標(biāo)本涂片鏡檢，與細(xì)菌培養(yǎng)聯(lián)合涂片均可以判斷患者的感染信息，為其早期治療提供指導(dǎo)。另外，微生物檢驗(yàn)包含標(biāo)本采集、檢驗(yàn)、病原學(xué)診斷、抗菌藥物敏感性試驗(yàn)等操作，獲取結(jié)果的過(guò)程一般在2～3 d 左右，此過(guò)程中患者病情極易發(fā)展，導(dǎo)致致病菌發(fā)生改變[13-14]；若在檢驗(yàn)過(guò)程中增加細(xì)菌培養(yǎng)操作，病情進(jìn)展空間會(huì)進(jìn)一步擴(kuò)大，因此在標(biāo)本送檢后，應(yīng)立即進(jìn)行染色、鏡檢，以便縮短檢查時(shí)耗，保證檢查結(jié)果對(duì)患者病情的治療可以充分發(fā)揮指導(dǎo)作用[15]。

綜上所述，微生物檢驗(yàn)中涂片鏡檢、細(xì)菌培養(yǎng)均有較好的應(yīng)用價(jià)值，可以對(duì)微生物類(lèi)型進(jìn)行較可靠的鑒別，但在細(xì)菌培養(yǎng)后進(jìn)行涂片鏡檢具有操作時(shí)間較長(zhǎng)的缺點(diǎn)，而直接對(duì)原始標(biāo)本進(jìn)行涂片檢測(cè)可以分辨標(biāo)本質(zhì)量，保證檢驗(yàn)工作順利開(kāi)展。