經典名方苓桂術甘湯復方制劑的研制

李 玲，季 光，張 彤*，肖 偉

（1.上海中醫藥大學中藥學院，上海 201203； 2.上海中醫藥大學附屬龍華醫院脾胃病科，上海中醫藥大學脾胃病研究所，上海 200032； 3.江蘇康緣藥業股份有限公司，江蘇 連云港 222000）

中醫藥是中國古代科學的瑰寶，也是打開中華文明寶庫的鑰匙，其發展已上升為國家戰略。經典名方作為中醫理論的載體、臨床治療的主要手段，不僅體現中醫藥系統的理論體系和實踐成果，也是我國獨特的衛生資源、科技資源和產業發展資源。為了促進中藥傳承創新和中藥高質量發展，2020年9 月，國家藥品監督管理局發布了《中藥注冊分類及申報資料要求》，將中藥注冊分為4 類，其中3.1 類為按古代經典名方目錄管理的古代經典名方中藥復方制劑。

上海中醫藥大學季光教授多年臨床經驗發現，苓桂術甘湯治療非酒精性脂肪肝具有良好效果，其復方制劑——苓桂術甘顆粒的開發自2014 年以來已歷時8 年多，其間江蘇康緣藥業股份有限公司肖偉院士牽頭承擔“十三五重大新藥創制科技重大專項-基于中醫典籍的經典名方研發” 任務，該品種上市既是產教合作研發的成果，也是2 家合作單位研究團隊長期努力探索的成果，并且研發過程中得到國家藥品監督管理局藥品審評中心和重大專項專家們的指導和大力支持。

本研究基于苓桂術甘顆粒研發的實踐，對經典名方復方制劑研發關鍵環節中存在的共性問題進行整理，并以苓桂術甘湯為例進行解析，以期形成適用于3.1 類中藥的研發策略，為其他經典名方的研發提供思路與參考。

1 關鍵信息準確考證是古代經典名方研發之源

經典名方源自古代經典醫籍或有代表性的古醫籍，為各代醫家長期使用并沿用至今，療效確切，其處方組成、藥材基原、藥用部位、炮制規格、折算劑量、用法用量、功能主治等內容是中藥3.1 類研發的依據。關鍵信息的準確考證是古代經典名方研發成功的關鍵，亦是古代經典名方開發的難點，在具體品種的關鍵信息考證上存在很多不同觀點，在國家發布古代經典名方關鍵信息后，相關品種關鍵信息應與其一致?！皞鞒芯A” 是中藥3.1 類中藥新藥研發需遵循的基本原則，也經典名方復方制劑研發“創新發展” 的基礎，應從歷史和發展的角度去解決關鍵信息考證中的共性問題。

1.1 已公布的古代經典名方關鍵信息匯總與分析

目前，按古代經典名方目錄管理的經典名方有100 首，已公布關鍵信息的古代經典名方有32 首，對于未公布關鍵信息的經典名方的研發工作，建議加強古籍考證工作。而已公布的《古代經典名方關鍵信息表（7 首方劑） 》 《古代經典名方關鍵信息表（25 首方劑） 》 可為3.1 類及3.2 類未公布關鍵信息的經典名方的考證提供有價值的借鑒意義［1-2］。本研究對這2 個文件進行仔細研讀和歸納總結，發現其在不同時期的度量衡、藥材基原、炮制方法及制法用法等方面具有一定的內在規律。

已公布關鍵信息的經典名方中度量衡的變化可歸納為3 個時期，分別為漢唐兩朝、宋金元時期、明清時期，具體見表1，此外，還有部分藥物使用“個” “枚” 等特殊單位，具體見表2。另外，若藥材使用劑量為區間者，則取其中間值，如古籍記載“熟地三、五錢”，則使用四錢為宜，同理，“生姜三、五、七片” 可取五片。

表1 歷代度量衡折算Tab.1 Conversions of weights and measures in previous dynasties

表2 藥材特殊單位折算劑量Tab.2 Converted doses of medicinal material at special units

經典名方中多數藥味的基原經過考證后，與2020 年版《中國藥典》 所收錄的品種一致，但少數也有變化，如2020 年版《中國藥典》 規定的甘草本品為豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果甘草GlycyrrhizainflataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根和根莖，但已公布關鍵信息的古代經典名方中甘草基原均為豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.，同時藥味名稱也應考慮歷史演變，如歷代郁金的基原考證為今姜科植物CurcumalongaL.的干燥根莖。自清代中后期以來，受產量、交通等因素影響，將本屬多種植物的卵形或紡錘形塊根作為郁金使用，而Curcuma longaL.的干燥根莖稱為“姜黃”，為避免名稱混亂，可將經典名方中的“郁金” 表述為“姜黃”。

在確定藥物炮制方法時，需要注意處方中未注明炮制的藥物，其使用的未必都是未經炮制的生品，還可能已在總論章節中提及，如《備急千金要方·卷一·序例》之“合和” 篇記載： “凡用甘草、厚樸、枳實、石南、茵芋、藜蘆、皂莢之類，皆炙之”。關于制法用法，煮散劑中“口父咀” “銼散” “為末” 可歸納為應將藥味粉碎成粗粒，“治下篩” 則表明藥味應粉碎為細粉。若未明確是日服量還是單次服量，建議結合臨床實際，每天1～3劑，遵醫囑使用。

1.2 苓桂術甘湯關鍵信息考證難點解析

1.2.1 桂枝藥用部位 唐以前，肉桂、桂枝、桂心都是肉桂的樹枝之皮［3-6］。北宋桂枝是桂的枝皮，而非嫩枝，干皮當時不入藥［7］，《本草衍義》［8］記載： “仲景又言桂枝者，蓋亦取其枝上皮。其木身粗濃處，亦不中用”，但目前“枝皮” 已不入藥。2020 年版《中國藥典》 收載的肉桂為樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl 的干燥樹皮，呈槽狀或卷筒狀［9］，為樹干的樹皮，非樹枝的“枝皮”。南宋開始，醫家注意到桂的樹皮（包括干皮、枝皮） 與嫩枝功能有差異，于是宋元時期樹皮稱為“肉桂”，嫩枝稱為“桂枝”［10-12］。

肉桂和桂枝功效不一樣，《湯液本草》［12］記載： “仲景傷寒發汗用桂枝。桂枝者，桂條也，非身干也，取其輕薄而能發散。仲景湯液用桂枝發表，用肉桂補腎，本乎天者親上，本乎地者親下，理之自然，性分之所不可移也”，桂枝湯里的桂枝振心陽，讓太陽經傷寒微發汗； 苓桂術甘湯桂枝“溫通經脈，助陽化氣” 以達溫陽化飲之功； 肉桂是溫腎陽，重在“補火助陽，引火歸元”?？紤]到歷史沿革和目前藥材飲片標準收載情況，在苓桂術甘湯中用桂枝，與2020 年版《中國藥典》 一致。

1.2.2 甘草基原 對于甘草基原的選擇方法，一是從產地，早有河西（南北朝），陜西河東洲郡、青州、河羌（北宋），山西隆慶洲（明），良諸郡（清） 等描述。根據產地調研，以上地址為現山西省、陜西省及甘肅省內區域。經過長年的采挖，甘草的主產地發生變化。直到二十世紀，東北、寧夏、新疆等地區的甘草才逐漸聞名［13］； 二是從外觀，《本草圖經》［14］、《本草蒙筌》［15］、《本草綱目》［16］均繪有甘草的原植物圖例，與《全國中草藥匯編》［17］、《中藥鑒定學》［18］中的原植物圖進行比較，大體古代所用甘草來源與現代豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.相同。

甘草歷史上由于外觀相近、產地重疊等因素，可能有多種基原混用的現象。目前，甘草GlycyrrhizauralensisFisch.多產于東北，山西，陜北榆林，內蒙古，沿黃河河套經寧夏、甘肅、青海、北疆、東疆，光果甘草GlycyrrhizaglabraL.產于新疆，脹果甘草GlycyrrhizainflataBat.產于南疆、東疆、甘肅金塔［13］，3 種基原產地具有一定重疊的現象。根據種屬分類，甘草、脹果甘草、光果甘草均屬于長莢果系，可從原植物的莢果及葉緣進行區分，但甘草入藥部位為根及根莖，其外觀性狀無明顯差異，通過性狀進行基原鑒別準確性欠佳。

3 種基原的甘草在指標成分、指紋圖譜等方面存在一定差異，雖然已有對其指紋圖譜［19］、特殊成分含量測定［20］的報道，但尚未發現可明確區分的質控標準。DNA 分子鑒定技術［21］作為現代新興手段，具有操作簡單、快速、準確等優點，目前已有較成熟的基于ITS2 條形碼序列鑒定藥用甘草的方法［22］，課題組前期采用該方法對各研究階段的30 批甘草進行基原鑒別，發現均為甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.，后續可加大對DNA 分子鑒定等新興技術的研究，用于多基原藥材的準確鑒定。

2 藥材飲片的全過程質量控制是經典名方研發之基

加強源頭質量控制，保障制劑質量，鼓勵使用優質藥材為原料，進行飲片炮制和制劑生產。在中藥3.1 類新藥的研發和生產中，應從藥材基原、產地、種植養殖、生長年限、采收加工、飲片炮制及包裝貯藏等多個方面加強藥材和飲片的質量控制，從源頭保障制劑的質量。

2.1 有效加強藥材飲片研究全過程質量控制 首先，進行多批次多產地的藥材質量研究。在道地產區或主產區中收集不少于3 個產地，總計不少于15 批藥材進行藥材質量研究。此環節以符合2020年版《中國藥典》 要求作為藥材納入標準，可了解全國各地臨床實際使用藥材質量的離散情況。由于研究用藥材產地分布范圍廣，納入研究的藥材質量批次間波動范圍大，更易于觀察分析藥材質量和產地之間的關系，綜合分析藥材中指標成分含量、浸出物、水分、灰分、指紋/特征圖譜等，確定藥材產地，并結合文獻及藥材基地實際種植情況，確定生長年限、采收期、產地加工。

其次，合理制定藥材質量標準。在2020 年版《中國藥典》 基礎上制定藥材的質量標準，提升藥材質量，按照《按古代經典名方目錄管理的中藥復方制劑藥學研究技術指導原則（試行） 》 要求，基準樣品中指標成分的含量波動范圍一般不超過均值的30%，即綜合不少于15 批藥材的質量研究情況，應進一步確定藥材中指標成分的波動范圍不超過均值的30%。根據具體品種研究情況，可進一步縮窄藥材中指標成分的波動范圍，以保障基準樣品和生產驗證樣品的合理波動，明確各藥味的藥材產地、生長年限、采收期、產地加工及質量要求，合理制定藥材質量標準，如為多基原，一般應明確單一基原，若確需使用多個基原，應固定使用比例。

最后，采用符合擬定質量標準的藥材進行后續研究。以制定的藥材標準為納入標準，收集藥材進行炮制工藝研究。如飲片的炮制規格沒有相應的國家標準和規范收載，一般應根據古籍文獻記載，并且參照2020 年版《中國藥典》 的炮制通則相關要求進行工藝的研究，明確工藝參數，并開展藥材-飲片的相關性研究，根據相關性研究結果合理制定飲片的質量標準。在此基礎上，使用質量穩定的飲片，用于后續的基準樣品和制劑的研究。

2.2 苓桂術甘湯藥材飲片研究難點解析 古代經典名方中藥復方制劑研究中藥材的準確溯源是一個共性難題，當前中藥飲片廠的藥材來源多為多地收購，可明確產地至省或市，但進一步溯源到縣和藥材種植基地，存在實際困難。為了解決藥材可溯源性，從合作企業簽約的基地或其他已建立合作的藥材種植基地直接采集，建立每批藥材的信息庫，從種養殖情況到產地初加工等，可實現精準溯源，但此方法存在收集藥材效率較低、周期較長的問題。期待建立中藥全產業鏈追溯平臺，實現中藥材基地種植-產地初加工-藥材炮制-飲片供應等生產全過程追溯，為古代經典名方中藥復方制劑提供優質可溯源的飲片質量保障。

此外，多批藥材和飲片的妥善保存也具有一定挑戰性。藥材飲片及基準樣品研究具有一定的研發周期，需保障藥材飲片在研究期間質量的穩定性?？筛鶕煌贩N藥材的特點分類管理，必要時可抽真空密封，冷藏，做好藥材進出臺賬，實現研究過程中藥材飲片的可追溯。

苓桂術甘顆粒處方所用藥材的質量標準在符合2020 年版《中國藥典》 標準的基礎上，明確多基原藥材的基原、固定藥味的產地、增加特征圖譜檢查項，同時對桂枝和甘草藥材指標成分的含量進行限度控制。此外，需對飲片炮制工藝進行研究，明確主要工藝參數，并根據藥材-飲片的相關性研究結果，進一步明確飲片質量標準，并且要高于2020年版《中國藥典》。所有質控研究和關鍵質控點的設立是建立從藥材、飲片炮制到制劑的全過程質量控制體系為目的，最終保證制劑產品質量的穩定。

3 與基準樣品質量的一致性是制劑工藝設計之錨

基準樣品應根據國家發布的關鍵信息中古籍記載的制法制備，如古籍記載較少或未明確制法，可參照醫療機構中藥煎藥室管理規范進行制備。制劑生產研究是以制得的制劑與基準樣品的質量基本一致為目標進行生產工藝和參數的研究，明確商業規模的制劑生產工藝及關鍵工藝參數，生產過程控制方法。完成生產工藝驗證，并說明制劑工藝的穩定可行性、制劑質量與基準樣品質量的一致性。

3.1 含揮發性成分處方中揮發油的處理 按《古代經典名方目錄》 管理的經典名方中部分處方含揮發性成分，關于揮發油的處理已然成為經典名方研發的共性問題，該類成分是否應該保留、如何保留、保留多少、如何實現有效準確的保留等是困擾經典名方研發科研工作者的難題之一。本研究認為，關于含揮發性成分處方中揮發油保留與否，取決于按古籍制法所制得湯液中是否含有揮發性成分，若有，則可結合處方的組成，藥物所含的成分、功能主治、中醫藥理論等內容，綜合考慮是否保留揮發性的成分?；鶞蕵悠穼藴珓┓脮r的狀態，而復方制劑工藝設計則以患者服用時能恢復湯劑的質量屬性為目標。

而在現代制劑過程中，保留多少同樣取決于湯液中含有多少量揮發性成分，只有在現代制劑和基準樣品質量一致的前提下，方可確保安全性和有效性。課題組前期研究發現，桂枝湯中桂枝含有桂皮醛等揮發性成分，生姜含有6-姜辣素等揮發性成分，煎煮時間、濃縮過程對這2 類揮發性成分的保留情況影響顯著，煎煮時間過長或采用常規減壓濃縮干燥方法時桂皮醛基本損失殆盡，但6-姜辣素卻能較好地保留，根據道爾頓分壓定律推測，可能與不同揮發性成分的飽和蒸汽壓等物理化學性質差異相關。研究表明，在湯劑的現代劑型研制過程中揮發性成分并非提取率越高越好，這是因為揮發性成分生物活性較強，含量過高時會出現毒性［23-24］。

經典名方中揮發性成分的有效、穩定地保留是一個科學問題，UPLC-Q-TOF/MS、GC-MS/MS 等技術可幫助研究者更清楚地了解湯劑中化學成分概貌，而如何保留，則需探索不同理化性質的揮發性成分在湯劑煎煮、濃縮、干燥過程中的保留行為及其機制，具體涉及2 個方面。一方面，是基準樣品中藥材-飲片-中間體（標準煎液） -基準樣品中揮發性成分的保留及量值傳遞情況，尤其需關注中間體（標準煎液） -基準樣品過程中可能涉及的濃縮、干燥等步驟對揮發性成分的保留，一般認為基準樣品應保留標準煎液的質量原貌，在眾多濃縮干燥方法中，冷凍干燥法因其由固體直接升華為水蒸氣的特點，對揮發性成分較友好，可考慮使用，但也應關注冷凍干燥工藝參數可能對揮發性成分的影響以及研究期間基準樣品的穩定性； 另一方面，需通過基準樣品中揮發性成分的保留特性、成分組成及含量，設計合理的復方制劑工藝路線?？筛鶕瑩]發性成分的藥材-飲片-液體中間體（揮發油/芳香水） -固體中間體（包合物或其他） -制劑的相關性研究結果，推算前序工藝中揮發油/芳香水的合理接收量和接收速率，達到揮發性成分的穩定、準確的傳遞。若揮發性成分轉移率過低，則可考慮增加前期各階段工藝過程中揮發性成分權重［25］。

3.2 基于工序損耗前置的復方制劑工藝路線設計 王海南在中藥審評審批改革與中藥注冊分類——2020 第四屆中國創新藥論壇發言中指出，因為患者喝下去的是湯劑，起效的物質就在湯劑里，故按照標準湯劑確定工藝參數、制定藥品標準的實質是以臨床為導向制藥理念的反映，體現對臨床實踐的尊重，是科學合理的［26］。另外，也可考慮將標準湯劑的標準作為確定基準樣品和復方制劑工藝優選的標準，在提取工藝研究中采用將主觀賦權法與客觀賦權法相結合的AHP-熵權法來綜合確定質量評價指標的權重系數，科學地處理多個指標在質量控制體系中的占比重，通過綜合評分確定與基準樣品最接近的現代提取工藝參數，可為經典名方的研發提供參考［27］，但也有待進一步完善，即它是將復方制劑中間體質量與基準樣品進行關聯比對，而現代制劑工藝中提取后還有濃縮、干燥、粉碎、混合等工序，均有一定程度的客觀損耗，即在保證提取液質量與基準樣品一致性的基礎上，終產品復方制劑與基準樣品的一致性難以保證。

按照《按古代經典名方目錄管理的中藥復方制劑藥學研究技術指導原則（試行） 》 （2021 年第36 號） 要求［28］，基準樣品干膏率的波動范圍應為10%，對復方制劑工藝設計提出很大的挑戰。本研究認為，制劑工藝設計時可以將生產批次制劑的關鍵質量屬性與經典名方基準樣品確定的關鍵質量屬性一致為目標，將小試提取工藝結果為設計起點，綜合考慮復方制劑的制備過程中濃縮、干燥、粉碎、總混等工序的損耗，以及小試-中試放大-生產驗證逐步放大過程中可能產生的損耗。考慮制備過程中濃縮工序的收率為95% ～100%，干燥工序的物料收率為90% ～100%，粉碎工序的物料收率為98% ～100%，總混工序的物料收率為98% ～100%，小試-中試放大轉移率為95% ～105%，中試放大-生產驗證轉移率為95% ～105%，以各工序和環節的收率范圍預測生產驗證制劑終產品的干膏率和關鍵質量屬性的質量。因此，應科學確定關鍵質量屬性的權重系數，結合綜合評分確定各工序工藝參數，建立適合經典名方復方制劑的工藝路線。

3.3 苓桂術甘湯制劑工藝設計的難點解析 在苓桂術甘湯基準樣品研究中發現，“一碗湯” 中保留著桂枝飲片中6%左右的桂皮醛，即中藥湯劑中保留部分揮發性成分。苓桂術甘湯中桂枝和白術均含揮發性成分，其揮發油在方中可協助發揮溫陽化氣、健脾燥濕的功效，被認為是苓桂術甘湯治中陽不足之痰飲的中藥藥效物質基礎之一，因此，考慮將揮發性成分進行合理有效保留。由于桂枝和白術混合揮發性成分與水密度相近，油水分離效果不佳，無法得到揮發油，故圍繞“如何對揮發性成分進行保留” 這一問題，本研究采用雙提法進行提取，即在收集水提液的同時收集芳香水，再將后者與倍他環糊精包合，可解決苓桂術甘湯中揮發性成分的保留問題，并提高其穩定性，并對中間體中桂皮醛含量進行嚴格控制，可對成品的質量起到保障作用。為了使制劑與經典名方基準樣品物質基礎保持良好的一致性，在制備工藝中未引入除水之外的其他溶劑進行提取純化，從而不涉及溶劑殘留問題。此外，揮發性成分的合理保留使制劑更加符合臨床湯劑的真實服用狀態，還原苓桂術甘湯的原貌，也保障了制劑的安全性和有效性。

基準樣品的制備工藝與國家發布的古代經典名方關鍵信息及古籍記載內容一致，即苓桂術甘湯每個處方165.6 g，加1 200 mL 水煎至600 mL，可知7.25 倍加水量是合理可行的。按照基于現代制劑各工序損耗前置的工藝路線設計，可實現小試、中試、大生產復方制劑中間體與基準樣品出膏率等各關鍵質量屬性的一致。

4 量質傳遞與多維質控體系是經典名方研發之魂

從質量要素完整性表達及全過程質量控制角度，通過專屬性鑒別、浸出物、多成分含量測定、指紋/特征圖譜等質控手段和方法進行藥材-飲片-中間體-制劑的相關性研究，確定質量控制的關鍵質量屬性。建立經典名方關鍵質量屬性檢測鑒定方法，可明確關鍵質量屬性量質傳遞規律，完善質量標準，并建立符合中藥特點的從藥材-飲片-中間體-制劑全過程、多維度的質量控制體系，從而保障制劑質量穩定可控。

4.1 關鍵質量屬性的選擇 經典名方與傳統中藥新藥研發思路有所區別，簡單地將2020 年版《中國藥典》 中藥材飲片的質控指標作為經典名方基準樣品和復方制劑的關鍵質量屬性的做法是不可取的。本研究認為，應致力于還原“一碗湯” 的化學概貌，即湯里有什么就質控什么，若為含揮發性成分處方，應建立揮發性成分和水溶性成分的雙重質控方法。原則上，處方中各藥味均應在制劑質量控制項目中體現，應建立多個藥味的含量測定方法［28］，但部分處方中存在個別藥味質量控制難以體現的問題，如水溶性成分含量極低而不適于建立定量檢測方法，或與方中其他藥味存在陰性干擾無特異性，可考慮建立2 張或2 張以上基準樣品的指紋/特征圖譜，用于不同藥味或成分的質控，或建立可用于該藥味的薄層色譜方法與定量檢測指標互為補充，同時需建立干膏率和適用于本處方的浸出物等質控方法。此外，若處方藥味中存在部分藥味含內源性毒性成分，則應建立內源性毒性成分的質控方法，并關注外源性有害物質的控制，以期實現產品的全面質量控制。

4.2 關注生產全過程的量質傳遞 采用指標成分的含量、指紋/特征圖譜等指標，對中試規模以上生產的中間體、制劑及所用的藥材、飲片進行相關性研究，并與基準樣品進行質量對比，說明生產全過程的量質傳遞情況，根據結果確定藥材、飲片、中間體、制劑的關鍵質量屬性和質量標準的質控指標，合理確定其波動范圍［28］。在研究過程中，應關注關鍵質量屬性的逐級傳遞，因為隨著工藝波動，其質量波動范圍將逐級放大，故建議根據相關性研究結果，并結合最終基準樣品的合理波動范圍，進一步收窄中間體、飲片、藥材的關鍵質量屬性范圍。

《按古代經典名方目錄管理的中藥復方制劑藥學研究技術指導原則（試行） 》 要求，應至少從干膏率、浸出物/總固體、指標成分的含量、指紋/特征圖譜等方面，說明商業規模生產制劑的質量與基準樣品質量的一致性［28］，并且明確生產制劑的質量與基準樣品質量的一致性的項目，以及合理波動的范圍，即干膏率的波動范圍一般不超過平均值的10%，指標成分的含量波動范圍一般不超過均值的30%，但相較于其他檢測項目，干膏率與工藝的變化關系密切，故其平均值10% 的波動限定較為嚴苛。因此復方制劑研究中需合理確定工藝參數控制范圍，并明確關鍵工藝參數控制點，并關注實驗室小試-中試-生產逐級放大中干膏率的變化情況，以生產批次制劑的關鍵質量屬性與經典名方基準樣品確定的關鍵質量屬性一致為目標進行工藝設計和優選。

4.3 苓桂術甘湯量質傳遞與質量控制研究難點解析 在藥材和飲片相關性研究中，易出現指標成分轉移率過高或過低，或轉移率波動過大的情況，可考慮從以下3 個方面尋找原因并進行改進，①關注藥材和飲片取樣的規范性，一般應參考2020 年版《中國藥典》 四部0211 藥材和飲片取樣法進行規范取樣； ②關注藥材自身特點，考慮取樣量是否符合檢測要求。文獻［29-30］ 報道，苓桂術甘湯藥材中指標成分的分布具有其自身特點，桂枝皮部桂皮醛含量比木質部高1 ～2 倍，桂枝皮部肉桂酸含量比木質部高2 ～3 倍以上； 甘草中甘草苷主要分布在木質部和韌皮部，其中以木質部和根皮中含量較高，而在韌皮部中較低，即同一個枝/根的桂枝/甘草藥材粗部和細部含量亦存在差異，若藥材檢測取樣量為200 g，其中桂枝約3 ～7 根（枝頭約0.5 cm，枝尾約1 cm，長約30 ～50 cm），甘草約2 ～5根（頭徑約1.5～3 cm，尾徑約1 cm，長約25 ～60 cm），由于指標成分在桂枝和甘草藥材中存在非均勻分布的現象，對藥材和飲片的含測檢測勢必會帶來一定的挑戰，故在必要時可考慮增加樣品的取樣量，保障檢測結果的準確性； ③關注炮制過程浸泡、高溫悶潤、高溫干燥等工藝對成分的影響，苓桂術甘湯中甘草在炮制工藝研究中，發現其存在水傷的情況，即浸泡操作會顯著降低飲片中水溶性指標成分的含量，故采用悶潤代替浸泡工藝，保障飲片質量。通過藥材-飲片特征圖譜研究可進一步分析藥材至飲片的特征峰傳遞情況，說明藥材與飲片的物質基礎的一致性。

此外，基準樣品研究中應關注飲片-中間體-基準樣品中指標成分的穩定傳遞，例如15 批基準樣品指標成分轉移率較為寬泛的問題，可能原因為每批投料量小，而部分飲片中不同部位中指標成分含量有顯著差異，呈現非均勻分布，所取飲片在反映該批次飲片質量概貌上代表性略有差異所致，故可考慮飲片規范取樣，關注飲片取樣的代表性，必要時可增加基準樣品每批次的制備量。此外，還可能出現基準樣品中指標成分含量波動較大的問題，可從飲片自身的含量波動和制備工藝的波動中尋找原因。若納入研究的飲片批次間含量波動大，在工藝穩定的情況下會反映至基準樣品中，可能使基準樣品指標成分含量的波動范圍偏大，當然制備工藝不穩定也可能對基準樣品成分轉移和波動造成影響。

苓桂術甘湯君藥茯苓水溶性特征成分的尋找及質控方法的建立是苓桂術甘顆粒質量標準研究的難點，曾嘗試建立其指標成分的含量方法，但基準樣品中茯苓酸、去氫土莫酸、豬苓酸C 均低于檢測限，5-羥甲基糠醛在白術、甘草中有陰性干擾，而TLC 法可用于相關質量控制。此外，佐藥白術水溶性指標成分含量也均低于定量限，無法建立定量檢測方法，而苓桂術甘顆粒在指紋圖譜中指認白術內酯Ⅱ、白術內酯Ⅲ，并建立TLC 鑒別方法。另外，苓桂術甘顆粒質量標準中也建立了處方中各藥味的薄層色譜鑒別、特征圖譜、重金屬及有害元素檢查、微生物檢查、制劑通則檢查、醇溶性浸出物測定，以及桂枝、甘草中3 種成分含量測定方法，并規定浸出物和含量測定限度范圍。

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關鍵信息考證是經典名方復方制劑研究中的重點和難點，已公開的《古代經典名方關鍵信息表（25 首方劑） 》 中也存在一些值得進一步討論的問題，如何做到“尊古而不泥古”，值得科研工作者進一步思考。例如，瀉白散備注中提到“地骨皮除雜處理后注明焙的操作，其目的為使藥材質地酥脆，便于后續粉碎，因此建議尊重原方炮制方法，可參考地方標準如2005 年版《安徽省中藥炮制規范》 中的焙法?！?但是2019 年版《安徽省中藥炮制規范》 中沒有焙法，而且文獻［31］ 報道曬干所得地骨皮中地骨皮乙素含量最高，其次是烘干，最后是焙干，課題組前期也發現炮制溫度越高，該成分含量越低，焙法目的為使藥材質地酥脆，便于后續粉碎，但目前生品即可達到粉碎的目的，其使用可追溯至金代《醫學啟源》 去骨用皮、碎用，在明代也有記載［32-33］。綜上所述，瀉白散中地骨皮炮制方法的選擇應結合炮制目的、歷史沿革、中藥炮制學科發展規律，不可過度拘泥于古籍記載，建議將生品代替焙法炮制品入藥。

湯劑是復雜的分散體系，課題組在相關經典名方研究中發現標準煎液（標準湯劑） 中含揮發性成分（源于桂枝、生姜等藥材），但常規濃縮干燥過程會造成部分揮發性成分（源于桂枝） 不能保留，而且其保留狀況與物理性質相關，需要在制劑過程中密切關注，并且湯液中難溶性成分含量遠高于其本身溶解度。不同性質揮發性成分在湯劑制備過程中的保留機制、湯劑中復雜多相態的作用和影響因素等問題是長期困擾經典名方研究、中藥新藥劑型設計的瓶頸，經典名方復方制劑如何合理設計和優化現代制劑工藝路線，還原湯劑的化學成分概貌，是還原其臨床療效的物質基礎，值得廣大科研工作者深入思考探究。

苓桂術甘顆粒的上市是經典名方服務廣大人民群眾的有益實踐。而構建中醫藥評價體系、開展病癥結合臨床研究及藥效物質基礎研究，是解析中醫藥科學內涵的關鍵環節。今后，可在基于臨床大數據總結經典名方應用規律的基礎上，選擇主治病證明確、臨床療效確切的經典名方，按照國際臨床試驗規范開展循證評價關鍵技術研究，形成針對中醫經典名方的疾病-證候-癥狀-多組學關聯分析相結合的臨床循證評價關鍵技術，挖掘經典名方現代臨床優勢和定位，推動構建病-證融合一體化評價體系，明確并逐步擴大適用范圍，明確各適應癥的用藥劑量與用藥周期。臨床跟蹤不良反應，明確孕婦、嬰幼兒、哺乳期婦女等特殊人群的用藥指導。

經典名方的現代研發是對接國家戰略發展需求、人民群眾健康服務要求的突破口，應基于基礎研究、臨床應用、新藥創制的各個技術關鍵節點開展其科學原理闡釋、中藥及其制劑成分藥理藥性分析、制藥關鍵工藝優化、智能制藥裝備研發等方面的研究。用現代科學解讀中醫藥原理，推動中醫藥現代化、產業化，是時代賦予中醫藥人的使命。經典名方的研發任重而道遠，中醫藥人當砥礪前行。