血清CTRP9 VASH-1 對妊娠期高血壓疾病患者早期腎損傷的評估價值

郝媛媛 杜 巍 王建美

妊娠期高血壓疾病（hypertensive disorder complicating pregnancy，HDCP）是一系列涉及妊娠和高血壓的疾病，主要臨床表現包括血壓升高、水腫、尿蛋白和系統性多器官損傷等，嚴重時甚至可能發生昏迷和抽搐，對母親和嬰兒的健康造成嚴重威脅［1-2］。腎損傷是HDCP 最常見的并發癥之一，可導致孕婦流產、早產及胎兒死亡［3］。由于HDCP 腎損傷早期發病不易被察覺，容易錯過最佳治療時機，故確定HDCP 患者早期腎損傷有效的診斷評估指標，對積極預防和治療HDCP 患者早期腎損傷具有重要意義。C1q 腫瘤壞死因子相關蛋白9（C1q tumor necrosis factor-related protein 9，CTRP9）是由脂肪組織分泌的新型脂肪因子，在免疫調節、抗炎反應、細胞凋亡、自身免疫、血管系統、體內葡萄糖和脂質代謝等過程中具有重要作用［4］。研究顯示，CTRP9 在心肌保護、抑制內膜損傷后血管重塑和保護血管內皮方面發揮重要作用［5-7］。但目前相對較少的研究關注CTRP9 在HDCP 中的作用。血管生成抑制蛋白-1（vasohibin-1，VASH-1）是一種新型抗血管生成因子，主要由內皮細胞產生分泌，可存在于腎小球系膜細胞［8］。研究顯示，血清VASH-1 水平可能與腎臟炎癥和纖維化相關因子的表達有關，且與糖尿病腎病具有潛在聯系［9］。但目前關于CTRP9 和VASH-1 對HDCP患者腎損傷的早期診斷價值尚不明確，故本研究通過對HDCP 患者血清CTRP9、VASH-1 水平進行檢測分析，探討二者對HDCP 患者腎損傷早期的評估價值，期望為該疾病的診療提供一定依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2022 年1～12 月河北中石油中心醫院產科就診治療的HDCP 患者112 例為研究對象，根據是否發生腎損傷，將其分為非腎損傷組（n=52）和腎損傷組（n=60）。另選取同期在本院建立檔案且孕檢正常孕婦70 例作為對照組。

納入標準：① HDCP 患者均經臨床確診符合相關診斷標準［10］者；②腎損傷組患者均經臨床確診為腎損傷［11］者；③HDCP 患者均無孕前高血壓及腎臟疾病史；④均為單胎自然妊娠者；⑤患者及家屬知情且同意。排除標準：①合并胎盤前置、低置以及先兆早產等妊娠期并發癥者；②患有免疫系統、血液系統疾病者；③合并糖尿病、甲狀腺等內分泌疾病者。本研究經醫院倫理委員會審查同意（審批號：2021-0128）。

1.2 方法

1.2.1 資料收集 收集3 組對象年齡、身體質量指數、收縮壓、舒張壓、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、血尿酸、尿蛋白等基本臨床資料。

1.2.2 酶聯免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）測定血清CTRP9、VASH-1 水平 采集孕婦清晨空腹靜脈血3 mL，離心機（廈門國儀，型號：TDD-5）4 000 r/min 離心12 min，分離血清，-80℃冰箱保存備用。根據人CTRP9 ELISA 試劑盒（上海羽朵生物，貨號：YEF24147）、人VASH-1ELISA 試劑盒（上海羽朵生物，貨號：YEF17525）說明書配制CTRP9、VASH-1 標準品溶液，解凍血清樣本，多功能酶標儀（美國PerkinElmer，型號：EnVision）測定CTRP9、VASH-1 標準品溶液及血清樣本在450 nm 處的吸光度，繪制CTRP9、VASH-1 標準品回歸曲線。根據CTRP9、VASH-1 標準品回歸曲線方程，計算血清樣本CTRP9、VASH-1 水平。

1.3 觀察指標 ①比較3 組對象基本臨床資料；②比較受試者血清CTRP9、VASH-1 水平；③分析血清CTRP9、VASH-1 水平與收縮壓、舒張壓、TNF-α、血尿酸、尿蛋白水平的相關性；④分析HDCP 患者發生早期腎損傷的影響因素；⑤分析血清CTRP9、VASH-1 水平在預測HDCP 患者發生早期腎損傷中的價值。

1.4 統計學方法 應用SPSS 25.0 軟件對數據進行統計分析。符合正態分布的計量資料以表示，多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用SNK-q檢驗；相關性分析采用Pearson 相關分析；采用多因素logistic 回歸分析HDCP 患者發生早期腎損傷的影響因素；采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評價血清CTRP9、VASH-1 水平在預測HDCP 患者發生早期腎損傷中的價值。以P<0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 3 組對象一般資料比較 3 組對象收縮壓、舒張壓、TNF-α、血尿酸、尿蛋白進行比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。腎損傷組收縮壓、舒張壓、TNF-α、血尿酸、尿蛋白均高于非腎損傷組和對照組，差異有統計學意義（P<0.05）；非腎損傷組收縮壓、舒張壓、TNF-α、血尿酸均高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 3組對象一般資料比較（）

表1 3組對象一般資料比較（）

注：TNF-α為腫瘤壞死因子α；與對照組比較，①P＜0.05；與非腎損傷組比較，②P＜0.05。

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2.2 3 組對象血清CTRP9、VASH-1 水平比較 3 組對象血清CTRP9、VASH-1 水平進行比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。腎損傷組血清CTRP9 水平低于對照組和非腎損傷組，非腎損傷組CTRP9 水平低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）；腎損傷組血清VASH-1 水平高于對照組和非腎損傷組，非腎損傷組VASH-1 水平高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 3組對象血清CTRP9、VASH-1水平比較（）

表2 3組對象血清CTRP9、VASH-1水平比較（）

注：CTRP9為C1q腫瘤壞死因子相關蛋白9；VASH-1為血管生成抑制蛋白-1；與對照組比較，①P＜0.05；與非腎損傷組比較，②P＜0.05。

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2.3 血清CTRP9、VASH-1 水平與臨床指標的相關性分析 Pearson 相關分析結果顯示，發生早期腎損傷HDCP 患者血清CTRP9 水平與收縮壓、舒張壓、TNFα、血尿酸、尿蛋白水平均呈負相關（P<0.05）；患者血清VASH-1 水平與收縮壓、舒張壓、TNF-α、血尿酸、尿蛋白水平均呈正相關（P<0.05）。見表3。

表3 血清CTRP9、VASH-1水平與臨床指標相關分析（n=60）

2.4 HDCP 患者發生早期腎損傷的影響因素的多因素logistic 回歸分析 以HDCP 患者是否發生早期腎損傷（是=1，否=0）為因變量，以血清CTRP9、VASH-1、收縮壓、舒張壓、TNF-α、血尿酸和尿蛋白水平為自變量，采用逐步向前法進行多因素logistic 回歸分析。結果顯示，高水平CTRP9 為HDCP 患者發生腎損傷的獨立保護因素（P<0.05）；高水平VASH-1、TNF-α、血尿酸、尿蛋白均為HDCP 患者發生腎損傷的獨立危險因素（P<0.05）。見表4。

表4 HDCP患者發生早期腎損傷的影響因素的多因素logistic回歸分析

2.5 血清CTRP9、VASH-1 水平在預測HDCP 患者發生早期腎損傷中的價值 以血清CTRP9、VASH-1 水平為檢驗變量，以HDCP 患者是否發生早期腎損傷為狀態變量（是=1，否=0），繪制ROC 曲線。結果顯示：血清CTRP9 預測HDCP 患者發生早期腎損傷的曲線下面積（area under the curve，AUC）為0.873（95%CI：0.811～0.935），截斷值為141.58 pg/mL，特異度為80.77%，靈敏度為75.00%；血清VASH-1 水平預測HDCP 患者發生早期腎損傷的AUC 為0.896（95%CI：0.838～0.953），截斷值為635.53 ng/L，特異度為84.62%，靈敏度為80.00%。血清CTRP9、VASH-1 聯合預測HDCP 患者是否發生早期腎損傷的AUC 為0.955（95%CI：0.921～0.989），均優于各自單獨預測（Z=2.319，P=0.020；Z=1.755，P=0.079），特異度為92.31%，靈敏度為86.67%。見圖1。

圖1 血清CTRP9、VASH-1 水平預測HDCP 患者發生早期腎損傷的ROC曲線

3 討論

HDCP 是孕期孕產婦死亡的5 大原因之一，在中國發病率約為9%［12］。研究認為，HDCP 發病可能原因是免疫系統失衡、胎盤淺著床、侵入子宮肌層的滋養層細胞異常、血管內篩分細胞損傷、遺傳因素等［13-14］，但其具體發病機制目前尚不清楚，且由于在HDCP 期間會發生尿蛋白水平上升而導致患者發生腎損傷，因此確定HDCP 患者早期腎損傷有效的診斷評估指標，對積極預防和治療HDCP 患者早期腎損傷具有重要意義。

CTRP9 是一種抗炎，抗氧化，血管舒張和動脈粥樣硬化保護脂肪細胞因子，具有與脂聯素相似的代謝調節功能［15］。研究顯示，CTRP9 過表達減輕了細胞活性和凋亡的損傷，減少了炎癥和細胞遷移能力受損；CTRP9 通過抑制腎小球和腎小管糖原積累和纖維化，緩解高血糖介導的氧化應激和細胞凋亡；CTRP9 可抑制促炎因子TNF-α 釋放來減少細胞凋亡，并減少炎癥［16-18］。本研究結果發現，腎損傷HDCP 患者血清CTRP9 水平低于對照組和非腎損傷患者，且早期腎損傷HDCP 患者血清CTRP9 水平與收縮壓、舒張壓、TNF-α、血尿酸、尿蛋白水平均呈負相關，推測可能由于CTRP9 水平下調，導致TNF-α 水平上調，炎癥反應發生，促進患者腎損傷過程［17］。進一步研究發現，高水平CTRP9 為HDCP 患者發生腎損傷的獨立保護因素，血清CTRP9 預測HDCP 患者發生早期腎損傷的AUC為0.873，截斷值為141.58 pg/mL，特異度為80.77 %，靈敏度為75.00 %，提示通過上調CTRP9 水平可能能夠抑制腎損傷發生，CTRP9 在評估HDCP 患者發生腎損傷中具有一定價值。

VASH-1 通常作為血管內皮細胞血管生成的負反饋調節劑起作用，能夠在生理和病理條件下抑制血管生成［19］。研究顯示，患有間質性肺疾病的系統性硬化癥患者血清VASH-1 水平較對照者顯著升高［8］。糖尿病腎病患者血清VASH-1 水平顯著升高，且隨其病情加重而逐漸上調［9］。本研究結果發現，腎損傷組患者血清VASH-1 水平高于對照組和非腎損傷組，與Liu等［20］研究結果相似。患者血清VASH-1 水平與收縮壓、舒張壓、TNF-α、血尿酸、尿蛋白水平均呈正相關，且高水平VASH-1 為HDCP 患者發生腎損傷的獨立危險因素。ROC 分析發現，血清VASH-1 水平預測HDCP 患者發生早期腎損傷的AUC 為0.896，截斷值為635.53 ng/L，特異度為84.62 %，靈敏度為80.00%。進一步研究發現，血清CTRP9、VASH-1 聯合預測HDCP 患者是否發生早期腎損傷的AUC 為0.955，均優于各自單獨預測，且特異度為92.31 %，靈敏度為86.67%，提示CTRP9、VASH-1 聯合在評估HDCP 患者早期腎損傷中具有一定潛在價值。

綜上所述，發生早期腎損傷HDCP 患者血清CTRP9 水平降低，血清VASH-1 水平升高，二者在預測評估HDCP 患者發生早期腎損傷中具有一定價值。但本研究樣本數量有限，還需擴大樣本進行進一步驗證CTRP9、VASH-1 水平在HDCP 患者發生早期腎損傷中的臨床價值，并深入探究其作用機制。