長(zhǎng)春西汀注射劑小粒徑不溶性微粒倍增現(xiàn)象及風(fēng)險(xiǎn)分析

賈麗華，李佳奇，2，郭歡迎

（1.陜西省食品藥品檢驗(yàn)研究院，陜西 西安 710065；2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，陜西 咸陽 712046）

長(zhǎng)春西汀（vinpocetine）是從夾竹桃科植物提取的一種生物堿，為長(zhǎng)春胺的衍生物，可選擇性地抑制腦血管平滑肌鈣離子依賴性磷酸二酯酶，增加腦中cGMP 和cAMP 的水平，使腦血管擴(kuò)張，繼而增加腦血流量，改善腦循環(huán)[1]。臨床上常與胞磷膽堿、川芎嗪、丹紅注射液以及抗生素等聯(lián)合用藥，用于急性缺血性腦血管病、非急性缺血性腦血管病、腦小血管病與認(rèn)知功能障礙、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的治療和改善[2-5]。但近年來，由于長(zhǎng)春西汀注射劑存在臨床使用不合理、不良反應(yīng)數(shù)量較多等問題，2019 年，國家衛(wèi)生健康委會(huì)同國家中醫(yī)藥局印發(fā)《第一批國家重點(diǎn)監(jiān)控合理用藥藥品目錄（化藥及生物制品）》，對(duì)該品種進(jìn)行限制使用和重點(diǎn)監(jiān)控[6]。長(zhǎng)春西汀不良反應(yīng)主要涉及全身性損害、皮膚及其附件損害、心血管系統(tǒng)損害、神經(jīng)系統(tǒng)損害、免疫功能紊亂和感染。本研究將對(duì)長(zhǎng)春西汀注射劑的不溶性微粒進(jìn)行分析，特別是對(duì)粒徑在10 μm 以下的小微粒進(jìn)行分析，重點(diǎn)探討不同pH 值、不同溶媒及不同配伍用藥對(duì)長(zhǎng)春西汀注射液不溶性微粒的影響，為長(zhǎng)春西汀注射劑不良反應(yīng)情況分析和臨床合理用藥提供研究思路和數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 儀器 S210 型酸度計(jì)（瑞士梅特勒公司）；GWJ-8型微粒分析儀（天津天大天發(fā)科技有限公司）。

1.2 試藥 長(zhǎng)春西汀注射液（河南潤(rùn)弘藥業(yè)有限公司，批號(hào)1909232）；氯化鈉注射液（西安京西雙鶴藥業(yè)有限公司，批號(hào)200624 2A）；葡萄糖注射液（西安京西雙鶴藥業(yè)有限公司，批號(hào)200203 6AD）；葡萄糖氯化鈉注射液（西安京西雙鶴藥業(yè)有限公司，批號(hào)200303 6AD）；碳酸氫鈉林格注射液（西安萬隆制藥股份有限公司，批號(hào)R190701）；復(fù)方電解質(zhì)葡萄糖注射液（西安萬隆制藥股份有限公司，批號(hào)B190502）；右旋糖酐40 氯化鈉注射液（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)L19111202）；RPMI Medium Modified 培養(yǎng)基（HyClone，批號(hào)AF29246308）；維生素C 注射液（西安利君制藥有限責(zé)任公司，批號(hào)1911201）；胞磷膽堿鈉注射液（陜西頓斯制藥有限公司，批號(hào)19100403）；鹽酸川芎嗪注射液（西安漢豐藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)2005121）；丹參川芎嗪注射液（吉林四長(zhǎng)制藥有限公司，批號(hào)20170211）；丹參注射液（正大青春寶藥業(yè)有限公司，批號(hào)1901183）；丹紅注射液（山東丹紅制藥有限公司，批號(hào)19031017）；腎康注射液（西安世紀(jì)盛康藥業(yè)有限公司，批號(hào)191105）；注射用氨芐西林鈉（山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，批號(hào)181209）；注射用酒石酸吉他霉素（哈藥集團(tuán)制藥總廠，批號(hào)B1812006-2）；注射用青霉素鈉（山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，批號(hào)181025）；注射用頭孢他啶（哈藥集團(tuán)制藥總廠，批號(hào)1910701-1）；注射用阿奇霉素（西安利君制藥有限責(zé)任公司，批號(hào)200302-1）；克林霉素磷酸酯注射液（山東方明藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)19111881）；注射用頭孢美唑鈉（四川合信藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)19032107）。

1.3 方法

1.3.1 pH 變化對(duì)不溶性微粒的影響 ①樣品溶液的制備：?氯化鈉注射液：取氯化鈉注射液1 瓶，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20 次，使溶液混合均勻，小心開啟容器，靜置脫氣，備用；?長(zhǎng)春西汀氯化鈉溶液：取長(zhǎng)春西汀注射液1 支，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20 次，使溶液混合均勻，小心開啟容器，將注射液完全沖洗至500 ml 氯化鈉注射液中，混合均勻，靜置脫氣，備用；?RPMI 培養(yǎng)基：取RPMI 培養(yǎng)基，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20次，使溶液混合均勻，小心開啟容器，靜置脫氣，備用；?0.1 mol/L NaOH 溶液：采用不溶性微粒檢查用水配制，0.22 μm 微孔濾膜過濾，備用。②測(cè)定方法：打開儀器，用微粒檢查用水沖洗儀器通道，備用。微粒檢查用水按《中國藥典2020 年版四部》通則0903 的要求進(jìn)行檢測(cè)，符合使用要求。分別取氯化鈉注射液和長(zhǎng)春西汀氯化鈉溶液適量，置不溶性微粒測(cè)定儀取樣器中，由儀器直接抽取適量溶液（以不吸入氣泡為限），測(cè)定并記錄2～5、5～10、10～25、≥25 μm 微粒數(shù)據(jù)，另計(jì)算每毫升含不同粒徑微粒數(shù)量。取長(zhǎng)春西汀氯化鈉溶液適量，逐滴加入0.1 mol/L NaOH 溶液，調(diào)節(jié)pH 值，按照以上方法，測(cè)定不同pH 值條件下混合溶液中每毫升含不同粒徑微粒數(shù)量，同法測(cè)定氯化鈉注射液在不同pH 條件下的不溶性微粒數(shù)。取長(zhǎng)春西汀氯化鈉溶液和RPMI 培養(yǎng)基各50 ml，小心混勻，靜置脫氣，按照以上方法，測(cè)定不同粒徑微粒數(shù)，并計(jì)算每毫升含微粒數(shù)量，同法測(cè)定RPMI 培養(yǎng)基每毫升含不同粒徑微粒數(shù)量。

1.3.2 不同溶媒的影響 ①樣品溶液的制備：?溶媒溶液：取氯化鈉注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖氯化鈉注射液、碳酸氫鈉林格注射液、復(fù)方電解質(zhì)葡萄糖注射液各1 瓶，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20次，使溶液混合均勻，小心開啟容器，靜置脫氣，備用；?長(zhǎng)春西汀溶媒樣品溶液：取長(zhǎng)春西汀注射液1 支，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20 次，使溶液混合均勻，小心開啟容器，將注射液完全沖洗至500 ml 以上溶媒溶液中，混合均勻，靜置脫氣，備用。②測(cè)定方法：分別取溶媒溶液和長(zhǎng)春西汀溶媒樣品溶液適量，置不溶性微粒測(cè)定儀取樣器中，由儀器直接抽取適量溶液（以不吸入氣泡為限），測(cè)定并記錄2～5、5～10、10～25、≥25 μm 微粒數(shù)據(jù)，并計(jì)算每毫升含不同粒徑微粒數(shù)量。

1.3.3 不同樣品配伍的影響 ①樣品溶液的制備：?配伍樣品溶液：取維生素C 注射液等配伍用樣品各1 瓶，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20 次，使溶液混合均勻，小心開啟容器，將注射液完全沖洗至100 ml 氯化鈉注射液中靜置脫氣，備用；?長(zhǎng)春西汀樣品溶液：取長(zhǎng)春西汀注射液1 支，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20 次，使溶液混合均勻，小心開啟容器，將注射液完全沖洗至500 ml 氯化鈉注射液中，混合均勻，靜置脫氣，備用。②測(cè)定方法：取配伍樣品和長(zhǎng)春西汀溶媒樣品適量，分別置不溶性微粒測(cè)定儀取樣器中，由儀器直接抽取適量溶液，測(cè)定并記錄2～5、5～10、10～25、≥25 μm 微粒數(shù)據(jù)，并計(jì)算每毫升含不同粒徑微粒數(shù)量。取配伍樣品和長(zhǎng)春西汀溶媒樣品各100 ml，小心混勻，靜置脫氣，按以上方法測(cè)定每毫升含不同粒徑微粒數(shù)量。

2 結(jié)果

2.1 pH 變化對(duì)不溶性微粒的影響 采用0.1 mol/L NaOH 溶液溶液調(diào)節(jié)0.9%氯化鈉注射液的pH 值，其不溶性微粒數(shù)變化不大，見表1。為此，研究中采用RPMI 培養(yǎng)基模擬長(zhǎng)春西汀注射液滴注至人體環(huán)境后不溶性微粒的變化，結(jié)果顯示長(zhǎng)春西汀氯化鈉溶液與模擬人體液的培養(yǎng)基混合以后，產(chǎn)生了大量的不溶性微粒，2～5 μm 的顆粒數(shù)增加至原來的200多倍，5～10 μm 的顆粒數(shù)增加至原來的60 倍，10～25 μm 的顆粒數(shù)變化不是很明顯，見表2。

表1 不同pH 值條件下長(zhǎng)春西汀溶液的不溶性微粒測(cè)定結(jié)果（n=3）

表2 細(xì)胞培養(yǎng)基對(duì)長(zhǎng)春西汀溶液的不溶性微粒的影響（n=3）

2.2 不同溶媒對(duì)不溶性微粒的影響 長(zhǎng)春西汀在不同溶媒中的不溶性微粒差異較大，以氯化鈉注射液和葡萄糖注射液為溶媒，不溶性微粒差異不大，但溶媒成分越復(fù)雜，不溶性微粒數(shù)量有所增加，特別是在右旋糖酐40 氯化鈉注射液、碳酸氫鈉林格注射液中的不溶性微粒是氯化鈉注射液中的150 倍左右，見表3。

表3 不同溶媒中長(zhǎng)春西汀的不溶性微粒測(cè)定結(jié)果（n=3）

2.3 不同樣品配伍對(duì)不溶性微粒的的影響 長(zhǎng)春西汀注射液與維生素C 注射液、鹽酸川芎嗪注射液、注射用酒石酸吉他霉素等酸性注射劑配伍后，不同粒徑不溶性微粒變化不大，見表4。

表4 不同藥物配伍后長(zhǎng)春西汀注射液的不溶性微粒測(cè)定結(jié)果（n=3）

3 討論

3.1 現(xiàn)象分析 臨床不良反應(yīng)的發(fā)生與藥品本身特點(diǎn)、臨床使用方法等因素密切相關(guān)，如不溶性微粒增加、pH 敏感、穩(wěn)定性差等問題[7，8]。長(zhǎng)春西汀是弱堿性（pKa=7.31）藥物，幾乎不溶于水，在酸性條件下易溶，中性或堿性條件下會(huì)析出白色結(jié)晶或顆粒，因此長(zhǎng)春西汀注射劑多為偏酸性（pH 約在4 左右）。有文獻(xiàn)報(bào)道[6，8，9]，長(zhǎng)春西汀注射劑與多種藥物存在配伍禁忌，多數(shù)表現(xiàn)在兩種藥物混合后出現(xiàn)白色、乳白色或絮狀渾濁，其主要原因是配伍以后改變了長(zhǎng)春西汀注射劑pH 值，在中性或偏堿性環(huán)境中長(zhǎng)春西汀析出所致。但現(xiàn)有文獻(xiàn)中關(guān)于對(duì)長(zhǎng)春西汀注射劑不溶性微粒，特別是小粒徑不溶性微粒產(chǎn)生的具體情況進(jìn)行分析的研究較少。《中國藥典》對(duì)注射劑中不溶性微粒的控制僅限于粒徑大于10 μm 和25 μm的微粒數(shù)，對(duì)于粒徑小于10 μm 的微粒數(shù)未作規(guī)定[10]。目前醫(yī)院常用的一次性輸液器孔徑多為15 μm 規(guī)格和5 μm 規(guī)格，個(gè)別品種采用1.2 μm 規(guī)格，這樣的輸液器對(duì)于大粒徑微粒（≥10 μm）截留效果較好，對(duì)于小粒徑微粒（2～10 μm）截留效果較差。實(shí)際上，人體最小的毛細(xì)血管內(nèi)徑僅有4～7 μm，嬰、幼兒的毛細(xì)血管更細(xì)，只有粒徑2 μm 以下的微粒才可能通過腎交換被排出體外，而粒徑為2～10 μm 的微粒無法被排出。據(jù)報(bào)道[11-13]，靜脈滴注含微粒輸液可致兔體溫增高，并且微粒可致抗原性刺激、微血管梗塞及機(jī)械性損傷。微粒進(jìn)入體內(nèi)造成危害的部位一般多在肺、腦、腎、眼等處，較大的微粒會(huì)直接造成局部循環(huán)障礙，引起血管栓塞或?qū)е氯庋磕[，且有短期內(nèi)可見的特點(diǎn)。因此，粒徑為2～10 μm 的微粒則可能造成潛伏性的更大危害，是導(dǎo)致輸液不良反應(yīng)之一“熱原樣反應(yīng)”的重要原因[14-16]。

3.2 pH 值風(fēng)險(xiǎn)分析 將長(zhǎng)春西汀注射液配制成臨床應(yīng)用的大輸液以后，隨著溶液pH 值的增加，不溶性微粒數(shù)迅速增加，其中倍增最多的是2～5 μm和5～10 μm 的微粒數(shù)，分別增加了約70 和50 倍。本研究中長(zhǎng)春西汀大輸液樣品配置的濃度約為0.04 mg/ml，試驗(yàn)過程中未發(fā)生大粒徑（≥25 μm）微粒倍增的現(xiàn)象。弱堿性藥物在酸性條件下易溶，在中性或堿性條件下易析出結(jié)晶，這類注射液在使用和配伍過程中的不溶性微粒變化應(yīng)引起重視。

此外，長(zhǎng)春西汀氯化鈉溶液與模擬人血液的培養(yǎng)基混合以后，產(chǎn)生了大量的不溶性微粒，2～5 μm 的顆粒數(shù)增加至原來的200 多倍，5～10 μm 的顆粒數(shù)增加至原來的60 倍，該結(jié)果與pH 值對(duì)長(zhǎng)春西汀氯化鈉溶液的不溶性微粒的影響是一致的。人體血液的pH 值在7.35～7.45 間，推測(cè)長(zhǎng)春西汀注射液在進(jìn)入人體血液后，隨著pH 值的改變，不溶性微粒數(shù)特別是小粒徑微粒會(huì)大量增加，由此帶來的安全風(fēng)險(xiǎn)值得關(guān)注。

3.3 溶媒風(fēng)險(xiǎn)分析 長(zhǎng)春西汀在不同溶媒中的不溶性微粒差異較大，以氯化鈉注射液和葡萄糖注射液為溶媒，不溶性微粒差異不大，但是溶媒成分越復(fù)雜，不溶性微粒數(shù)量有所增加，特別是在右旋糖酐40 氯化鈉注射液、碳酸氫鈉林格注射液中的不溶性微粒是氯化鈉注射液中的145 倍。因此，建議臨床上長(zhǎng)春西汀注射劑應(yīng)選擇氯化鈉注射液和葡萄糖注射液為溶媒。

3.4 配伍風(fēng)險(xiǎn)分析 長(zhǎng)春西汀注射液與中性（如胞磷膽堿鈉注射液、注射用阿奇霉素）或堿性樣品（如注射用阿莫西林鈉舒巴坦鈉、注射用氨芐西林鈉）配伍以后，不溶性微粒數(shù)顯著增加，倍增數(shù)量較大的是粒徑為2～5 μm 和5～10 μm 的不溶性微粒。因微粒所致熱原樣反應(yīng)和抗原樣反應(yīng)的可能性是存在的。因此臨床應(yīng)注意長(zhǎng)春西汀注射液使用過程中的配伍問題。

4 總結(jié)

長(zhǎng)春西汀注射液在臨床用藥過程中應(yīng)注意用法、用量和輸液中的配伍問題，如采用選擇氯化鈉注射液和葡萄糖注射液為溶媒，濃度不得過0.06 mg/ml，輸液速度不得大于80 滴/min，不得與其他藥物配伍使用，且用使用前后均應(yīng)沖洗輸液管道。