宮頸癌外照射對(duì)腸道菌群的影響

梁鈺霞,高 琨

(1.廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院產(chǎn)科,廣西 南寧 530021;2.廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院婦瘤科,廣西 南寧 530021)

微生物菌群出現(xiàn)菌群失調(diào)會(huì)增加有害代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和有害的抗原微生物表達(dá),通過(guò)促進(jìn)黏膜炎癥或系統(tǒng)失調(diào)、或可能改變抗癌免疫治療,而腫瘤內(nèi)、腫瘤附近和腫瘤遠(yuǎn)處的微生物可以通過(guò)多種機(jī)制改變癌癥的易感性和進(jìn)展,如調(diào)節(jié)炎癥、誘導(dǎo)DNA損傷和產(chǎn)生與腫瘤發(fā)生或腫瘤抑制相關(guān)的代謝物[1]。已有研究表明,宮頸癌患者和健康人的腸道菌群有顯著差異,腸道菌群的變化對(duì)婦科癌癥診療有影響[2]。目前關(guān)于16S基因測(cè)序?qū)邮芘枨环派渲委煹膶m頸癌患者腸道菌群變化的研究結(jié)論不一,且尚不清楚腸道菌群的變化與放射性腸炎、放射治療效果是否存在相關(guān)性。為避免宮頸癌內(nèi)照射治療陰道及宮腔操作帶來(lái)的影響,本研究將前瞻性探討外照射對(duì)宮頸癌患者腸道菌群的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2019年5月—2021年12月期間廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院婦瘤科初診病理檢查證實(shí)為宮頸癌ⅡA2～Ⅳ期患者67例的糞便樣本,年齡31～77歲,平均(52.8±9.9)歲;所有患者入組前7 d未使用類固醇、抗菌藥物者,且治療過(guò)程中未使用抗菌藥物及免疫抑制劑。排除標(biāo)準(zhǔn):合并高血壓、糖尿病、炎癥性腸病者及自身免疫性疾病者、曾有消化道手術(shù)史者;既往有盆腔放射治療或全身治療史者。所有患者均采用6 mVX線進(jìn)行調(diào)強(qiáng)放射治療和后裝治療,每周順鉑(40 mg/m2)同期化療。

本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò),所有患者知情同意并簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1樣本收集加工、基因測(cè)序 用引物341F(5′-CCTAYGGGRBGCASCAG-3′)和806R(5′-GGACTACNNGGGTATCTAAT-3′)在2720熱循環(huán)儀(美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司)上擴(kuò)增出16SrRNA基因V3～V4高變區(qū)。PCR擴(kuò)增程序?yàn)?98 ℃保溫2 min,98 ℃保溫30 s,50 ℃保溫30 s,72 ℃保溫1 min,共20個(gè)循環(huán),最后在72 ℃孵育5 min。反應(yīng)一式三份。反應(yīng)混合物(共50 mL)由2×TransStart FastPfu Fly PCR SuperMix(25 mL)、每個(gè)引物(1 mL/10 mm)、無(wú)酶水(20 mL)和模板DNA(10 Ng)組成。PCR產(chǎn)物用VAHTS DNA清潔珠純化。使用特殊的索引引物,在不同條件下進(jìn)行二次PCR。PCR擴(kuò)增程序?yàn)?98 ℃ 30 s,98 ℃ 10 s,65 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s,共10個(gè)循環(huán),72 ℃孵育5 min。反應(yīng)混合物(共50 mL)包括Phusion DNA聚合酶(25 mL)、I5/I7指數(shù)引物(1 mL/2.5 mmol/L)、超純水(13 mL)和純化的PCR產(chǎn)物(10 mL)。在1.8%瓊脂糖凝膠上分析反應(yīng)以確保擴(kuò)增成功。不成功的反應(yīng)在初始模板濃度稀釋10倍后重復(fù),如果再次不成功,則從實(shí)驗(yàn)中移除。從瓊脂糖凝膠中提取PCR產(chǎn)物,用AxyPrep DNA Gel Extract Kit(Axygen Biosciences,USA)進(jìn)一步純化,并用Tris-HCl洗脫。用Image J(美國(guó)馬里蘭州貝塞斯達(dá)國(guó)立衛(wèi)生研究院)對(duì)電泳結(jié)果進(jìn)行量化。文庫(kù)以等摩爾濃度混合,在1.8%瓊脂糖凝膠上溶解,提取目標(biāo)大小400～490 bp的條帶。在Illumina NovaSeq 6000平臺(tái)進(jìn)行配對(duì)末端測(cè)序(2×250)[3]。

1.2.2臨床資料采集 收集所有患者臨床信息(姓名、年齡、卡氏(Karnofsky performance status)評(píng)分、病理類型、人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)狀態(tài)、分期、外照射開始和結(jié)束時(shí)間)、療效指標(biāo)(治療前后血清腫瘤標(biāo)志物水平、放射治療后胃腸道反應(yīng)評(píng)分、MRI腫瘤大小、近期療效評(píng)價(jià)等),通過(guò)自身對(duì)照,將患者分為治療前組(T0組)與治療后組(T1組)。放射性腸炎診斷標(biāo)準(zhǔn)參考2018《放射性直腸炎診斷標(biāo)準(zhǔn)》。所有患者無(wú)出現(xiàn)3～4級(jí)放射性腸炎者,故將患者分為無(wú)放射性腸炎組(non-radioactive enteritis group,E0)和1～2級(jí)放射性腸炎組(radio-enteritis group,E1)。根據(jù)外照射前后MRI行近期療效評(píng)價(jià),腫瘤消退率=(放射治療前腫瘤體積V1-外照射治療結(jié)束前腫瘤體積V2)/放射治療前腫瘤體積V1×100%;Nam等[4]發(fā)現(xiàn)宮頸癌經(jīng)過(guò)外照射放射治療,腫瘤消退率≥75%是能區(qū)別除患者預(yù)后差異的最佳閾值。因此將腫瘤消退率≥75%視為有效組(the response to effective group,R1),腫瘤消退率<75%視為效果欠佳組(the response to ineffective group,R0)。

1.3生物信息學(xué)分析 將雙端測(cè)序數(shù)據(jù)加載到qiime2(version 2021-11)[5],用dada2(denoise-paired)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。最終生成擴(kuò)增子序列變體(amplicon sequence variants,ASV)豐度表和序列文件[6]。物種分類基于樸素貝葉斯方法(classify-sklearn)并以Greengenes數(shù)據(jù)庫(kù)參考序列(V201308)為訓(xùn)練集。過(guò)濾掉只在一個(gè)樣本并且豐度小于10(reads)的ASV,同時(shí)也過(guò)濾掉比對(duì)到非細(xì)菌的ASV。利用MAFFT方法進(jìn)行多序列比對(duì),構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹?；谶^(guò)濾后的ASV豐度表計(jì)算α多樣性和β多樣性。在PCoA中繪制了UniFrac距離矩陣,并使用R包“ADE4”進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與作圖。對(duì)于患病率>10%的分類群,在門、綱、目、科、屬、種水平上采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)進(jìn)行差異豐度分析。使用QIIME2(version 2021-11)進(jìn)行計(jì)算出α多樣性指數(shù)(包括Simpson指數(shù)、Shannon-entropy指數(shù)、Pielou-evenness指數(shù)、Chao1指數(shù)、Faith-pd指數(shù)、Observed-features指數(shù))、β多樣性指數(shù)(包括Bray-Curtis,jaccard、weighted UniFrac,unweighted UniFrac),其中,Observed species指數(shù)、Chao指數(shù)、Pielou-evenness指數(shù)、Faith-pd反映樣品中群落的豐富度,即簡(jiǎn)單指群落中物種的數(shù)量,而不考慮群落中每個(gè)物種的豐度情況,shannon指數(shù)以及simpson指數(shù)反映群落的多樣性;除simpson指數(shù)指數(shù)外,其余指數(shù)越大,說(shuō)明樣本中物種的多樣性越豐富。

圖8 放射治療前后R0與R1組間相對(duì)豐度存在顯著差異的腸道菌群A. p_Proteobacteria.c_Gammaproteobac-teria(P=0.002);B. o_Erysipe-lotrichales.f_Erysipelotrichaceae (P=0.040);C. o_Bacteroidales.f_Bacteroidace-ae(P=0.037);

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用R統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)和Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切率概率法。采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)計(jì)算Simpson指數(shù)、Shannon-entropy指數(shù)、Pielou-evenness指數(shù)、Chao1指數(shù)、Faith-pd指數(shù)、Observed-features指數(shù)。Bray-Curtis矩陣算法是考慮物種在組間的絕對(duì)豐度,其所反映的是物種間的距離;UniFrac矩陣算法則考慮進(jìn)了物種間的進(jìn)化關(guān)系,所對(duì)應(yīng)的為距離矩陣的權(quán)重算法(weighted UniFrac)。對(duì)應(yīng)矩陣的非權(quán)重算法(unweighted UniFrac)則是將原先算法的ASV豐度表的數(shù)值進(jìn)行二進(jìn)制轉(zhuǎn)化再進(jìn)行計(jì)算,其只考慮了物種在各個(gè)樣本間否存在,而不考慮物種豐度。對(duì)Bray-Curtis,jaccard、weighted UniFrac,unweighted UniFrac進(jìn)行ANOSIM分析檢測(cè)兩組樣品間是否有顯著性差異,找到組別中差異成分;使用線性分析效應(yīng)對(duì)細(xì)菌群落組成的相似性即β多樣性指數(shù)進(jìn)行計(jì)算,并確定治療前和治療結(jié)束后細(xì)菌屬的變化,選擇線性判別分析得分大于2的微生物群作為與放射治療相關(guān)的微生物群。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1患者臨床資料特征 根治性盆腔外照射治療患者72例,其中剔除信息不全者,共收集患者67例糞便樣本134個(gè)。宮頸癌臨床分期:Ⅱa2～Ⅲb期29例,Ⅲc1r～Ⅳb期38例;病理類型:鱗癌64例,腺癌3例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移38例,高危型HPV感染57例。

2.2外照射治療前后的腸道菌群變化

2.2.1外照射治療前后腸道菌群豐富度與多樣性的比較 樣本中總共獲得了2 844個(gè)ASV。其中,放射治療前組檢出2 620例(92.1%),外照射治療后組檢出2 271例(79.9%),治療前組和治療后組均檢出2 047例(71.9%)。T0組與T1組α多樣性指數(shù)即Simpson指數(shù)、Shannon-entropy指數(shù)、Pielou-evenness指數(shù)、Chao1指數(shù)、Faith-pd指數(shù)、Observed-features指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。即外照射治療前后腸道菌群豐富度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 治療前后腸道菌群α-多樣性指數(shù)比較

2.2.2外照射治療前后腸道菌群結(jié)構(gòu)的比較 經(jīng)ANOSIM分析結(jié)果顯示,β多樣性Bray-Curtis指數(shù)主成分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(R值=0.014,P=0.039),其主成分分析(PcoA-2D)(圖1),即外照射治療前后腸道菌群組成絕對(duì)豐度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

圖1 放療前后腸道菌群Bray-Curtis指數(shù)的PCoA 2D圖

表2 治療前后腸道菌群β-多樣性指數(shù)比較

2.2.3放射治療對(duì)患者的腸道菌群成分的影響 將ASV與數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì),進(jìn)行物種分類,分別在門、綱、目、科、屬、種幾個(gè)分類等級(jí)對(duì)各個(gè)樣品作物種profiling面積圖和柱狀圖,在門水平做出所有物種的柱狀圖,從綱水平開始,將物種豐度在所有樣品均低于0.5%的物種全部合并成其他物種,結(jié)果顯示,在放射治療前后腸道微生物菌群在“屬”水平上物種豐度更高(圖2)。放射治療前后之間不同富集的特定細(xì)菌門、綱、目、科和屬,顯示了放射治療期間腸道微生物群的組成變化(顯著差異是對(duì)數(shù)線性判別分析得分>2和Kruskal-WallisP值<0.05)(圖3)。其中發(fā)生最顯著的菌群相對(duì)豐度改變的細(xì)菌包括梭桿菌門、變形桿菌門;變形桿菌門、γ-變形菌綱、腸桿菌目、腸桿菌科的相對(duì)豐度降低,而梭狀芽胞桿菌類成員包括梭桿菌門、梭桿菌綱、梭桿菌目、梭桿菌科以及毛螺菌科的Dorea屬、韋榮球菌科的Anaerosinus屬、腸桿菌科的變形桿菌屬的相對(duì)豐度顯著升高。共篩選出7種菌群豐度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,分別為A變形菌門-γ變形菌綱(p-Proteobacteria.c-Gammaproteobacteria)(P=0.009)、B腸桿菌科-變形桿菌屬(f-Enterobacteriaceae.g-Proteus)(P=0.048)、C毛螺菌科-Dorea屬(f-Lachnospiraceae.g-Dorea)(P=0.044)、D韋榮球菌科-Anaerosinus屬(f-Veillonellaceae.g-Anaerosinus)(P=0.024)、E變形桿菌門(k-Bacteria.p-Proteobacteria)(P=0.007)、F腸桿菌目-腸桿菌科(o-Enterobacteriales.f-Enterobacteriaceae)(P=0.004)、G梭形桿菌目-梭桿菌科(o-Fusobacteriales.f-Fusobacteriaceae)(P=0.035),結(jié)果示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖4。

圖2 在外照射治療前后的糞便樣本中“屬”水平菌群分布

圖3 放射治療前后腸道菌群變化及差異

圖4 放射治療前后腸道中相對(duì)豐度存在顯著差異的菌群 A.p-Proteobacteria.c-Gammaproteobacteria(P=0.009);B.f-Enterobacteriaceae.g- Proteus(P=0.048);C.f-Lachnospiraceae.g-Dorea(P=0.044);D.f-Veillonellaceae.g-Anaerosinus(P=0.024);E.k-Bacteria.p- Proteobacteria(P=0.007);F.o-Enter-obacteriales.f- Enterobacteriaceae(P=0.004);G.o-Fusobacteriales.f- Fusobacteriace-ae(P=0.035)Figure 4 The intestinal flora with significant difference in relative abundance before and after external irradiation

2.3分層分析

2.3.1放射性腸炎與腸道菌群的關(guān)系

2.3.1.1放射性腸炎與腸道菌群豐富度及多樣性變化的關(guān)系 分別對(duì)E0組(n=42)、E1組(n=25)放射治療前后進(jìn)行對(duì)比分析,細(xì)菌群落豐富度由觀察到的ASVs確定,α多樣性分析結(jié)果顯示,E0與E1組在治療前后α多樣性指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 E0與E1組間在T0、T1時(shí)α多樣性指數(shù)比較

2.3.1.2E0、E1組間腸道菌群結(jié)構(gòu)的差異 采用Bray-curtis、Jaccard、Unweighted Unifrac和Weighted Unifrac四種距離矩陣Anosim分析方法,對(duì)E0、E1兩組放射治療前后β多樣性指數(shù)進(jìn)行顯著性分析,結(jié)果顯示,E0、E1組治療前后各組間β多樣性指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 E0與E1組間在T0、T1時(shí)β多樣性指數(shù)比較

2.3.1.3E0、E1組腸道菌群組成及差異分析 利用LEfSe確定了患者腸道微生物群的組成變化(顯著差異是對(duì)數(shù)線性判別分析得分>2和Kruskal-WallisP值<0.05),見圖5。圖6中顯示了放射治療期間E0和E1組間主要菌群相對(duì)豐度的變化,兩組共篩選出9種菌群豐度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,在放射治療前,E1組中厚壁菌門(P=0.029)、γ變形菌綱的氣單胞菌(P=0.033)、糞芽孢菌屬(P=0.046)的相對(duì)豐度最高,E0組中未發(fā)現(xiàn)相對(duì)豐度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的菌群;在放射治療后,E0組中放線菌目微球菌科(P=0.029)、羅氏菌屬(P=0.038),E1組中乳桿菌科(P=0.048)、擬桿菌門(P=0.025)、擬桿菌目S24-7(P=0.025)、布雷德菌屬(P=0.028)相對(duì)豐度增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖6。

圖5 放射治療前后E0與E1組間腸道菌群LEfSe分析A.放射治療前;B.放射治療后Figure 5 LEfSe analysis of in-testinal flora between E0 group and E1 group

圖6 放射治療前后E0與E1組間相對(duì)豐度存在顯著差異的腸道菌群

2.3.2腫瘤消退率與腸道菌群的關(guān)系

2.3.2.1腫瘤消退率與腸道菌群豐富度及多樣性變化的關(guān)系 腫瘤消退率<75%為治療效果欠佳(R0)組(n=18),腫瘤消退率≥75%為治療有效(R1)組(n=49),分別對(duì)R0、R1組放射治療前后進(jìn)行對(duì)比分析,結(jié)果顯示,R0、R1組治療前后α多樣性指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

表5 R0與R1組治療前后α多樣性指數(shù)比較

2.3.2.2R0組及R1組組間腸道菌群結(jié)構(gòu)的差異 采用距離矩陣Anosim分析方法,對(duì)放射治療前后腸道菌群結(jié)構(gòu)的差異進(jìn)行β多樣性指數(shù)顯著性分析,結(jié)果顯示,R0和R1組治療前后β多樣性指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表6。

表6 R0與R1組治療前后β多樣性指數(shù)比較

2.3.2.3R0組及R1組組間腸道菌群組成及差異分析 利用LEfSe確定了患者腸道微生物群的組成變化(顯著差異是對(duì)數(shù)線性判別分析得分>2和Kruskal-WallisP值<0.05),見圖7,在放射治療前,僅發(fā)現(xiàn)R0組中變形菌門變形菌綱(P=0.002)相對(duì)豐度較高,在放射治療后,擬桿菌(P=0.037)、毛螺菌科—Lactonifactor(P=0.037)、巴斯德菌(P=0.048)、丹毒絲菌(P=0.040)在R1組相對(duì)豐度較高。共篩選出5種菌群豐度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖8。

圖7 放射治療前后R0組與R1組腸道菌群LEfSe分析A.放射治療前;B.放射治療后Figure 7 LEfSe analysis of in-testinal flora between R0 group and R1 group

3 討 論

現(xiàn)已知某些細(xì)菌和病毒和癌癥有關(guān),胃腸道細(xì)菌的影響并不局限于消化道內(nèi)的癌癥,也被證明可以影響肝細(xì)胞癌的轉(zhuǎn)移,可能是通過(guò)細(xì)菌成分如脂多糖或間接地通過(guò)全身炎癥及先天免疫途徑轉(zhuǎn)移到肝臟[7]。亦有研究報(bào)道,由于腸道共生微生物的存在,系統(tǒng)性Th17炎癥因子或抗炎Treg因子被激活,可能改變?nèi)魏纹鞴俚陌┌Y風(fēng)險(xiǎn),包括宮頸、卵巢和子宮等[8-9]。

放射治療是宮頸癌治療中的主要手段之一。同步放化療是目前規(guī)范的宮頸癌放射治療模式。放化療對(duì)人腸道微生物菌群的不良影響已經(jīng)獲得數(shù)據(jù)的支持。一項(xiàng)采用16SrRna測(cè)序分析宮頸癌患者(n=8)和健康對(duì)照組(n=5)的腸道微生物區(qū)系,結(jié)果表明與宮頸癌相關(guān)的腸道微生物菌群在α多樣性指數(shù)有增加的趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);β多樣性指數(shù)分析表明癌癥患者與健康對(duì)照組之間的群體結(jié)構(gòu)的組間變異性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,宮頸癌患者糞便標(biāo)本中以變形菌屬最豐富,其中7個(gè)屬(大腸桿菌志賀菌屬、玫瑰桿菌屬、假單胞菌屬、梭狀芽孢桿菌屬、乳桿菌科UCG-004屬、多爾菌屬和琥珀酸桿菌屬)的相對(duì)豐度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)[10]。類似的研究表明,癌癥患者和健康人群兩組的胃腸道微生物菌群差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。癌癥患者治療前放線菌的相對(duì)豐度是健康人的30倍,而梭桿菌、變形桿菌的相對(duì)豐度分別是健康人的7.4%、1.4%[11]。也有發(fā)現(xiàn)在接受盆腔放射治療后的患者與健康人群相比,其腸道微生物群的豐度、多樣性普遍降低[12]。本研究前瞻性分析宮頸癌患者外照射前后腸道菌群的變化,結(jié)果顯示,放射治療前后α多樣性指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);β多樣性Bray-Curtis指數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說(shuō)明治療前后腸道菌群組成差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,發(fā)現(xiàn)放射治療后變形桿菌門、γ-變形菌綱、腸桿菌目、腸桿菌科的相對(duì)豐度降低,而梭狀芽胞桿菌類成員以及毛螺菌科的Dorea屬、韋榮菌科的厭氧菌屬、變形桿菌屬的相對(duì)豐度顯著升高。有研究發(fā)現(xiàn)厚壁菌門和梭菌經(jīng)放射治療后分別顯著減少10%和增加3%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)[11];另一研究發(fā)現(xiàn)放射治療期間腸道菌群組成發(fā)生明顯變化,變形桿菌增多,梭狀芽胞桿菌減少,但放射治療后這些菌群恢復(fù)到基線水平,而類桿菌種類增加[13]。有研究報(bào)道在放射治療后,宮頸癌患者腸道菌群中擬桿菌門的普雷沃菌明顯減少,而厚壁菌門的鏈球菌和梭狀芽胞桿菌明顯增多(P<0.05)[14]。由此可見,研究結(jié)果不一,較多研究發(fā)現(xiàn)接受放射治療后的腸道菌群豐度及多樣性是降低的。

本研究在放射性腸炎的分層分析中的結(jié)果與上述結(jié)果有相似之處,即在治療后及放射性腸炎組中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的菌群多為條件致病菌,且菌群種類相對(duì)增多;并而首次發(fā)現(xiàn)發(fā)生放射性腸炎的宮頸癌患者中,其腸道菌群以乳桿菌科、擬桿菌門、擬桿菌目S24-7科、f-Erysipelotrichaceae.g-Bulleidia為主。

目前尚無(wú)對(duì)腫瘤消退情況與腸道菌群變化相關(guān)性報(bào)道。在根據(jù)腫瘤消退率的分層分析中發(fā)現(xiàn),R0與R1兩組中腸道微生物菌群的豐富度α多樣性指數(shù)及β多樣性指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但可觀察到在放射治療期間,菌群的組成及相對(duì)豐度是有變化的。治療前,僅發(fā)現(xiàn)R0組中變形菌門、變形菌綱相對(duì)豐度較高;治療后,擬桿菌、Lactonifactor、巴斯德菌、丹毒絲菌(Erysipelotrichaceae)在R1組相對(duì)豐度較高。Erysipelotrichaceae是從屬于厚壁菌門的一種革蘭陽(yáng)性菌,其相對(duì)豐度與腫瘤壞死因子α水平及肝臟脂肪代謝水平呈正相關(guān),其特定分類群可能參與炎癥反應(yīng),而其他分類群具有高度的免疫原性[15]。因此Erysipelotrichaceae可能與代謝紊亂及炎癥具有一定相關(guān)性,本研究發(fā)現(xiàn)丹毒絲菌在經(jīng)放射治療后腫瘤消退率較高的患者腸道中相對(duì)豐度較高,其是否可以增加放射治療的抗腫瘤效果還有待進(jìn)一步的研究觀察,且有必要研究其代謝譜以及其豐度的變化對(duì)宿主的直接影響。

綜上所述,宮頸癌患者外照射前后腸道菌群結(jié)構(gòu)和組成均有顯著改變,此變化可能與增加放射性腸炎的發(fā)生有關(guān),并可能對(duì)近期治療效果產(chǎn)生一定影響。