亢學平 溫嘉偉 于婭 王鵬 張維東 楊大海 王娜 蔣思佳 張陽
摘 要:對采自長白山二道地區(qū)的兩株野生松杉靈芝(Ganoderma? tsugae? Murr.)進行馴化栽培試驗,結(jié)果表明:兩株松杉靈芝菌絲生長速度快,長勢好,菌絲顏色黃色,抗雜能力強;子實體形成較快,形態(tài)好,適合作為育種材料。
關(guān)鍵詞:松杉靈芝;組織分離;馴化栽培
松杉靈芝(Ganoderma? tsugae? Murr.)是一種名貴的藥材,具有增加免疫力、保肝解毒、改善心血管、抗衰老、美容等功效。隨著人們對松杉靈芝研究的深入,松杉靈芝的藥用價值被公眾廣泛認知,市場供不應(yīng)求,野生松杉靈芝的產(chǎn)量已經(jīng)遠遠不能滿足人們生產(chǎn)和生活需求。因此,開展松杉靈芝的仿野生栽培有巨大的市場潛力和社會效益[1,2]。本研究在對東北地區(qū)野生食藥用菌資源調(diào)查中發(fā)現(xiàn)兩株松杉靈芝,通過菌種分離及馴化栽培,成功獲得子實體,為松杉靈芝育種研究提供基礎(chǔ)材料。
1 材料和方法
1.1 試驗材料
野生松杉靈芝子實體于2020年8月,采集自吉林省長白山二道白河山區(qū)(海拔630~680m),子實體呈扇形、半圓形,邊緣白色,蓋面中間紅褐色至紫紅色(圖1)。經(jīng)組織分離、提純獲得純菌種,編號分別為SL1、SL2。
1.2 培養(yǎng)基配方
母種培養(yǎng)基配方:馬鈴薯100g,硬雜木木屑30g分開加水煮沸20min,紗布過濾,混合后的濾液加水定容至1000mL,加入葡萄糖20g,瓊脂粉15g,KH2PO43g,MgSO41.5g。
原種培養(yǎng)基配方:選用闊葉硬雜木木屑83%、麩皮15%、蔗糖1%、生石膏1%,含水量60%。
栽培種配方:選用闊葉硬雜木木屑83%,麩皮15%,石膏1%,蔗糖1%,含水量60%~65%[3]。
1.3 試驗方法
1.3.1 組織分離:將野生松杉靈芝子實體組織塊放入母種斜面試管培養(yǎng)基上,置于26℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)3~5天后,檢查雜菌污染情況,挑出菌絲生長致密、健壯的菌絲生長尖端接種到試管培養(yǎng)基中培養(yǎng),獲得純菌種。
1.3.2 菌種制作:按照1.2的培養(yǎng)基配方,進行高壓滅菌,冷卻后進行接種,接種溫度22℃~26℃予以培養(yǎng),接菌后5~7d檢查菌絲萌發(fā)及雜菌污染情況。
1.3.3 出芝管理:將菌包倒放,在其頂端5cm處開長5~8cm,寬1~1.5cm的口。覆蓋塑料薄膜和遮陽網(wǎng),保持棚內(nèi)的空氣濕度為70%~80%,溫度20℃左右均可,經(jīng)10~15d開口處出現(xiàn)芝蕾,長到2~3cm時,直接向芝蕾表面噴灑霧水,棚內(nèi)濕度可以保持在90%~95%,溫度要求25℃~30℃,散射光,CO2濃度調(diào)節(jié)到0.1%以下。
1.4 測試指標
記錄母種萌發(fā)時間、菌絲生長速度、長勢、菌絲體顏色、菌種長滿時間、菌袋顏色和污染率。
2 結(jié)果分析
2.1 菌絲生長
將接種后的試管置于培養(yǎng)箱內(nèi),25℃培養(yǎng),每隔2天觀察1次,并記錄接種數(shù)量、記錄菌絲長滿試管的時間,污染情況,成活率,結(jié)果見表3;觀察菌絲的粗度(粗、較粗、細)、生長勢(強、較強、弱)、疏密程度(密、較密、疏)培養(yǎng)結(jié)果顯示,接種3天后菌種萌發(fā),在試管中菌絲平均生長速度為0.8cm/d,原種和栽培種滿瓶和滿袋時間分別為35天和60天。
2.2 出菇情況
在出菇期間,栽培袋開口后3~5天,開口處菌絲恢復(fù),7天后長出原基,隨著原基膨大,分化形成子實體。通過對子實體農(nóng)藝性狀觀測,菌蓋大小和芝體形態(tài)與野生者相似,為扇形;菌蓋表面邊緣顏色淺,向內(nèi)顏色變深;菌孔深褐色。子實體的形成照片見圖2。3 結(jié)論與討論
本試驗采用東北地區(qū)的棚式代料地擺栽培方法及層架式擺放,成功獲得了子實體。溫室大棚內(nèi)栽培出芝時發(fā)現(xiàn),子實體的形成受溫度和濕度影響較大,溫度23℃~25℃,空氣相對濕度90%~95%時,子實體生長較快。馴化的松杉靈芝菌株菌絲長勢強、生長速度快,生育期短,菌蓋紅褐色,扇形,平均單袋干重高,分別為 35g/袋和33g/袋,為優(yōu)良菌種的選育提供依據(jù),對長白山珍貴種源保護及開發(fā)利用具有重要意義。
參考文獻
[1] 梁秀鳳,龐啟亮,梁延海.松杉靈芝林下栽培技術(shù)[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2017,(7):96.
[2] 孫巍巍,包海鷹.松杉靈芝提取物體外抗氧化活性的研究[J].中國食用菌,2010,29(6):39-41,51.
[3] 胡志強,王鑫,王旭.松杉靈芝母種培養(yǎng)基篩選及菌株對比試驗[J].中國林副特產(chǎn),2019,12(6):36-38.