湖南牡丹根腐病病原菌的分離鑒定及其拮抗菌的篩選

毛咪 呂長平 帥佳琪 石楊 秧拯民

摘 要：【目的】引發牡丹根腐病的鐮刀菌屬真菌種類繁多，且病害癥狀類似，難以判斷。為了探明引發湖南地區牡丹根腐病主要病原菌的種類，并為牡丹根腐病的診斷與生物防治提供理論依據。【方法】從湖南農業大學園林花卉基地采集患病牡丹植株，采用組織分離法分離純化病原菌，采用柯赫氏法則檢驗病菌分離物的致病性；分別以形態學、分子生物學方法對致病菌進行鑒定；采用平板對峙法對14 株前期從健康牡丹根莖部分離獲得的內生細菌菌株進行抑菌性篩選。【結果】在對分離所獲12 株病原真菌分離物的致病性的檢測中發現，其中的5 株在PDA 平板上的側根變黑腐爛且其周圍菌絲生長旺盛，其致病性均強；將此5 株致病菌置于PDA 平板上培養7 d 后觀察發現，其菌落呈圓形，顏色呈灰白色，氣生菌絲較密集且呈革質膠狀；致病菌菌絲中含有大量的大、小型分生孢子，大型分生孢子呈鐮刀形，具有3 ～ 5 個隔膜，小型分生孢子呈卵形或腎形，具有0 ～ 1 個隔膜；厚垣孢子呈球形且多為間生狀。結合運用分子生物學方法，基于ITS 序列分析，構建了5 株致病菌的系統發育樹，5 株分離物全部被鑒定為茄病鐮刀菌Fusarium solani。平板對峙培養結果表明，14 株內生細菌菌株中有9 株能拮抗茄病鐮刀菌，其中編號為MRX2-1 的細菌菌株其拮抗效果最佳，達到了52.78%；基于16S rRNA 基因序列對此株菌株的進一步分析結果表明，編號為MRX2-1 的拮抗菌與Bacillus amyloliquefaciens（HM107808.1）聚于同一分支中，其相似度高達99% 以上。【結論】初步鑒定結果表明，湖南地區牡丹根腐病的主要病原菌為茄病鐮刀菌，最佳拮抗菌為解淀粉芽孢桿菌。

關鍵詞：牡丹根腐病；茄病鐮刀菌；內生拮抗細菌；鑒定與篩選；湖南地區

中圖分類號：S685.11 文獻標志碼：A 文章編號：1003—8981（2023）02—0290—09