羊常見寄生蟲病診斷試驗及相應有效防控措施

李 艷

羊常見寄生蟲病包含類型較多而且比較復雜，這不僅對羊的生長發育和生產性能產生不良影響，還會嚴重危害人體健康。因此，加強對羊常見寄生蟲病的防治具有重要意義。不過在實際工作中，由于各種原因導致一些地區或養殖場的羊群感染了寄生蟲病而沒有得到及時有效的診治，給養羊業造成了不小的經濟損失。本文以青海省海北州門源回族自治縣為例，對羊常見寄生蟲病展開診斷，并提出相應的治療措施。

一、材料與方法

1、試驗材料

①調查對象

為了更好地了解當前的養殖狀況，我們在2018 年1 月到2019 年12 月期間，對一年內沒有接受過驅蟲治療的30 只羊，以及其他60 只羊，分別進行了編號標記。此外，我們還在每月的10 日到15 日期間，通過直腸釆糞和靜脈采血的方法，對蟲卵的數量進行了動態監測，并對其進行了血清抗體檢測。

②試驗器材

這些工具包括：玻璃容器、濾紙、滴管、離心機、恒溫培養箱、顯微鏡、燒杯、培養皿、小木棍、銅篩或多層紗布、蟲卵計數儀、解剖刀、搪瓷盤、鑷子、手術剪、平皿和挑蟲針。

2、調查方法

①糞便檢查

在每個月的早晨，我們會收集羊的新鮮糞便，并將其標記在紙上，然后運送到實驗室。我們會使用沉淀法、飽和鹽水漂浮法、毛蚴孵化法和貝爾曼氏法來評估它們的健康狀況，并根據這些結果來決定評估標準。

將10g 的糞便樣本放入一個容器，加入適量的水，攪拌均勻，將容器的水加到10～20 倍，在室溫下靜置20min，然后將上層的清液傾掉，重復這一步驟，直到上層的清液變得透明，最后將一定數量的沉淀物滴在顯微鏡下，以檢測比重超過水的蟲卵。

將10g 的糞便樣本放入燒杯中，加入10～20 倍的飽和鹽水，混合均勻，然后把混合液過濾到漂浮瓶中，使其略微超出瓶口，然后把載玻片放在瓶口，確保沒有任何氣泡，在室溫下靜置20min，最后快速把載玻片拿起來，翻轉，以此來檢測比重超過飽和鹽水的蟲卵。

從糞便樣本中取出10g，放入燒杯中，按照上述沉淀方式，將其混合，然后倒入孵化瓶，再用30℃的溫水加到瓶頸處，放置在25～28℃的環境中，讓其受到充足的光照，每隔1h、3h、5h，對孵化過程的結果進行觀察，為了更好地觀察，應當使用黑色背景，并朝著光源，檢查1cm 水域內是否存在快速直線移動的小白點（如針尖大小、菱形、乳白色或半透明）。通過這種方法，我們可以發現許多寄生蟲，如血吸蟲和毛蚴。使用乳膠管將漏斗和試管相連，在漏斗內放置糞篩，然后將其懸掛在架子上，再倒入40℃的溫水，直到達到中心，然后把被檢測的糞樣放置1～3 小時，使得大多數的幼蟲能夠移動到試管的底部，最后把試管的上層液體抽走，取出管底的沉淀物，進行顯微鏡檢查，最終從糞便中分離出幼蟲。

②體外檢查法

采用綜合的臨床表現、觸覺感受以及局部顯微鏡檢查，我們可以有效地檢測出羊只身上的寄生蟲，如螨、蠅蛆等。

③剖檢法

對待剖羊只進行詳細的編號，并對它們的全身進行蠕蟲學剖檢，以確定每個器官內的蟲體和數量，然后將樣本浸泡在75%的酒精溶液中，對吸蟲和絳蟲進行染色，對其他的則采用正確的方式處理，最終對檢測結果進行統計。

④血清學檢測

每月，我們都會使用Dot-ELISA 三聯診斷試劑盒（羊肝片吸蟲、東畢吸蟲和捻轉血矛線蟲）對每只羊進行血清學檢測，以確保它們的健康狀況。

二、結果與分析

羊的寄生蟲種類繁多，包括體內寄生蟲、體外寄生蟲以及絳蟲34 種，其中以牦牛莫尼茨絳蟲、仰口裂頭蚴、班氏絲蟲三種為常見種類，而且還可能出現其他種類的寄生蟲，如捻轉血矛線蟲、細頸囊尾蚴等。羊的健康受到了寄生蟲的嚴重威脅，它們會侵入人體的腸道，造成腹瀉和消化不良，并且會影響它們的攝食量和飼料的使用效率。此外，它們還會侵入人體的肌肉組織，造成貧血、消瘦甚至死亡。寄生蟲病在當地羊的飼養管理水平相對落后，加上當地農牧民群眾缺乏科學知識和技術指導，使得寄生蟲病在當地羊的傳播蔓延更加迅速，從而導致肝炎、肝硬化等癥狀的發生。因此，加強對該地區羊寄生蟲病的監測和預防工作至關重要，以確保羊群健康。

三、羊寄生蟲病的診斷

1、寄生蟲的PCR 檢測

PCR 檢測可以準確地識別寄生蟲的種類和感染程度，操作簡單方便，具有極高的實際應用價值。然而，它也存在一些局限性，比如無法直接從糞便中提取蟲卵，應通過離心處理才能獲得更加純凈的蟲體。核酸等溫擴增技術（ITS）具有極高的靈敏度和快速性，它不僅可以取代傳統的PCR，而且還可以用于定性分析蟲卵，從而提供更加準確的結果。例如，通過利用hda、remax 和pcr 三種不同的等溫擴增技術，如利用解旋酶、限制性內切酶和聚合酶鏈式反應，能夠有效地檢測出蟲卵的存在。通過使用特定的酶，可以在特定的溫度條件下對待測樣品中的基因組進行分析，并使用合適的引物和探針對其進行擴增，以實現研究目標。

另外，高通量測序技術的快速發展也為寄生蟲的快速和高效檢測提供了新思路。目前，已經有多種方法被應用到寄生蟲的快速檢測上。其中包括：第一，通過使用特定的核酸提取試劑盒，可以從樣本中提取出基因組DNA。第二，通過巢式擴增技術來獲得這些DNA。第三，通過實時熒光定量擴增技術來獲得這些DNA。第四，通過多重擴增技術來獲得這些DNA。雖然這些方法各有其優勢和不足，但它們都可以滿足寄生蟲檢測的需求。隨著科學技術的發展，多通量測序（Multiplex Sequencing）已成為一種先進的分子生物學技術，它的優勢在于靈敏度極高、特異性極強、操作簡單易行，使其成為一種理想的病原體檢測手段。基于MLVA 技術，可以有效地利用16S、gyrB、rpoE 和ITS 序列作為擴增位點，結合合理的引物配置和精確的反應條件，提升了它們的特異性和靈敏度。

2、體液游離寄生蟲DNA 在診斷中的應用

DNA 分子在人體內可以通過血液、尿液或其他方式被檢測到，這些分子包括血型抗原、抗凝血因子、補體系統和免疫球蛋白。此外，人類和動物的身體也可以檢測到一些寄生蟲的核酸，但這些數量非常有限。由于其高度的保守性，DNA 基因在診斷寄生蟲感染方面發揮著重要的作用，目前已經發現了多種不同種類的寄生蟲，包括弓形蟲、隱孢子蟲、蛔蟲、鞭毛蟲、阿米巴原蟲等，這些基因都可以用來進行檢測。“蟲源性”（parasitic）DNA是指從昆蟲的身上分泌出來的“蟲源性”DNA，它們是昆蟲的身體內部的組成部分，經過昆蟲的消化和吸收，最終形成的“內源性”（endogenous）DNA 是昆蟲的身體內部的組成部分。這項先進的技術能夠迅速、精準地識別出宿主體內的寄生蟲，并且能夠根據患者的血液、血清、尿液等樣本，準確評估宿主的感染情況，為臨床提供更加精準的治療建議。這種先進的技術擁有極強的特異性和靈敏性，可以準確地檢測各種寄生蟲，如瘧原蟲、弓形蟲、蛔蟲，并且已經被廣泛地應用于臨床實踐和流行病學研究。

四、羊寄生蟲病治療方法

1、體內寄生蟲病

在治療體內寄生蟲時，首先需要確定病原體的種類，然后根據病原體的特性選擇合適的驅蟲藥物。常見的驅蟲藥物包括ABZ、LEM、IPM 和PYD，其中阿苯達唑的效果最佳。例如，鼻蠅蛆病可能會在鼻腔內繁殖，因此可以使用阿苯達唑來控制它。如果它在口腔中繁殖，則需要使用左旋咪唑或阿苯達唑。如果它在肺部繁殖，則需要使用吡喹酮來控制它。當羊患上嚴重疾病時，它們可能會出現打噴嚏、咳嗽和流眼淚等癥狀。在這種情況下，注射伊維菌素和地塞米松是一種緩解方法。為了有效地治療這種疾病，建議采取兩種不同的方法：肌肉注射和靜脈滴注。建議將注射點放置在羊的后臀部，最佳的注射時機是傍晚或清晨，每次注射的劑量建議控制在0.5mL，并且要持續注射3d。靜脈滴注是一種有效的治療方式，它需要將藥劑注射到血管內，通常在一次注射的1～2mg 的劑量內，持續滴注4 小時。此外，還有其他的治療方法，如使用口服藥物，如敵百蟲，按照0.6%的濃度進行配制，每天兩次，連續使用7 天。

2、體外寄生蟲病

與體內寄生蟲病相比，體外寄生蟲病更加普遍，它們的種類多樣，從螨、虱子、蜱蟲等，都能夠侵入人體，給人們帶來極大的威脅。雖然體外寄生蟲的治療效果可以被直接觀測，但它們的病因仍有待進一步研究，只有經過實驗室檢測，才能夠準確地診斷出病因，從而采取有針對性的治療措施。體外寄生蟲的種類眾多，每個物種都有自己獨特的特征，這就決定了它們的治療方式各不相同。比如，羊蜱屬于節肢動物門蛛形綱蜱目，而羊螨屬于蛛形綱蜱科，這兩者之間的區別就顯得尤為明顯。這兩種寄生蟲都能夠導致羊只出現瘙癢癥狀，如果不能及時發現，可能引發更為嚴重的后果。由于這種寄生蟲的傳播速度極快，一旦發現，就會導致整個養殖場的羊群受到嚴重的危害，甚至危及人類的健康。因此，為了防止病毒的蔓延，最佳的治療方法就是采用滅蟲丁粉藥物，它既可以有效地消滅寄生蟲，又不會給周邊的環境帶來任何污染。根據羊的體重，藥物的使用量應恰當，一般建議10mg/kg，并且至少要持續噴灑3 次，以獲得最佳療效。

五、羊寄生蟲病預防措施

1、早期驅除病蟲害

首先，對羊體內寄生蟲進行預防性驅蟲，這是一種比較經濟實惠而又行之有效的方法。其主要包括以下幾個方面：為了保護羊的健康，建議在春秋兩季分別對它們進行驅蟲。此外，在春末夏初季節，還建議給它們投放阿苯達唑、吡喹酮等驅蟲藥。另外，定期清理圈舍內的糞便，并將其統一發酵，然后放入農田中，以減少糞便中的蟲卵數量。其次，為了保證放牧的安全，建議不要去那些容易受蜱叮咬的地方。同時，也需要密切關注羊的健康情況，如果出現問題，立即采取適當的措施來解決。最好將驅蟲工作集中在下半年，這樣能夠更好地達到預期的效果。再次，為了防止寄生蟲疾病的發生，應加強對動物的飼養管理，并且要改善它們的環境條件，以便在根本上阻止它們的繁殖。最后，還需要重視藥物使用問題，嚴格按照說明書規定劑量用藥，切不可盲目加大用量或增加服藥次數。

2、水源管理

羊的大多數寄生蟲都是通過外部環境感染的，因此做好水源管理工作至關重要。首先，為了確保飲用水的安全性，應確保它是干凈、衛生的，沒有任何雜質或污染物。此外，還需要定期更換水槽中的水，以防止細菌、病毒等微生物的滋生，從而避免寄生蟲病的發生。為了確保飲用水的安全性，相關人員應定期進行檢測。特別是在夏季高溫季節，應特別注意飲用水的溫度，以防止寄生蟲卵的死亡。同時，也要注意飲用水是否被糞便所污染，如果有，會使得幼蟲發育速度加快，進而引起疾病暴發。最后，為了保護水質，相關人員應定期更換水源，以防止寄生蟲對水質造成影響，降低發病率。此外，還應定期對水源進行消毒處理，以殺滅水中可能存在的病原體，減少疾病傳播途徑。具體來說，可以使用漂白粉或生石灰水浸泡水源，然后將其倒入池塘內，這樣既可以殺死水中的寄生蟲，又不會給人們帶來危害，一舉兩得。

3、治理糞污

糞便污染嚴重，它們包括寄生蟲、細菌、病毒、真菌等，這些污染物可能會對動物的健康造成嚴重的危害。因此，養殖戶應采取措施，加強對動物糞便的管控，防止它們滋生出傳染性疾病。首先，為了保證養殖業的健康發展，養殖戶應在每天早晨喂食前清理糞便，并將剩余的飼料殘渣進行發酵處理。這樣不僅可以消除飼料中可能攜帶的寄生蟲，還能提高飼料的利用率。其次，為了保證動物的健康，養殖戶應定期清理和消毒圈內的環境。這包括及時處理糞便和垃圾，避免蚊蠅繁衍。在一些特殊的區域，比如角落，可以使用殺蟲劑來控制它們的活動，或者使用蒼蠅拍來驅散它們。最后，如果環境允許，養殖戶應盡量選擇一種有效、安全的除臭劑，因為這種產品可以有效防止氣體污染，避免引發呼吸道疾病。此外，還可以采取一些有效的化學處理措施，比如利用氧化反應來消滅害蟲卵和幼蟲，從而達到有效控制害蟲的目的。

4、抗性基因篩查

研究寄生蟲耐藥性基因的熱點已經變得越來越明顯，目前已經有多種方法可以用來檢測和鑒定蟲體是否攜帶耐藥基因，其中包括PCR 技術、DNA 測序法以及蛋白質印跡法等，這些技術可以有效地幫助更好地防控寄生蟲。然而，這些方法存在一些缺陷，例如成本高昂、耗時較長、操作繁瑣等。相比之下，基于核酸擴增的Sanger 雙脫氧末端終止法則克服了這些缺陷，具有簡單快捷、靈敏度高等優點，可以用于多種寄生蟲的檢測。Pfcrt 基因在惡性瘧原蟲的分離株中表現出穩定的表達，并且可以作為一種有效的標記，用來區分感染者和未感染者。在帶科絳蟲六鉤蚴宿主細胞染色體上，pfcrt 基因的表達可以通過三種方式實現：一是由5 段非編碼區組成的保守區域，另一個是由10 個核苷酸堿基構成的開放閱讀框，第三個是由48 個核苷酸堿基構成的開放閱讀框，這些基因的表達可以幫助更好地了解瘧原蟲的特征和功能。“CON”（Contig）、“RELATIVED”（Repeat）和“FUNGUM(Fragment)”是三個開放閱讀框，它們涵蓋了多種寄生蟲的基因組信息，包括線粒體基因組、轉錄組學等，為Sub-I 提供了豐富的資料。通過對寄生蟲特征及其與宿主間的關系的全面研究，可以制定出更加科學合理的防控措施，以有效地防治寄生蟲病害。研究表明，盡管宿主的免疫系統可以抵御某些寄生蟲的侵害，但是這種抵抗能力會因地域、氣候等因素而發生變化。為了更好地了解這種變化，研究了三種常見的寄生蟲（肝片吸蟲、細頸囊尾蚴及捻轉血矛線蟲），并進行了比較，以探究它們的差異。通過對比分析，發現在不同的季節，綿羊體內三種寄生蟲的感染率會發生顯著的變化，這將為當地綿羊寄生蟲病的防治提供重要的科學支持。

綜上所述，羊寄生蟲病的防治一直是畜牧業發展中亟待解決的難題之一。只有充分認識到寄生蟲病的危害性，才能采取有效的綜合防治措施，保障羊群健康生長。