血清HBV-DNA 聯合免疫球蛋白檢測對慢性乙型肝炎診斷的臨床價值

許 婷，李媛媛

（宜春市中醫院檢驗科，江西 宜春 336000）

慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B）是我國常見傳染性病之一。該病由乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染所致，其病情復雜、傳染性強，不僅可引發肝功能持續性損傷，導致肝硬化等不良結局，對公共衛生安全亦存在較大威脅，其早期診斷具有重要意義[1，2]。近年來，乙肝病毒-脫氧核糖核酸（HBV-DNA）一直為HBV 復制與傳染的直接標記物，其血清含量可有效反映體內HBV 的感染與復制狀態，在乙肝診斷及其病情評估中可發揮重要作用[3，4]。此外，有研究顯示[5，6]，慢性肝炎與機體體液免疫功能存在密切相關，而HBV 感染可引發體液免疫功能亢進，導致免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）異常表達。基于此，血清免疫球蛋白檢測可一定程度上反映乙肝疾病的發生與發展狀態，對該病診斷具有重要意義。現階段，血清HBV-DNA 與免疫球蛋白檢測在慢性乙肝診斷中獲得廣泛應用，但關于二者聯合診斷的應用報道相對較少。對此，本研究結合2022年3 月-2023 年3 月宜春市中醫院收治的70 例慢性乙肝患者及70 例同期體檢健康者，分析血清HBVDNA 聯合免疫球蛋白檢測對慢性乙型肝炎的診斷價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2022 年3 月-2023 年3 宜春市中醫院收治的70 例慢性乙肝患者為研究對象，設為乙肝組。該組男38 例，女32 例；年齡24～65 歲，平均年齡（49.15±5.63）歲；病情嚴重程度：輕度32 例，中度27 例，重度11 例。另選取70 例同期體檢健康者，設為健康組。該組男36 例，女34 例；年齡25～68歲，平均年齡（49.30±5.71）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05），可對比。所有研究對象知情且自愿參加，簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 乙肝組 納入標準：①均符合慢性乙肝診斷標準[7]；②病歷資料完整；③近期未接受抗乙肝治療。排除標準：①急性肝炎、肝癌等其他肝病患者；②合并其他炎癥性疾病者；③免疫系統疾病及血液系統疾病者；④妊娠及哺乳期患者。

1.2.2 健康組 納入標準：①體檢資料完整；②肝功能指標正常；③近期未服用免疫抑制劑藥物。排除標準：①妊娠及哺乳期女性；②內分泌系統異常者。

1.3 方法

1.3.1 血清HBV-DNA 檢測 抽取空腹外周血2 ml，行堿裂解法對HBV-DNA 進行提取，隨后采用熒光定量PCR 儀（美國伯樂，Bio-Rad CFX96 型）進行檢測，程序：50 ℃變性2 min、94 ℃變性5 min、93 ℃復性30 s、60 ℃延伸1 min，共40 個循環，反應結束后，計算HBV-DNA 病毒載量。診斷標準：HBV-DNA＜1×103copies/ml 為陰性，HBV-DNA≥1×103copies/ml 為陽性。

1.3.2 血清免疫球蛋白檢測 抽取空腹靜脈血4 ml，離心（3000 r/min，15 min）后，分離血清，通過全自動生化分析儀（日本日立，HITACHI 7600 型）與相關試劑，采用免疫比濁法對免疫球蛋白IgG、IgA、IgM指標進行檢測。診斷標準：IgG 水平7～16.6 g/L 為陰 性，IgA 水 平0.71～3.85g/L 為 陰 性，IgM 水 平0.4～3.45g/L 為陰性，超過以上范圍評定為陽性。

1.4 觀察指標 ①比較乙肝組與健康組的血清HBVDNA 與免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平；②比較血清HBV-DNA、免疫球蛋白及聯合檢測對乙肝的陽性檢出率；③比較不同病情程度患者的血清HBVDNA 與免疫球蛋白水平。

1.5 統計學方法 采用SPSS 21.0 軟件進行數據處理，計量資料以（±s）表示，組間比較行t檢驗，計數資料以[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗，P＜0.05 表明差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乙肝組與健康組的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較 乙肝組血清HBV-DNA 與免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平均高于健康組（P＜0.05），見表1。

表1 乙肝組與健康組患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較（±s）

表1 乙肝組與健康組患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較（±s）

2.2 血清HBV-DNA、免疫球蛋白及聯合檢測對乙肝的陽性檢出率比較 血清HBV-DNA 與免疫球蛋白聯合檢測的乙肝陽性檢出率高于其單獨檢測（P＜0.05），見表2。

表2 血清HBV-DNA、免疫球蛋白及聯合檢測對乙肝的陽性檢出率比較[n（%）]

2.3 不同病情分級患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較 不同病情分級患者的血清HBVDNA 與免疫球蛋白水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05），其血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平由高至低依次為重度＞中度＞輕度，見表3。

表3 不同病情程度患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較（±s）

表3 不同病情程度患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較（±s）

3 討論

HBV 屬于嗜肝DNA 病毒，其HBV-DNA 數量可以有效反映體內的HBV 攜帶狀態，是評價機體HBV 感染程度的最直接指標，具有特異性高、靈敏性強等特點，對乙肝疾病活動程度及病毒傳染性均具有良好評估作用；但HBV-DNA 檢測儀器昂貴，實驗室要求較高，基層推廣較困難，應用局限性較大[8，9]。研究認為[10，11]，HBV 感染可引起機體免疫性病理損害，而免疫球蛋白作為體內免疫反應的重要參與物，其表達水平與HBV 感染引起的肝臟炎性損傷存在密切關聯，可一定程度反映體內HBV 的復制能力，對慢性乙肝等疾病具有積極檢測價值。目前，IgG、IgA、IgM 為人體常見免疫球蛋白類型。其中，IgG 血清含量最高，其親和力高、分布廣泛，是機體再次免疫應答產生的主要抗體[12，13]。IgA 血清含量僅次于IgG，可與Fc 受體相互作用，影響免疫效應細胞的表達[14]。IgM 則是體內血清含量最少的免疫球蛋白，屬于親細胞抗體，是引發起Ⅰ型超敏反應的重要參與物[15]。以上指標水平與機體肝細胞受損程度密切相關，對乙肝等疾病的發生、發展具有積極檢測價值。

本研究結果顯示，乙肝組血清HBV-DNA 與免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平均高于健康組（P＜0.05），該結果表明，慢性乙肝患者的血清HBVDNA 含量較健康者明顯增多，其免疫球蛋白水平呈異常增高表達。由此可見，血清HBV-DNA 與免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）對該病篩查具有確切檢測價值。血清HBV-DNA 與免疫球蛋白聯合檢測的乙肝陽性檢出率高于其單獨檢測（P＜0.05），表明血清HBV-DNA 聯合免疫球蛋白檢測可有效提高慢性乙肝的陽性檢出率。究其原因為，血清HBV-DNA定量檢測僅可精確到一個數量級上，準確性較差，且易受到藥物治療及病毒變異等因素的影響，整體檢出作用有限[16，17]。而免疫球蛋白檢測則可間接顯示機體體液與細胞免疫功能的發展變化，有利于肝功能損傷的動態評估，可為肝病的檢出診斷提供可靠實驗室依據[18，19]。基于此，將血清HBV-DNA 結果與免疫球蛋白指標進行綜合評判，可顯著提高慢性乙肝的陽性檢出效果。此外，不同病情分級患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05），其血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平由高至低依次為重度＞中度＞輕度，提示不同病情程度患者的血清HBV-DNA 與免疫球蛋白水平存在顯著差異。分析原因為，HBV-DNA 是反映HBV 病毒數量的直接指標，其血清含量越高，提示病毒復制能力越強，與患者病情的嚴重程度密切相關[20]。與此同時，慢性乙肝患者多伴有B 細胞功能異常、抗原遞呈能力受損及特異性T 細胞功能缺陷等狀況，由此可導致特異性免疫應答減弱，致使機體清除病毒的同時，引發肝臟炎性損傷，導致病情加重[21，22]。因此，機體免疫球蛋白水平的升高與其肝損傷程度具有重要關聯，可一定程度上反映患者的病情嚴重程度，對其疾病發展及預后判斷具有積極評估價值。

綜上所述，血清HBV-DNA 與免疫球蛋白檢測在慢性乙肝診斷中具有確切應用價值，二者聯合檢測可提高乙肝陽性檢出率，對其病情嚴重程度具有一定評估作用。