靈芝降糖方對2型糖尿病患者炎癥及免疫作用機制研究

2023-11-28 06:16:16周海姍張曾袁莎莎姚衛國楊宏杰

廣州中醫藥大學學報 2023年12期

周海姍，張曾，袁莎莎，姚衛國，楊宏杰

（1.上海中醫藥大學附屬岳陽中西醫結合醫院內分泌科，上海 200437；2.上海市第六人民醫院金山分院腎內科，上海 201599）

糖尿病（diabetes mellitus，DM）是由環境、遺傳等多方面因素引發的慢性代謝性疾病，主要特征為高血糖以及不同程度的胰島素分泌不足而引起的不良癥狀，其中大約有90%為2 型糖尿病（T2DM）[1]。隨著社會經濟的不斷發展以及人們生活水平的不斷提高，我國居民的肥胖率越來越高，糖尿病的發生率也因此出現持續增長趨勢[2]。T2DM 的主要病機為“本虛標實、虛實夾雜”。疾病初期，以燥熱為標，陰虛為本；消渴日久，燥熱傷津耗氣，可出現氣陰兩虛等證[3]。糖尿病并發癥多發，可涉及機體內多個臟器，導致肝臟、腎臟、心腦血管等疾病的發生，從而嚴重影響了患者的身體健康和生活質量，嚴重者可導致殘疾或者死亡，給患者家庭和社會帶來沉重的負擔[4]。靈芝降糖方有益氣養陰、滋腎健脾功效，研究[5-6]證明，其在降血糖方面作用顯著，同時對倦怠乏力、口燥咽干等癥狀也有確切的改善作用，可有效促進T2DM 患者病情的恢復。基于此，為進一步探討靈芝降糖方對T2DM 患者的療效機制，本研究采用隨機對照方法，觀察了靈芝降糖方對T2DM 肝腎陰虛證患者的炎癥及免疫作用機制。現將研究結果報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象及分組選取2021 年1 月～2022 年2 月上海中醫藥大學附屬岳陽中西醫結合醫院內分泌科收治的80 例T2DM 肝腎陰虛證患者為研究對象。根據就診先后順序，采用隨機數字表法將患者隨機分為對照組和觀察組，每組各40 例。本研究符合醫學倫理學要求并通過上海中醫藥大學附屬岳陽中西醫結合醫院倫理委員會的審核批準（批準號：2021-126）。

1.2 診斷標準西醫診斷標準：參照中華醫學會糖尿病學分會制定的《中國2 型糖尿病防治指南（2020 年版）》[7]中T2DM 的診斷標準。中醫辨證標準：參照中國醫師協會中西醫結合醫師分會內分泌與代謝病專業委員會制定的《2 型糖尿病病證結合診療指南》[8]及《中藥新藥臨床研究指導原則（試行）》[9]中消渴病肝腎陰虛證的辨證標準。主癥：五心煩熱，口干夜甚，脅痛，腰膝酸軟；次癥：低熱顴紅，眩暈耳鳴，手足抽搐，皮膚干燥，雀目，小便頻數，渾濁如膏；舌脈：舌紅、少苔，脈細數。具備一項以上主癥和不少于兩項次癥，結合舌脈象，即可辨證為肝腎陰虛證。

1.3 納入標準①符合上述T2DM診斷標準；②中醫證型為肝腎陰虛證；③年齡30～75 歲，性別不限；④使用胰島素（＞0.6 U/kg）并以二甲雙胍為基礎，聯合其他一到兩種降糖藥物治療，且劑量穩定，連續用藥不少于2 周，但血糖控制欠佳[7.5 mmol/L ≤ 空腹血糖（FPG）≤ 10.0 mmol/L，7% ≤糖化血紅蛋白（HbA1c）≤100%]；⑤自愿參加本研究并簽署知情同意書的患者。

1.4 排除標準①不符合納入標準的患者；②患有精神性疾病，不能配合研究的患者；③妊娠期或哺乳期婦女；④伴有心、肺、肝、腎等重要器官嚴重疾病的患者；⑤依從性差，未按規定方案進行治療，或自行加用其他治療措施，從而影響療效判定的患者。

1.5 治療方法

1. 5. 1 基礎與常規治療 2組患者均給予基礎與常規治療。（1）基礎治療：包括給予醫學營養質量控制和生活指導，進行糖尿病飲食（膳食中熱量來源：脂肪低于30%，碳水化合物50%～60%，蛋白質15%～20%，食鹽攝入量限制在每天6 g 以內），降低糖分、脂肪的攝入量，同時進行適當的運動和保持良好的作息規律。（2）常規治療：所有患者入組前的常規治療（包括降壓、降糖、調脂等）用藥保持不變。

1.5.2 觀察組在常規治療的基礎上給予靈芝降糖方顆粒劑治療。靈芝降糖方的藥物成分：靈芝18 g，黃芪15 g，女貞子15 g，肉蓯蓉15 g，太子參15 g，山藥15 g，茯苓15 g，烏梅9 g，玄參9 g，桑葉9 g，玉竹9 g，天冬9 g，麥冬9 g。上述中藥采用江陰天江藥業有限公司生產的顆粒劑（每劑中藥制成2袋顆粒劑）。每次1袋，每天2次，用溫開水沖服。30 d為1個療程。

1.5.3 對照組在常規治療的基礎上給予靈芝降糖方安慰劑顆粒治療。用法：靈芝降糖方安慰劑顆粒（外觀與靈芝降糖方顆粒一致，但只相當于1/10靈芝降糖方的劑量），每次1袋，每天2次，用溫開水沖服。30 d為1個療程。

1.6 觀察指標

1.6.1 中醫證候評分根據《中藥新藥臨床研究指導原則（試行）》[9]制定中醫證候分級評分量表，將主癥為五心煩熱、口干夜甚、脅痛、腰膝酸軟和次癥為低熱顴紅、眩暈耳鳴、手足抽搐、皮膚干燥等按嚴重程度分為6 級評分，分別賦值0～5 分，其中，無癥狀計為0 分，輕度計為1 分，輕中度計為2 分，中度計為3 分，中重度計為4 分，重度計為5分；分值越高，表明該癥狀越嚴重。觀察2 組患者治療前后各項中醫證候積分的變化情況。

1.6.2 腰圍身高比值、腰臀比值測量患者的身高、腰圍、臀圍，計算患者的腰圍身高比值、腰臀比值。觀察2組患者治療前后腰圍身高比值、腰臀比值的變化情況。

1.6.3 收縮壓、舒張壓測量于每天早上7∶00采用水銀血壓計（上海寰熙醫療器械有限公司生產，型號：LXJ-21 型）測量患者的收縮壓、舒張壓水平，連續測量2 次后取平均值；若2 次測量的數值差異較大，則再測1 次，取3 次的平均值。觀察2 組患者治療前后收縮壓、舒張壓的變化情況。

1. 6. 4 炎性因子及糖尿病相關影響因子水平檢測采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測患者血清白細胞介素4（IL-4）、白細胞介素10（IL-10）、同型半胱氨酸（Hcy）、褪黑素（MT）、脂聯素（APN）、抵抗素（RET）、瘦素（LEP）的表達水平。檢測方法：將100 μL 樣品倒入后，輕搖，加入100 μL酶標試劑，封板，將其放于37 ℃中孵育1 h，棄孔中液體；使用清洗液清洗3 次，排干；加入50 μL 顯色劑搖晃，在37 ℃下處理20 min；倒入50 μL 終止液。在450 nm 波長下檢測OD 值，檢測出IL-4、IL-10、Hcy、MT、APN、RET、LEP 的表達水平。IL-4、IL-10、Hcy、MT、APN、RET、LEP 試劑盒分別由迪信泰檢測科技（北京）有限公司、武漢華美生物工程有限公司CUSABIO?、博輝生物科技（廣州）有限公司、北京博沃爾斯生物科技有限公司、北京伊塔生物科技有限公司、上海晅科生物科技有限公司、上海高創化學科技有限公司生產，貨號分別為EKHU2020、CSB-E06897Rb、EKH12446、EK- H11683、YK- 04240、XK- E10872、CSB-E04649h。觀察2 組患者治療前后血清IL-4、IL-10、Hcy、MT、APN、RET、LEP 水平的變化情況。

1.6.5 T 淋巴細胞亞群水平檢測采用流式細胞儀（美國貝克曼公司生產，型號：FC500）測定血清T 淋巴細胞亞群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。觀察2 組患者治療前后各項血清T 淋巴細胞亞群指標的變化情況。

1.7 統計方法應用SPSS 19.0統計軟件進行數據的統計分析。計量資料用均數± 標準差（x±s）描述，組內治療前后比較采用配對，t檢驗，組間比較采用兩獨立樣本，t檢驗；計數資料用率或構成比描述，組間比較采用，χ2檢驗。均采用雙側檢驗，以，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組患者基線資料比較對照組40例患者中，男19 例，女21 例；年齡35～72 歲，平均（53.21 ±8.23）歲；病程1.5～12 年，平均（7.79 ± 2.49）年。觀察組40例患者中，男18例，女22例；年齡36～73 歲，平均（53.62±8.25）歲；病程1.5～12 年，平均（7.80 ± 2.50）年。2 組患者的性別、年齡、病程等基線資料比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），表明2 組患者的基線特征基本一致，具有可比性。

2.2 2組患者治療前后中醫證候積分比較表1結果顯示：治療前，2 組患者的五心煩熱、口干夜甚、脅痛、腰膝酸軟、低熱顴紅、眩暈耳鳴、手足抽搐、皮膚干燥等中醫證候積分比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。治療后，2 組患者的各項中醫證候積分均較治療前降低（P＜0.05），且觀察組的降低作用均明顯優于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.01）。

表1 2組2型糖尿病（T2DM）患者治療前后中醫證候積分比較Table 1 Comparison of TCM syndrome scores between the two groups of patients with type 2 diabetes mellitus（T2DM）before and after treatment （±s，分）