葡萄籽提取物復合膜制備及其抑菌性研究

耿直 付佳樂 郭婉婷

摘要：以殼聚糖和海藻酸鈉為成膜材料，以甘油為增塑劑，通過單因素試驗，分別考察殼聚糖、海藻酸鈉、甘油濃度和葡萄籽提取物添加量對復合膜抗拉伸強度和斷裂伸長率的影響，在此基礎上建立正交試驗進行研究，采用K-B法測定葡萄籽提取物復合膜對大腸桿菌、沙門氏菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌的抗菌活性。結果表明，復合膜最佳成膜工藝為海藻酸鈉濃度2.00%、殼聚糖濃度1.50%、甘油濃度0.2%、葡萄籽提取物20%。復合膜對4種控制菌均有抗菌活性，其中對大腸桿菌效果最好，其抑菌圈直徑可達7.4 mm，對銅綠假單胞菌的抑菌效果最差。本試驗方法簡便迅速，所得復合膜穩定，具有一定的力學性能、適宜的透明度和吸水性，加入葡萄籽提取物使復合膜增加抗菌性能，為抗菌復合膜的制備提供一個新的思路，同時為食品保鮮行業膜類產品的制備提供借鑒和參考。

關鍵詞：葡萄籽提取物；殼聚糖；海藻酸鈉；復合膜；抑菌

中圖分類號：TS206.4 ? ? ? ? 文獻標識碼：A

文章編號：0439-8114（2023）11-0118-07

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2023.11.021 開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Research on the preparation and antibacterial activity of composite films

of grape seed extract

GENG Zhi，FU Jia-le， GUO Wan-ting

（School of Medicine， Shaanxi Institute of International Trade & Commerce， Xian ?712046，China）

Abstract：Chitosan and sodium alginate were used as film forming materials and glycerin as the plasticizer. The effects of chitosan， sodium alginate， glycerin concentration and grape seed extract on tensile strength and elongation at the break of composite films were investigated by the single factor test， and the orthogonal test was established on this basis. The antibacterial activity of the composite films of grape seed extract against Escherichia coli， Salmonella， Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus was determined by the K-B method.The results showed that the best composite films forming process was sodium alginate concentration of 2.00%， chitosan concentration of 1.50%， glycerin concentration of 0.2%， and grape seed extract of 20%. The composite films had antibacterial activity against all four control bacteria， with the best effect against Escherichia coli， its antibacterial sphere diameter of 7.4 mm and the worst antibacterial effect against Pseudomonas aeruginosa. The test method was simple and rapid， and the composite films were stable， with certain mechanical properties， appropriate transparency and water absorption. Adding grape seed extract could increase the antibacterial properties of the composite films， which provided a new idea for the preparation of antibacterial composite films and provided reference for the preparation of film products in the food preservation industry.

Key words： grape seed extract；chitosan；sodium alginate；composite films；antibacterial

塑料作為一種材料，因其優異的物理性能、重量輕、加工性能好、經濟等優點，廣泛應用于食品包裝、商品產品、醫療器械和建筑等各領域。塑料的生產一直以每年8.7%的速度呈指數增長，塑料材料中超過40%用于一次性包裝的生產［1］。然而大多數塑料材料含不可降解成分，大部分會在環境中擴散、遷移和積累，這將對人類和其他生物造成極大的傷害，如果不經回收處理將會對地球環境造成嚴重危害。隨著“白色污染”越來越受到世界各國的重視，促使全球迫切需要生產環保可再生、生物可降解的生物聚合物材料［2］。因此，以可再生資源為基礎的可生物降解包裝材料的開發利用越來越引起人們的重視。常見的生物可降解的原料包括多糖、蛋白質和脂類［3］。其中，天然多糖以其良好的生物相容性和生物降解性，以及基于其化學結構的特殊生物功能，如高成膜性、功能性營養特性和化學穩定性等特點，受到人們的親睞［4］。

殼聚糖（Chitosan，CHI）是由幾丁質經脫乙酰化而成的陽離子多糖，在醋酸、鹽酸等酸性溶液中易溶解。除溶解性外，還具有無毒、抑菌、生物降解性等特點，是制備食品包裝材料的理想原料［5］。然而殼聚糖密度小、溶解度和釋放效率較低，且價格相對較高，限制了殼聚糖作為食品包裝材料的應用［6］。近年來，有研究表明，依據殼聚糖的多陽離子特性，采用聚電解質復合物（PECs）的壓實技術，將兩種或多種帶有相反電荷的高分子材料，聚電解質之間的靜電相互作用而形成復凝聚物進而制備復合膜［7］。海藻酸鈉（Sodium alginate，SA）是由β-D-甘露糖醛酸（β-D-mannuronic，M）和α-L-古洛糖醛酸（α-Lguluronic，G）以（1→4）鍵連接設計而成的二元共聚物，為一種具有天然性的陰離子線型多糖，普遍存在于海帶、馬尾藻等褐藻中，來源豐富，無毒且價格低廉，具有可降解性、安全性、保濕性、成膜性和生物相容性的特點［8］。利用海藻酸鈉為陰離子多糖的特性與帶有陽離子的殼聚糖發生交聯反應從而形成PECs，PECs發生沉淀、累積而成膜。帶負電荷的海藻酸鈉和帶正電荷的殼聚糖可在水溶液中形成聚電解質復合體；當水分蒸發時，可使兩天然高分子的鏈段間形成分子間和分子內氫鍵或疏水鍵；當大部分水分蒸發后，可形成致密的三維網狀結構而成膜［9］。研究表明，以殼聚糖/海藻酸鈉為材料制備復合膜具有較強的拉伸強度和熱穩定性，且復合膜的可塑性較好［10］。殼聚糖與海藻酸鈉均具備一定抑菌活性，然而有學者研究表明，采用單一的海藻酸鈉或殼聚糖為成膜材料的保鮮膜存在一定缺點，如保鮮效果差、對食品的保鮮時效短、保鮮作用不顯著等，因此有必要在復合膜中添加抑菌物質［11，12］。通過添加某些天然易得的抑菌劑，可使復合保鮮膜材料獲得無毒可食的抑菌性能。植物精油、天然植物提取成分如茶多酚等均具有較高的生物活性和廣譜抑菌性，并且天然安全，可以大大彌補單一殼聚糖抑菌膜抑菌活性低的缺點，且降低了殼聚糖膜的透水率［13］。

葡萄籽提取物（Grape seed extract，GSE）是一種天然的保健食品，含有豐富的多酚，尤以原花青素占比最大，葡萄籽中原花青素具有抗氧化、抑菌、治療心血管疾病、抗衰老及抗潰瘍等諸多藥理作用，因葡萄籽提取物療效頗佳、副作用較小等特點已被世界廣泛認可，并廣泛應用到生活中［14-16］。本研究旨在優化以殼聚糖/海藻酸鈉為成膜材料，以甘油為增塑劑，添加葡萄籽提取物混合制備復合膜的工藝變量，并對所制復合膜的物理結構、性能及抑菌活性進行評價，探討其作為食品包裝材料的適用性。同時可為葡萄籽在包裝材料中的應用提供有價值的指導，也對新型綠色包裝材料的開發有深遠的影響。

1 材料與設備

1.1 材料與試劑

葡萄籽提取物（含原花青素不低于98%），香茗生物科技有限公司；殼聚糖、海藻酸鈉（食品級，純度>98%），合肥巴斯夫生物科技有限公司；丙三醇、吐溫-80、乙醇、甲醇、冰醋酸、乙醚等（均為分析純），國藥集團化學試劑有限公司；胰蛋白胨、酵母浸粉（生物試劑），北京奧博星生物技術有限責任公司；高透明亞克力板，廣東悅軒達塑膠材料有限公司。

1.2 儀器與設備

754B紫外可見分光光度計，北京普析儀器有限責任公司；E221生物顯微鏡，麥克奧迪實業集團有限公司；SN-MS-H280D數顯恒溫加熱磁力攪拌器，山東博科生物產業有限公司；HH-2型電熱恒溫水浴鍋，北京科偉永興儀器有限公司；A8超細勻質機，美國福祿克公司；XLW（PC）薄膜拉力計，濟南蘭光機電技術有限公司。

2 試驗方法

2.1 復合膜制備方法

制備工藝路線［17，18］：原料→稱量→溶解→加復合膜液→混合→添加助劑（甘油）→混勻→靜置脫氣→涂膜→干燥→脫膜→保存備用。

2.1.1 葡萄籽提取物的制備 將葡萄籽進行干燥（55 ℃）后粉碎成粗粉，稱取10 g，加75%乙醇超聲提取40 min，靜置30 min后收集上清液，進行濃縮除醇后加去離子水溶至50 mL容量瓶中，備用［19］。使用時與甘油混合后加入海藻酸鈉中。

2.1.2 殼聚糖膜液的制備 將一定量的殼聚糖溶于100 mL 0.5%的冰醋酸水溶液中，加入0.3%的蜂蠟和0.2%的司盤-40，混合后加熱，于45 ℃條件下勻質2 min，室溫靜置過夜脫氣，備用。

2.1.3 海藻酸鈉膜液的制備 稱取一定量的海藻酸鈉，溶于100 mL的去離子水中，加入一定量甘油（加葡萄籽提取物），45 ℃加熱攪拌溶解，室溫下靜置過夜脫氣，備用。

2.1.4 復合膜的制備 將“2.1.2”中一定量殼聚糖膜液與“2.1.3”中一定量海藻酸鈉膜液于45 ℃恒溫加熱攪拌混合均勻后，按比例加入“2.1.1”中葡萄籽提取物，繼續混合30 min后，置于45 ℃、100 Hz超聲脫氣，倒入高透明亞克力板（30 cm×30 cm）上，玻璃棒涂布均勻，自然冷卻10 min，于40 ℃烘箱鼓風干燥10 h，揭膜，備用。

2.2 復合膜性能評價指標及質量檢測項目

2.2.1 抗拉伸強度 抗拉伸強度的測定參照GB/T 1040.1—2018《塑料 拉伸性能的測定 第1部分：總則》［20］，選取光滑平整無損的復合膜剪成30 mm×20 mm規整長條，垂直平整地固定于拉力計電子測力儀上，初始間距為50 mm，拉伸速率為20 mm/min，每組復合膜做3個平行，記錄膜斷裂時最大抗拉記數以及位移量。抗拉伸強度計算公式：

[T=FLW] ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?（1）

式中，T為抗拉伸強度（MPa）；F為膜斷裂時最大拉力（N）；L為膜平均厚度（mm）；W為膜樣品寬度（mm）。

2.2.2 斷裂伸長率 根據測定拉伸強度時的最大拉力相對應位移測量計算。斷裂伸長率計算公式：

[E=L1-L0L0×100%] ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?（2）

式中，E為斷裂伸長率（%）；L0為拉伸前膜的長度（mm）；L1為拉伸后膜的長度（mm）。

2.2.3 復合膜厚度 復合膜厚度的測定參照GB/T 6672—2001《塑料薄膜和薄片 厚度測定 機械測量法》［21］，選取光滑平整的復合膜，用厚度測量儀均勻選取10個點，每個點測3次，以平均值作為復合膜的厚度。

2.2.4 透光率 膜透光率測定參照程宇勤等［22］的方法。取規整的白色無損反光膜樣，剪成一條白色長條，將這些白色長條均勻緊貼于干燥的反光玻璃中和比色皿一側，在激光規定的照射溫度和激光波長（523 nm）下用紫外分子激光和透光度測量計檢測其紫外吸收透光度，以干燥潔凈的白色空白反光玻璃中的比色皿一側作為激光對照。

2.2.5 吸水率 膜吸水性的測定參照GB/T 1034—2008《塑料 吸水性的測定》［23］，將復合膜剪成2個薄膜長條（30 mm×20 mm），將復合膜浸入23 ℃去離子水中24 h，取出，根據復合膜開始試驗時與吸水后的質量差異，將樣膜放置于45 ℃恒溫鼓風干燥箱中干燥至恒重，取出稱重記為W1，樣膜浸泡后，取出稱重記為W2。吸水率計算公式：

[WA=W2-W1W1×100%] ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?（3）

式中，WA為吸水率（%）；W1為膜浸泡前干燥后質量（g）；W2為膜浸泡后質量（g）。

2.2.6 綜合評分 拉伸強度和斷裂伸長率是評價保鮮膜力學參數的重要指標，拉伸強度保證了保鮮膜的可用性及延展性，所以將此指標賦予70%的權重，斷裂伸長率反映了保鮮膜的延展性，將其賦予30%的權重。每個指標試驗測得最大數值為滿分一百分，其他數值以此類推得分［24］。

綜合評分=拉伸強度×70%+斷裂伸長率×30%

（4）

2.3 單因素試驗

2.3.1 海藻酸鈉濃度的選擇 分別配制濃度為0.50%、0.75%、1.00%、1.25%、1.50%、2.00%的海藻酸鈉溶液，按照“2.1.4”中方法進行復合膜的制備，并進行評價，選擇海藻酸鈉濃度考察水平。

2.3.2 殼聚糖濃度的選擇 分別配制濃度為0.50%、0.75%、1.00%、1.25%、1.50%、2.00%的殼聚糖溶液，按照“2.1.4”中方法進行復合膜的制備，并進行評價，選擇殼聚糖濃度考察水平。

2.3.3 甘油濃度的選擇 分別在制備過程中添加濃度為0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%的甘油，按照“2.1.4”中方法進行復合膜的制備，并進行評價，選擇殼聚糖濃度考察水平。

2.3.4 葡萄籽提取物添加量的選擇 分別在制備過程中添加占甘油濃度0、10%、20%、30%、40%、50%的葡萄籽提取物，按照“2.1.4”中方法進行復合膜的制備，并進行評價，選擇葡萄籽提取物添加量考察水平。

2.4 正交試驗設計

在單因素試驗結果基礎上進行試驗設計，以海藻酸鈉濃度、殼聚糖濃度、甘油濃度和葡萄籽提取物添加量為影響因素設計正交試驗，以復合膜綜合評分為評價指標，并對結果進行分析，獲得復合膜最佳制備工藝。

2.5 復合膜驗證試驗

對最佳制備工藝進行驗證，并對復合膜進行質量評價。

2.6 復合膜抑菌性能

采用K-B法［25］測試葡萄籽提取物復合膜分別對大腸桿菌、沙門氏菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌的抑菌活性。上述菌種接種于LB培養基中，培養至OD600 nm=0.8，作為菌懸液備用，取10 μL制備好的菌懸液均勻地涂在LB平板上，在培養基表面放置已制備好的葡萄籽提取物復合膜液，以無菌水作為陰性對照，以對控制菌有抑菌效果的藥片為陽性對照，每個菌種做3組平行試驗。

3 結果與分析

3.1 單因素試驗結果

3.1.1 海藻酸鈉濃度對復合膜抗拉伸強度和斷裂伸長率的影響 由圖1、圖2可知，當成膜液中海藻酸鈉濃度在0.75%～1.50%時，復合膜的抗拉伸強度與斷裂伸長率在一定范圍內有所增大。因為隨著海藻酸鈉濃度增大，復合膜厚度增加。此外，海藻酸鈉濃度增加亦使得膜液的稠度增加，則導致成膜液太黏，配制好的膜液不易脫氣，最終不易流延成膜，而且還出現氣泡較多、成膜層極度不均勻等現象；反之加入的海藻酸鈉過少時其膜液濃度太稀，則流動性太大，會導致脫膜后揭膜困難，所得膜劑無實際利用價值。根據海藻酸鈉純溶液的黏度性質與單膜成膜特征結合單因素試驗結果，選擇1.00%～2.00%濃度的海藻酸鈉溶液進行正交試驗考察。

3.1.2 殼聚糖濃度對復合膜抗拉伸強度和斷裂伸長率的影響 由圖3、圖4可知，復合膜抗拉伸強度隨著殼聚糖濃度的增加先增大后下降，殼聚糖濃度為1.25%時達到峰值；復合膜斷裂伸長率隨著殼聚糖濃度的增加呈上升趨勢，殼聚糖濃度為1.50%時最高，而后略有降低。在一定范圍內，隨著殼聚糖濃度增大，所制的膜劑厚度也增大，因此，復合膜的抗拉伸強度隨著殼聚糖濃度的增加而增大；復合膜的斷裂伸長率先增大又減小，其原因還有待于進一步研究。因此，選擇0.75%～1.50%濃度的殼聚糖溶液進行正交試驗考察。

3.1.3 甘油濃度對復合膜抗拉伸強度、斷裂伸長率及綜合評分的影響 由圖5、圖6、圖7可知，隨著甘油濃度的增加，復合膜的抗拉伸強度逐漸下降，而同時斷裂伸長率整體上增加，這與甘油的化學性質密切相關，甘油又叫丙三醇，含有3個醇羥基，親水性強，因此作為增塑劑與海藻酸鈉結合生成氫鍵，阻礙了海藻酸鈉與殼聚糖之間的靜電結合能力，復合膜延展性和柔韌性增加，斷裂伸長率增加，但同時抗拉伸強度減小。對于其綜合評分可以看出，當甘油濃度為0.2%時綜合評分最高，因此選擇0.1%～0.4%濃度的甘油進行正交試驗考察。

3.1.4 葡萄籽提取物添加量對復合膜抗拉伸強度和斷裂伸長率的影響 由圖8、圖9可知，隨著葡萄籽提取物添加量的增加，復合膜液的抗拉伸強度和斷裂伸長度整體上先上升后下降，主要是因為隨著葡萄籽提取物添加量增加，膜液稠度下降，因此選擇10%～40%添加量的葡萄籽提取物進行正交試驗考察。

葡萄籽提取物添加量//%][抗拉伸強度//MPa]

3.2 正交試驗結果

根據單因素試驗結果，采用L16（44）試驗進行研究，試驗因素與水平見表1，試驗結果及方差分析見表2、表3。

通過正交試驗結果可以看出，復合膜最佳成型工藝為A4B4C2D3，即海藻酸鈉濃度2.00%、殼聚糖濃度為1.50%、甘油濃度0.2%、葡萄籽提取物添加量30%。通過正交試驗，以復合膜抗拉伸強度為指標進行評價，從極差值可以看出，各因素影響大小為殼聚糖濃度>海藻酸鈉濃度>葡萄籽提取物添加量>甘油濃度；以復合膜斷裂伸長率為指標進行評價，各因素影響大小為海藻酸鈉濃度>甘油濃度>葡萄籽提取物添加量>殼聚糖濃度；以綜合評分為指標進行評價，各因素影響大小為殼聚糖濃度>海藻酸鈉濃度>甘油濃度>葡萄籽提取物添加量，由此可見，對試驗結果影響比較顯著的因素為殼聚糖濃度和海藻酸鈉濃度，這也與試驗方差分析結果相一致，因此在試驗研究過程中應注重對成膜材料配比的考察。同時發現葡萄籽提取物添加量亦會影響成膜效果，因此，將最佳工藝調整為A4B4C2D2，即海藻酸鈉濃度2.00%、殼聚糖濃度1.50%、甘油濃度0.2%、葡萄籽提取物添加量20%，并將最佳工藝與調整工藝進行對比，結果顯示，最佳工藝制備的復合膜抗拉伸強度為27.56 MPa，斷裂伸長率為19.37%；調整工藝復合膜抗拉伸強度為29.42 MPa，斷裂伸長率為19.87%，均優于最佳工藝，因此，選擇調整工藝為本次試驗的最佳工藝，并進行3次驗證試驗。

3.3 驗證試驗

從表4可以看出，調整工藝與最佳工藝相比，抗拉伸強度明顯增強，斷裂伸長率基本不變。因此，確定調整工藝為本研究的最佳工藝，即海藻酸鈉濃度2.00%、殼聚糖濃度1.50%、甘油濃度0.2%、葡萄籽提取物20%。

表4 驗證試驗結果

[組別 抗拉伸強度//MPa 平均值 斷裂伸長率//% 平均值 最佳工藝 29.87 29.86 19.85 19.55 29.56 19.23 30.14 19.56 調整工藝 31.06 31.25 19.48 19.70 30.92 19.74 31.77 19.88 ]

3.4 質量評價項目

取按照最佳工藝制備的復合膜，進行質量評價，每個項目平行3次重復。由表5可知，制得的復合膜厚度較厚，可能原因是膜液中添加了葡萄籽提取物，所以最終得到的復合膜比市場傳統的PE保鮮膜（0.019 mm）偏厚。通過驗證結果可知，優選的葡萄籽提取物制備復合保鮮膜最佳工藝，所制備的復合膜性能較好，該工藝可用于葡萄籽提取物制備食品保鮮膜。

3.5 葡萄籽提取物復合膜抑菌性能分析

對4種常見控制菌的抑菌直徑大小對比結果見表6。由表6可知，葡萄籽提取物復合膜對大腸桿菌、沙門氏菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果有所差異，其中對大腸桿菌效果最好，其抑菌圈直徑可達7.4 mm，對銅綠假單胞菌的抑菌效果最差，僅有5.6 mm。由于本試驗復合膜的制備中含有葡萄籽提取物，葡萄籽中含有的多酚有很強的抑菌效果，對多種微生物均有抑制作用，且抑菌效果會隨多酚濃度的提高而增強［26］。另外由于復合膜含有的殼聚糖與海藻酸鈉均有不同程度的抑菌作用，可能在與細菌細胞膜結合時導致細胞滲漏，從而抑制細菌生長。

4 小結與討論

試驗制得的復合膜抗拉伸強度較強；膜的斷裂伸長率在標準范圍內；膜的透光率較弱，可能原因是膜液中加入葡萄籽提取物，葡萄本身顏色呈紫紅色，所以最終所得到的復合膜顏色較深；膜的含水率適中，因所制備的復合膜為可食性，所采用的材料均為可溶于水的，所以會導致最終膜的含水率受到影響。

本研究所得復合膜在力學性能、吸水率等方面均有不同程度的改善，但仍存在可以進一步研究探討的方向，如在今后試驗過程中可加強對葡萄籽提取物的脫色處理以增強復合膜的透光率；病原微生物的污染導致食物腐敗和食源性疾病的傳播，因此，抑菌能力是衡量食品包裝膜性能的最重要特征，本研究在殼聚糖-海藻酸鈉復合膜的基礎上增加葡萄籽提取物，使制得的膜可用于活性食品包裝的應用，以延緩微生物的生長，雖然殼聚糖和海藻酸鈉自身有一定的抑菌效果，但其對膜劑的保鮮效果還需要進一步研究。

參考文獻：

［1］ TPE magazine international Group. Plastics-the Facts 2017.An analysis of European plastics production， demand and waste data［J］.TPE magazine international： Thermoplastic elastomers，2018， ? ? ? ?9（2）：93.

［2］ GROH K J， BACKHAUS T， CARNEY-ALMROTH B， et al. Overview of known plastic packaging-associated chemicals and their hazards［J］.Science of the total environment，2019，651：3253-3268.

［3］ AMJADI S， EMAMINIA S， DAVUDIAN S H， et al. Preparation and characterization of gelatin-based nanocomposite containing chitosan nanofiber and ZnO nanoparticles［J］.Carbohydrate polymers，2019，216：376-384.

［4］ BAGDE P， NADANATHANGAM V. Mechanical， antibacterial and biodegradable properties of starch film containing bacteriocin immobilized crystalline nanocellulose［J］.Carbohydrate polymers，2019，222：115021.

［5］ KOIDO S S. Chitin-chitosan： Properties， benefifits and risks［J］.Nutrition research，1998，18（6）：1091-1101.

［6］ AZMANA M， MAHMOOD S， HILLES A R， et al. A review on chitosan and chitosan-based bionanocomposites：Promising material for combatting global issues and its applications［J］.International journal of biological macromolecules，2021，185：832-848.

［7］ GHOSTINE R A， SHAMOUN R F， SCHLENOFF J B. Doping and diffusion in an extruded saloplastic polyelectrolyte complex［J］.Macromolecules，2013，46（10）：4089-4094.

［8］ 王 梅，徐 俐，宋長軍，等.海藻酸鈉涂膜對鮮切芋艿保鮮效果的影響［J］.食品工業科技，2016，37（12）：320-324.

［9］ 陳敬鑫，楊明亮，葛永紅，等.海藻酸鈉可食性膜及其食品保鮮應用的研究進展［J］.渤海大學學報（自然科學版），2021，42（2）：102-110.

［10］ TREENATE P， MONVISADE P， YAMAGUCHI M. Development of hydroxyethylacryl chitosan/alginate hydrogel films for biomedical application［J］. Journal of polymer research，2014，21（12）：601-602.

［11］ 王明力，沈 丹，王文平，等.改性殼聚糖保鮮涂膜透水率的研究［J］.食品與生物技術學報，2007，26（5）：10-13.

［12］ 曾順德，文澤富，謝永紅，等.A-型保鮮劑對白柚汁胞粒化相關酶活性的影響［J］.西南農業大學學報，2001，23（5）：429-431.

［13］ 王盛東，王軍輝，王辰辰，等.殼聚糖/海藻酸鈉可食性保鮮膜的研究進展［J］.廣東化工，2020，47（15）：81-82.

［14］ 徐 莉，李盛鈺，李宜平. 葡萄籽化學和藥理學研究進展［J］.吉林中醫藥，2002，22（1）：61-63.

［15］ 尹 佳，胡金德，王麗華，等.葡萄籽多肽的制備及其抗氧化活性［J］.食品工業，2020，41（11）：127-130.

［16］ 董曉敏.葡萄籽原花青素的提取、抑菌活性及其對雞肉保鮮研究［D］.濟南：齊魯工業大學，2015.6-8.

［17］ 王 贏.殼聚糖基抗菌保鮮膜制備及其應用研究［D］.黑龍江大慶：黑龍江八一農墾大學，2018.10-11.

［18］ 王琦琦，許加超，高 昕，等.生物全降解海藻酸鈉保鮮膜制備及應用研究［J］.食品工業，2017，38（7）：88-92.

［19］ 吳 瓊.殼聚糖/海藻酸鈉復合保鮮膜的制備與應用研究［D］.山東青島：中國海洋大學，2014.14-20.

［20］ GB/T 1040.1—2018， 塑料 拉伸性能的測定 第1部分：總則［S］.

［21］ GB/T 6672—2001，塑料薄膜和薄片 厚度測定 機械測量法［S］.

［22］ 程宇勤，齊子修，馬 成，等.功能性魚皮明膠復合膜的性質研究［J］.中國食品添加劑，2021，32（10）：59-66.

［23］ GB/T 1034—2008，塑料 吸水性的測定［S］.

［24］ 張 伸.基于海藻酸鈉可食用抗菌復合膜的制備與性能研究［D］.哈爾濱：哈爾濱工業大學，2018.3-7.

［25］ LI S B， YI J J， YU X M， et al. Preparation and characterization of pullulan derivative antibacterial composite films［J］.Materials science and engineering C， 2020，110：110721.

［26］ 聶相珍，申麗媛.葡萄皮渣多酚提取及其對五種食源性致病菌的抑制作用［J］.中國釀造，2016，35（9）：101-105.