乳腺癌組織中基質金屬蛋白酶-1、基質金屬蛋白酶-2表達與臨床病理特征及預后轉歸的關系分析

【摘要】目的 探討乳腺癌組織中基質金屬蛋白酶-1（MMP-1）、基質金屬蛋白酶-2（MMP-2）的表達與臨床病理特征及預后轉歸的關系。方法 選取2018年6月至2020年12月北京市房山區第一醫院收治的76例乳腺癌患者為乳腺癌組，另選取同期北京市房山區第一醫院收治的76例良性乳腺病變患者為良性乳腺病變組進行回顧性分析。比較兩組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達情況。分析乳腺癌患者MMP-1、MMP-2陽性表達與病理特征的關系。根據生存狀況將乳腺癌組患者分為死亡組（28例）和存活組（48例），比較兩組患者乳腺組織MMP-1、MMP-2陽性表達情況。結果 乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達率高于良性乳腺病變組（Plt;0.05）。乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經、淋巴結轉移、雌激素受體（ER）陽性患者的MMP-1陽性表達占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經、無淋巴結轉移、ER陰性患者（Plt;0.05）。乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經、淋巴結轉移、ER陽性患者的MMP-2陽性表達占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經、無淋巴結轉移、ER陰性患者（Plt;0.05）。死亡組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達占比高于存活組（Plt;0.05）。結論 乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2存在異常高表達，且參與了乳腺癌的發生、發展及轉移等過程，與患者預后轉歸密切相關。

【關鍵詞】乳腺癌；基質金屬蛋白酶-1；基質金屬蛋白酶-2；臨床病理特征；預后轉歸

【中圖分類號】R737.9 【文獻標識碼】A 【文章編號】2096-2665.2023.15.0004.04

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2023.15.002

Analysis of the relationship between the expression of matrix metalloproteinase-1 and matrix metalloproteinase-2 in breast cancer tissues and clinicopathologic features， prognosis and outcome

WANG Weili， LIU Shufang

（Department of Pathology， The First Hospital of Fangshan District of Beijing， Beijing， 102400， China）

【Abstract】Objective To discuss the relationship between the expression of matrix metalloproteinase-1 （MMP-1） and matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） and clinicopathologic features， prognosis and outcome in breast cancer tissues. Methods A total of 76 patients with breast cancer admitted to the First Hospital of Fangshan District of Beijing from June 2018 to December 2020 were selected as breast cancer group. Another 76 patients with benign breast lesions admitted to the First Hospital of Fangshan District of Beijing were selected as the benign breast lesions group. Retrospective analysis were conducted. The positive expression of MMP-1 and MMP-2 in breast tissues of the two groups was compared. The relationship between the expression of MMP-1 and MMP-2 and the clinicopathologic features of breast cancer patients were analyzed. In addition， all breast cancer patients were divided into the death group （28 cases） and the survival group （48 cases） according to the difference in survival status， and the differences in the expression of MMP-1 and MMP-2 between the two groups were analyzed. Results The expression rates of MMP-1 and MMP-2 in breast tissue of breast cancer group were higher than those of benign breast lesions group （ Plt;0.05）. The positive rate of MMP-1 expression in patients in clinical stage Ⅲ to Ⅳ， menopause， lymph node metastasis and estrogen receptor （ER） - positive breast cancer was higher than that in patients in clinical stage Ⅰ to Ⅱ， premenopause， no lymph node metastasis and ER- negative breast cancer （Plt;0.05）. The positive rate of MMP-2 expression in patients with clinical stage Ⅲ to Ⅳ， menopause， lymph node metastasis and ER-positive breast cancer was higher than that in patients with clinical stage Ⅰ to Ⅱ， premenopause， no lymph node metastasis and ER-negative breast cancer （Plt;0.05）. The positive rates of MMP-1 and MMP-2 expression in the death group were higher than those in the survival group （Plt;0.05）. Conclusion There are abnormally high expressions of MMP-1 and MMP-2 in breast cancer tissues， and they are involved in the occurrence， development， metastasis and other processes of breast cancer， which are closely related to the prognosis of patients.

【Keywords】Breast cancer; Matrix metalloproteinase-1; Matrix metalloproteinase-2; Clinicopathological features; Prognostic and outcome

乳腺癌屬于婦科臨床較為常見的一種生殖系統惡性腫瘤，隨著人們生活方式的改變及精神壓力的與日俱增，該病發病率正呈逐年攀升趨勢，已成為嚴重威脅女性生命健康安全的重大疾病之一[1]。早期積極有效的診治對改善患者預后具有極其重要的意義，因此研究乳腺癌發生機制及其有關分子標記物具有一定的現實意義[2-3]。基質金屬蛋白酶（MMP）主要是通過降解細胞外基質和基膜等途徑促進腫瘤細胞的遷移、侵襲[4]。其中基質金屬蛋白酶-1（MMP-1）、基質金屬蛋白酶-2（MMP-2）屬于MMP家族的重要成員，在腫瘤細胞侵襲、轉移中有著至關重要的作用，有望成為評估乳腺癌疾病發生、發展的關鍵性生物學標記物。鑒于此，本研究分析乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2表達的病理意義，以期為乳腺癌的防治提供新的靶點與思路，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年6月至2020年12月北京市房山區第一醫院收治的76例乳腺癌患者為乳腺癌組，另選取同期北京市房山區第一醫院收治的76例良性乳腺病變患者為良性乳腺病變組進行回顧性分析。乳腺癌組患者年齡34～71歲，平均年齡（49.12±5.16）歲；BMI 19～24 kg/m²，平均BMI（21.34±1.32）kg/m²。良性乳腺病變組患者年齡37～72歲，平均年齡（49.74±5.26）歲；BMI為19～23 kg/m²，平均BMI（21.37±1.29）kg/m²。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（Pgt;0.05），組間具有可比性。根據生存狀況將乳腺癌組患者分為死亡組（28例）和存活組（48例）。死亡組患者年齡34～70歲，平均年齡（49.17±4.99）歲；BMI 19～23 kg/m²，平均BMI（21.29±1.35）kg/m²。存活組患者年齡35～71歲，平均年齡（49.24±3.27）歲；BMI 20～24 kg/m²，平均BMI（21.34±1.28）kg/m²。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（Pgt;0.05），組間具有可比性。本研究經北京市房山區第一醫院醫學倫理委員會批準。納入標準：①乳腺癌組患者符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范（2017年版）》[5]中乳腺癌的診斷標準，良性乳腺病變組患者符合《乳腺超聲檢查和診斷共識》[6]中良性乳腺病變的診斷標準，且兩組患者均經病理檢查確診；②均為成年女性；③入組前均無放化療或手術等抗腫瘤治療史；④預計生存期gt;6個月。排除標準：①伴其他惡性腫瘤者；②合并自身免疫性疾病者；③精神障礙、無法自主溝通者。

1.2 研究方法 采集兩組患者乳腺組織，常規石蠟包埋切片處理，脫蠟后以3 mol/L磷酸緩沖液（PBS）（北京中杉金橋生物科技有限公司，規格：23.48 g/袋）清洗后置入10 g乙二胺四乙酸（EDTA）緩沖液（北京中杉金橋生物科技有限公司，規格：500 mL/瓶），放置在室溫條件下自然冷卻20 min。以兔血清（北京中杉金橋生物科技有限公司，規格：1 mL/瓶）室溫封閉切片，15 min后清除多余液體，分別滴加一抗MMP-1、MMP-2，置于4 ℃條件下孵育過夜。隨后以PBS沖洗，繼續滴加二抗，室溫條件下孵育20 min。PBS沖洗后滴加二氨基聯苯氨（DAB）（北京中杉金橋生物科技有限公司，規格：100 mL/瓶）顯色，用5 g蘇木精（武漢宏茲生物技術有限公司，規格：500 mL/瓶）復染，梯度乙醇及二甲苯（北京益利精細化學品有限公司，規格：500 mL/瓶）脫水透明，以中性樹膠封片，借助顯微鏡（OLYMPUS，型號：BX51）觀察切片，隨機選擇5個400倍鏡視野，觀察細胞染色情況及陽性細胞占比情況，以免疫組織化學法測定MMP-1、MMP-2及雌激素受體（ER）陽性表達，染色計分1～3分，陽性細胞占比計分1～5分。以兩者乘積為最終結果，gt;2分即陽性[7]。乳腺癌組患者的臨床分期參考《介紹乳腺癌TNM分期系統（第7版）》[8]。對兩組患者均開展為期2年的隨訪觀察，隨訪方式包括電話隨訪、來院復診及上門隨訪，隨訪頻率為3個月/次。根據觀察組患者2年內的生存狀況分為死亡組（28例）和存活組（48例）。

1.3 觀察指標 ①比較乳腺癌組患者與良性乳腺病變組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達情況。②分析乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1陽性表達與病理特征的關系。③分析乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-2陽性表達與病理特征的關系。④比較死亡組患者與存活組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達情況。

1.4 統計學分析 采用SPSS 22.0統計學軟件分析數據。計數資料以[例（%）]表示，組間比較采用χ²檢驗。以Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乳腺癌組與良性乳腺病變組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達情況比較 乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達率高于良性乳腺病變組，差異有統計學意義（Plt;0.05），見表1。

2.2 乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1陽性表達與病理特征的關系 乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經、淋巴結轉移、ER陽性患者的MMP-1陽性表達占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經、無淋巴結轉移、ER陰性患者，差異有統計學意義（Plt;0.05），見表2。

2.3 乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-2陽性表達與病理特征的關系 乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經、淋巴結轉移、ER陽性患者的MMP-2陽性表達占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經、無淋巴結轉移、ER陰性患者，差異有統計學意義（Plt;0.05），見表3。

2.4 死亡組與存活組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達情況比較 死亡組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達占比高于存活組，差異有統計學意義（Plt;0.05），見表4。

3 討論

乳腺癌主要是由多種致病因素共同作用導致，相關研究通過分析該病病因發現，生殖因素、遺傳易感因素及機體性激素水平等均與乳腺癌的發生、發展有關[9]，然而上述因素僅能解釋其中1/2的乳腺癌病例。有研究報道發現，MMP家族多個成員可通過多種途徑介導乳腺癌發生、發展過程，且有評估乳腺癌浸潤、轉移的潛在價值[10-11]。因此，本研究對乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2表達與臨床病理特征、預后轉歸的關系并予以分析。

本研究結果顯示，乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達率高于良性乳腺病變組。這提示乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2存在異常高表達。分析原因，MMP-1、MMP-2均屬于MMP家族重要成員之一，可通過降解多種基質物質，進而對細胞外基質和基底膜等造成一定的破壞，進一步導致腫瘤細胞侵襲、轉移，這在既往有關研究報道中得以佐證[12-13]。MMP-1屬于間質膠原酶，可對Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原產生降解作用，進而促進腫瘤細胞的轉移[14-15]。MMP-2屬于Ⅳ型膠原酶，可降解基底膜骨架成分，進而為腫瘤細胞的侵襲、轉移提供條件[16]。本研究結果還顯示，乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經、淋巴結轉移、ER陽性患者的MMP-1、MMP-2陽性表達占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經、無淋巴結轉移、ER陰性患者。這表明MMP-1、MMP-2表達均會促進乳腺癌患者病情的進展及淋巴結轉移[17]。另外，死亡組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達占比高于存活組，反映了隨著MMP-1、MMP-2表達的升高，乳腺癌患者死亡風險增加?？紤]原因可能因上述兩項指標表達水平升高，患者病情加重，臨床治療難度增加，預后較差[18]。

綜上所述，乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2存在高表達，介導了乳腺癌的發生、發展、轉移及預后轉歸。

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