氣相色譜-三重四極桿質譜法測定水果中9 種氨基甲酸酯農藥殘留量

◎ 趙藝羽

（佛山市南海區里水鎮農林服務中心，廣東 佛山 528244）

氨基甲酸酯類農藥是一類新型合成的有機農藥，因具有高效殺蟲、作用迅速、殘毒性低于有機磷農藥等優點，被廣泛應用于農業生產[1]。然而，在中華人民共和國農業農村部發布的禁限用農藥名錄中，克百威、滅多威、涕滅威等氨基甲酸酯類農藥，被列為在蔬果種植過程中禁止使用的農藥品種。因此，對此類氨基甲酸酯農藥檢測方法的開發優化有迫切的現實需求。在農藥殘留分析中，為應用GC、GC-MS 進行多組分同時檢測，已成為研究和應用的熱點[2]。目前，測定氨基甲酸酯類農藥的方法中，NY/T 761—2008 第三部分液相色譜法涉及提取、固相萃取小柱純化、濃縮等步驟，不僅需要使用二氯甲烷等中高毒性溶劑，還需配備柱后衍生反應裝置，對實驗員身體健康及環境均不友好；液相色譜-質譜聯用法中儀器試劑要求高，測定成本較高。GB 23200.113—2018 僅有克百威、3-羥基克百威有參數說明，涕滅威、滅多威等限用農藥暫無氣質質方法。因此，本文結合2 個標準，使用QuEChERS 法前處理，用三重四極桿氣相色譜質譜儀測定水果中克百威、3-羥基克百威、涕滅威及其代謝物、異丙威、仲丁威、甲萘威、滅多威等農藥殘留量的氣相色譜-質譜方法，并在多個基質中進行方法驗證，以探索QuEChERS 前處理法應用在測定水果中氨基甲酸酯類農藥殘留量的可能性。

1 材料與方法

1.1 儀器設備

GCMS-TQ8040 三重四極桿氣相色譜質譜聯用儀（日本島津公司）、電子分析天平（賽多利斯BS2202S，分度值0.01 g）、高速冷凍離心機（Sigma-Aldrich）、氮吹儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）、有機相尼龍針式濾膜（安譜，0.22 μm），DB-5MS 色譜柱（美國安捷倫公司）。

1.2 標準物質與試劑

3-羥基克百威、克百威、涕滅威、涕滅威亞砜、涕滅威砜、異丙威、滅多威、甲萘威、仲丁威（濃度均為100 μg·mL-1，溶于甲醇或丙酮，壇墨質檢科技股份有限公司）。

乙腈（色譜純，德國Merck 公司）、QuEChERS試劑盒系列（美國安捷倫公司，含萃取鹽包、凈化管）、乙酸乙酯（色譜純，德國Merck 公司）。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品前處理

水果樣品取樣量按相關標準執行，取樣縮分后，用食物攪拌機打至勻漿。

稱取10.00 g（精確到0.01 g）勻漿后的水果樣品于50 mL 離心管，加入10 mL 乙腈，渦旋振蕩5 min后加入萃取鹽包，劇烈振蕩并渦旋混勻5 min，以速度6 000 r·min-1離心5 min；吸取6 mL 上清液加入凈化管中，渦旋混勻5 min，速度6 000 r·min-1離心5 min；準確吸取2 mL 上清液于10 mL 離心管中，50 ℃氮吹至近干。用乙酸乙酯定容至1 mL，過0.22 μm尼龍針式濾器后上機[3]。

1.3.2 標準溶液配制

農藥混合標準儲備液（5 μg·L-1）：以移液管吸取3-羥基克百威、克百威、滅多威、甲萘威、異丙威、仲丁威、涕滅威、涕滅威亞砜、涕滅威砜各0.5 mL 于10.00 mL 容量瓶，用乙酸乙酯定容至刻度線，混勻，轉移至棕色試劑瓶內，置于-30 ℃冰箱保存，有效期2～3 周。

農藥混合標準系列工作液：精確吸取一定量的混合標準溶液，逐級用空白基質乙酸乙酯溶液稀釋成質量濃度為0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5 mg·L-1的標準工作溶液。

1.3.3 儀器條件

色譜柱：安捷倫DB-5 ms，30 m×0.25 mm×0.25 μm；進樣口溫度：250 ℃；傳輸線溫度：250 ℃；離子源溫度：200 ℃；離子源類型：ESI；進樣量：1 μL；檢測方式：多反應檢測（MRM）；溶劑延遲：1.50 min；載氣：氦氣，純度≥99.999 %，流速為1.69 mL·min-1；升溫程序：50 ℃保持1 min，然后以25 ℃·min-1升到125 ℃，再以10 ℃·min-1升到300 ℃，保持8 min。監測離子對及碰撞電壓參數見表1。

表1 9 種氨基甲酸酯農藥監測離子對及碰撞電壓表

2 結果與分析

2.1 結果計算

試樣中被測農藥殘留量以質量分數計，單位以mg·kg-1表示，按公式（1）計算。

式中：AS為基質標準工作液中被測農藥的色譜峰面積；A為試樣溶液中被測農藥的色譜峰面積；V1為提取溶劑體積，mL；V2為分取溶液體積，mL；V3為樣品溶液定容體積，mL；m為試樣的質量，g；ρ為標準溶液中農藥的質量濃度，μg·L-1。計算結果保留3 位有效數字。

2.2 線性范圍與檢出限

將克百威、3-羥基克百威、滅多威、甲萘威、異丙威、仲丁威、涕滅威、涕滅威亞砜、涕滅威砜標準品用空白基質配置成濃度分別為0.0 1、0.0 2、0.0 5、0.1、0.2、0.3 m g·L-1的工作溶液。以標準工作溶液各個組分的濃度（μ g·mL-1）為橫坐標，以農藥標準溶液中被測農藥定量離子對峰面積為縱坐標，繪制校準曲線，見表2。

表2 9 種氨基甲酸酯線性關系與檢出限表

表3 添加水平為0.02 mg·kg-1 時，各組分結果、回收率及樣品間變異系數表

根據GB/T 27417—2017 的要求，以可接受信噪比為3∶1 時確定檢出限，評估LOD，以3 倍LOD 作為儀器的LOQ，計算各項目的最低檢出限和定量限如下：

式中：m為試樣質量，g；V1為提取溶劑體積，mL；V2為分取溶液體積，mL；V3為樣品溶液定容體積，mL。

2.3 方法的準確度和精密度

在本方法中，用回收率表示準確度，以此評價測得值與真值的符合程度，取12 個各10 g 的陰性雪梨樣品，參照NY/T 761—2008 第3 部分和GB 23200.113—2018 各組分檢出限，分別添加混合標準溶液至0.02、0.10 mg·kg-1（涕滅威亞砜為0.04、0.10 mg·kg-1）2 個水平濃度，在自由度=5 的基礎上，進行平行測定，以實驗室內變異系數（CV）評價精密度[4]。樣品按前文處理步驟，將試樣溶液和基質標準工作液依次注入氣相色譜-質譜聯用儀中[5]，計算各檢測項目的平均值、平均回收率、樣品間變異系數（CV），計算結果見表 3、表4。

表4 添加水平為0.10 mg·kg-1 時，各組分結果、回收率及樣品間變異系數表

結果表明，3-羥基克百威、滅多威、甲萘威、異丙威、仲丁威、涕滅威、涕滅威亞砜、涕滅威砜的回收率為93.10%～118.00%；每水平6 個平行實驗室內變異系數（CV）為2.07～9.41，回收率和變異系數均滿足農業部2386 號公告及GB/T 27404—2008 相關要求。

3 結語

本方法使用QuEChERS 法前處理，配合特定氣相色譜質譜儀參數設定，對克百威、3-羥基克百威、涕滅威、涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、甲萘威、異丙威、仲丁威等農藥殘留量進行了測試。實驗中，測試了百香果、葡萄、西瓜、火龍果、雪梨、蘋果等多個水果基質，其曲線相關系數、精密度、準確度均滿足GB/T 27404—2008 的要求，檢出限基本滿足GB 2763 中判定限的要求。然而，以該方法處理部分蕓薹屬蔬菜，如小白菜、上海青、菜心時，陰性樣品在涕滅威亞砜采集時間段內出現明顯特征峰，容易誤判。對此，韓陽陽等選擇使用Carb/NH2固相萃取柱的方法處理后，特征峰明顯變小。由此可見，測定此類蔬菜時，應注意選取合適的前處理方法，一旦出現可疑數據，應采取其他檢測儀器進行核實。