橙汁飲料中山梨酸穩定性與均勻性研究

◎ 劉李婷，陳姍姍，常 薇，李 超，吳 坤

（陜西省產品質量監督檢驗研究院農副食品所，陜西 西安 710048）

山梨酸結構式為2,4-己二烯酸，具有共軛雙鍵體系，能夠與許多親核試劑反應[1]。山梨酸是目前國際上使用較為廣泛的防腐劑[2]，可以抑制微生物的生長，從而延緩食品腐敗[3-4]。能力驗證是一種通過實驗室間的比對，按照相關準則評估參與者能力的活動[5-6]。而組織能力驗證需制作盲樣，本文制作4 個濃度水平樣品，并通過均勻性及穩定性試驗得出數據，為各機構組織能力驗證設計盲樣提供指導依據。

1 材料與方法

1.1 材料與設備

樣品：橙汁飲料（市售康師傅橙汁）；試劑：超純水；乙酸銨（分析純）。儀器：高效液相色譜儀（島津SPD-20A）；超聲清洗振蕩機（昆山市超聲儀器KQ-500E）。

1.2 儀器條件

色譜柱：C18ODS-3（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：0.02 mol·L-1乙酸銨∶甲醇=95∶5；流速：1.0 mL；檢測波長：230 nm。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品前處理

在50 mL 離心管中稱取約2 g 樣品，加水約25 mL渦旋混勻，50 ℃水浴超聲20 min，再次加水并定容后渦旋混勻超聲振蕩5 min，取適量上清液過0.22 μm 水系濾膜，濾液待上機檢測[7]。

1.3.2 試驗設計方案

分別稱取適量山梨酸加入橙汁飲料中，使濃度分別為A（0.022 g·kg-1）、B（0.045 g·kg-1）、C（0.046 g·kg-1）、D（0.075 g·kg-1），依照《能力驗證樣品均勻性和穩定性評價指南》（CNAS—GL003：2018）[8]中的規定來設計樣品的均勻性及穩定性試驗，并通過多組數據進行分析。

2 結果與分析

2.1 均勻性試驗

依照《能力驗證樣品均勻性和穩定性評價指南》（CNAS-GL003：2018）[8]中的規定，根據單因子方差分析法進行樣品均勻性試驗。均勻性檢驗是指從A、B、C、D 4 個不同濃度水平樣品中隨機抽取10 份，其中每個樣品重復測定2 次，在短時間內由同一試驗人員根據上述的測試方法，在相同試驗條件下對樣品進行項目的檢測[9]。樣品均勻性試驗采用單因子方差統計分析進行評定，當樣品中檢測含量的F值小于F臨界值[F0.05(9，10)=3.02]時，表明樣品制備均勻，可用于實驗室使用。樣品均勻性結果見表1 和表2。由表2可知，A、B、C、D 4 個不同濃度水平樣品的F值小于臨界值，表明在0.05 顯著性水平時，樣品間和樣品內均無顯著性差異，樣品均勻。

表1 樣品中山梨酸測定結果表

表2 方差分析結果表

2.2 穩定性試驗

選取在試驗期間的不同時間間隔內抽取10 個樣品，其中每個樣品重復測定2 次，試驗條件（試驗方法、試驗人員、儀器、實驗室條件）均與均勻性檢驗相同。此次穩定性試驗的持續時間為18 d。測定時間間隔根據先密后疏的原則進行設計，共設計為3 個時間間隔。樣品分別于制樣后第1 天（4 月27 日）、第9 天（5 月5 日）、第18 天（5 月14 日）進行檢測。根據上述均勻性試驗所測結果作為參比數據，用t檢驗法進行穩定性試驗。若結果t值小于tα(n1+n2-2)時則表明兩個平均值間無顯著性差異，即表示所制備樣品穩定。穩定性試驗的結果如表3 所示。由表3 可知，t值均＜t臨界值（t0.05(18)=2.101），表明在0.05 顯著性水平時無顯著性差異，樣品穩定。

表3 穩定性試驗結果表

3 結論

本文介紹的橙汁飲料中的山梨酸制備方式所制得的4 個濃度水平樣品均勻性良好，在18 d 內樣品性質穩定，可用于能力驗證使用，并可指導各機構進行盲樣制作，從而為各機構在組織能力驗證中的盲樣制作考核提供指導，具有一定的參考價值。