廣西某豬場7種主要病毒性疫病的抗體檢測與分析

韋桂元，譚錦瑜，石宗承，何東賢，陸晶山，莫紅芳*

（1.廣西柳州市柳江區(qū)農(nóng)業(yè)科技推廣中心，廣西 柳州 545100；2.廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)大學(xué)，廣西 南寧 530007；3.廣西壯族自治區(qū)柳州種畜場，廣西 柳州 545003）

隨著我國生豬產(chǎn)業(yè)規(guī)模化、集約化程度迅速提升，豬引種和豬只流動越來越頻繁，加上豬疫病種類增多和復(fù)雜程度的加深，使疫病監(jiān)測在防控工作中變得越發(fā)重要［1］。CSF、FMD、PR、PRRS、PCVAD、PPI 及JE 是目前一直困擾養(yǎng)豬業(yè)生產(chǎn)與發(fā)展的重大病毒性傳染病［2］，一旦發(fā)病嚴(yán)重，就會給豬場造成巨大的經(jīng)濟損失。因此，做好上述7 種病毒性疫病的疫苗免疫及抗體監(jiān)測，對于豬場來說非常重要和必要。

疫苗免疫是目前預(yù)防病毒性疫病最有效的防疫措施，但其免疫效果易受到動物個體差異、疫苗質(zhì)量及類型、疫苗保存及運輸、免疫程序、飼養(yǎng)管理水平等因素影響［3］。抗體水平是反映豬群是否處于感染狀態(tài)的重要指標(biāo)［1］。通過監(jiān)測血清的抗體水平，可有效分析豬群的免疫狀態(tài)和疫病感染情況，以此作為優(yōu)化免疫程序和凈化豬場疫病的重要依據(jù)［1］。本研究利用ELISA方法檢測廣西某豬場7 種病毒性疫病的抗體水平，并結(jié)合疫苗免疫程序進(jìn)行免疫效果分析，以期為豬生產(chǎn)中重要疫病的綜合防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 檢測試劑及儀器 豬瘟ELISA 抗體檢測試劑盒（批號：130501）、O型口蹄疫ELISA抗體檢測試劑盒（批號：130907）、豬偽狂犬病gB 蛋白ELISA抗體檢測試劑盒（批號：140201）、豬偽狂犬病gE 蛋白ELISA 抗體檢測試劑盒（批號：140202）、豬繁殖與呼吸綜合征ELISA 抗體檢測試劑盒（批號：121213）、豬圓環(huán)病毒感染2 型ELISA抗體檢測試劑盒（批號：131201）、豬細(xì)小病毒病ELISA 抗體檢測試劑盒（批號：131205）、豬乙型腦炎ELISA 抗體檢測試劑盒（批號：130101），均購自武漢科前生物股份有限公司；Thermo Scientific?Multiskan?FC 酶標(biāo)儀，購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司。

1.2 血清樣本 2022 年10 月從廣西某存欄300頭母豬的豬場隨機采集155 份血液樣本，放置于37 ℃恒溫箱作用2 h 后，轉(zhuǎn)移至4 ℃冰箱過夜，在常溫下以5 000 r/min 離心3 min，分離上清即為血清。其中，商品豬（45～120日齡）血清樣本55份，種豬（公5頭、母95頭）血清樣本100份。

1.3 方法

1.3.1 疫苗免疫程序 經(jīng)了解，該豬場防疫員每年均嚴(yán)格按照制定的疫苗免疫程序（表1）開展商品豬、種豬的疫苗免疫工作。

表1 該豬場CSFV、FMDV、PRV、PRRSV等疫苗的免疫程序

1.3.2 檢測方法與結(jié)果判定 豬瘟病毒抗體、豬偽狂犬病病毒gB 蛋白抗體、豬偽狂犬病病毒gE蛋白抗體均采用阻斷ELISA 試劑盒進(jìn)行檢測，O型口蹄疫病毒抗體、豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體、豬圓環(huán)病毒2 型抗體、豬細(xì)小病毒抗體、日本乙型腦炎病毒抗體均采用間接ELISA 試劑盒進(jìn)行檢測。嚴(yán)格按照各診斷試劑盒的說明書進(jìn)行操作和結(jié)果判定。

2 結(jié)果

2.1 CSFV、FMDV-O 抗體檢測結(jié)果 表2 顯示，豬群CSFV、FMDV-O 整體的抗體平均合格率分別為90.3%和81.3%，達(dá)到了我國強制性疫苗免疫抗體合格率標(biāo)準(zhǔn)（70%）。其中種豬抗體合格率分別為100%、100%，免疫效果理想，但商品豬免疫合格率分別為72.7%、47.3%，說明商品豬FMDV-O 抗體免疫合格率偏低，部分血清抗體達(dá)不到保護(hù)水平，難以抵御FMDV-O強毒攻擊。可能是由于免疫程序不合理、疫苗使用不當(dāng)及免疫抑制性疾病等導(dǎo)致的免疫失敗［4］。

表2 CSFV、FMDV-O抗體檢測結(jié)果

2.2 PRV-gB、PRV-gE 抗體檢測結(jié)果 在我國，豬偽狂犬抗體檢測一般檢測gB、gE 兩類抗體，以此來區(qū)分抗體是由疫苗毒產(chǎn)生還是野毒產(chǎn)生［5］。由表3可知，各階段豬群PRV-gB抗體整體水平較好，抗體陽性率均值為96.8%，說明PRV免疫效果良好。PRV-gE抗體陽性個體總數(shù)為0，表明該豬場不存在偽狂犬野毒感染。

表3 PRV-gB、PRV-gE抗體檢測結(jié)果

2.3 PRRSV、PCV2 抗體檢測結(jié)果 表4顯示，商品豬PRRSV 抗體陽性率為10.9%，由于商品豬血清采集自45～120 日齡豬群，PRRSV 母源抗體已逐漸消失，說明商品豬群中存在PRRSV 感染情況［6］。雖然商品豬進(jìn)行了兩次PCV2 疫苗的免疫，種豬每個季度加強免疫一次PCV2 疫苗，但是商品豬、種豬PCV2 抗體的陽性率分別只有63.6%和83.0%，這可能與商品豬母源抗體不足、機體免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善或種豬出現(xiàn)免疫耐受等因素有關(guān)［5］。

表4 PRRSV、PCV2抗體檢測結(jié)果

2.4 PPV、JEV抗體檢測結(jié)果 從表5可看出，豬群PPV、JEV整體的抗體平均陽性率分別為84.5%、69.7%，其中商品豬PPV、JEV 抗體陽性率分別為60.0%、20.0%。由于商品豬未免疫PPV、JEV疫苗且母源抗體已逐漸消失，說明商品豬群普遍存在野毒感染，應(yīng)引起重視［7］。種豬于每年3 月份免疫JEV疫苗，并在產(chǎn)后2周免疫PPV疫苗，抗體陽性率分別為97.0%和98.0%，說明疫苗免疫效果良好。

表5 PPV、JEV抗體檢測結(jié)果

3 結(jié)論及討論

本研究采用ELISA 檢測試劑盒對廣西某豬場開展了豬群健康狀態(tài)監(jiān)測工作，充分掌握了該豬場7種主要病毒性疫病的抗體水平和野毒感染情況［8］。從豬群整體的平均抗體陽性率分析，豬場CSFV、FMDV-O、PRV-gB、PCV2、PPV 的平均抗體陽性率分別為90.3%、81.3%、96.8%、76.1%、84.5%，均超過我國強制性疫苗免疫抗體陽性率標(biāo)準(zhǔn)（70%），說明疫苗免疫效果較好；PRRSV、JEV 的平均抗體陽性率分別為52.3%、69.7%，低于國家標(biāo)準(zhǔn)，說明疫苗無法發(fā)揮較好的免疫保護(hù)作用；PRV-gE 抗體陽性個體總數(shù)為0，表明無偽狂犬野毒感染。

從各階段豬群的抗體陽性率分析，種豬7 種疫病的抗體陽性率均高于國家標(biāo)準(zhǔn)（70%），說明抗體水平較高，能提供有效的免疫保護(hù)力；商品豬已接種CSFV、FMDV-O、PCV2、PRV疫苗，還未接種PRRSV、PPV、JEV 疫苗，結(jié)果FMDV-O、PCV2抗體水平較低，陽性率均低于國家標(biāo)準(zhǔn)，說明疫苗免疫效果較差，而PRRSV、PPV、JEV 抗體陽性率較高，說明存在野毒感染，且PPV 野毒感染更為嚴(yán)重。鑒于以上結(jié)果分析，建議該豬場查找疫苗免疫失敗原因，優(yōu)化免疫程序，加強疫苗免疫水平監(jiān)測，對PRRSV、PPV 和JEV 感染陽性商品豬進(jìn)行隔離和監(jiān)控，并檢測病毒核酸，將核酸陽性的豬只作淘汰處理。