百香果皮分級萃取物中多酚輪廓分析及其抗氧化活性物質篩選

么亞妹，陳奕彤 ，田永濤，劉天悅，王文蜀,

（1.質譜成像與代謝組學國家民委重點實驗室（中央民族大學），北京 100081；2.中央民族大學生命與環境科學學院，北京 100081）

當今社會面對慢性疾患和人口老齡化雙重挑戰，含有天然抗氧化劑的功能性食品及相關產品是人類防治慢性疾患和健康管理關口前移的重要物質[1]。百香果（PassifloraedulisSims）是西番蓮科（Passifloraceae）西番蓮屬（PassifloraLinn.）多年生攀援藤本植物，因其獨特風味和較高營養價值備受消費者喜愛，現于廣西、云南、福建和四川[2]等地作為鄉村振興產業被推廣種植[3]。研究表明百香果皮中富含天然多酚，種類繁多，這些多酚被證實能夠有效抑制人體內的氧化應激現象[4]，是開發性價比高的抗氧化功能性食品的優質綠色資源。

多酚是一類母核為C6～C3 結構的天然化合物，根據取代基位置、類型和數量的不同又分為酚酸類、黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、黃烷醇類和花青素類等[5]。不同類型多酚的生物活性及其利用效率具有一定差別。因此，根據不同類型多酚在各極性溶劑中的聚合程度差異[6]，對其進行分級利用，有利于多酚的高效精準開發。Fan 等[7]研究發現富硒茶不同萃取部位（乙酸乙酯、正丁醇、水相）酚類化合物種類及其抗氧化和細胞保護活性具有差異，表明富硒茶不同溶劑部位有不同的利用價值。

基于超高效液相色譜串聯質譜技術（UPLC-MS）的代謝組學可提供樣品代謝物的大量信息，若結合模式識別方法對所得信息進行降維處理，可實現在將數據可視化的同時歸納總結各類數據，呈現多元數據的內在聯系的效果。Domínguez 等[8]通過建立PCA模型可視化了堿、酸和酶輔助3 種提取方法下百香果皮酚類化合物差異，為后續研究者獲取百香果皮目標酚類化合物而選擇高效的提取方法提供了參考。

目前我國鮮見百香果皮不同溶劑部位中多酚種類差別的研究，在此本研究以百香果皮粗提物和不同極性溶劑分級萃取物為研究對象，采用UPLC-MS 分析其化合物組成，并通過代謝組學技術表征百香果皮各分級萃取物代謝物差異，篩選差異代謝物并定量，選用多種抗氧化實驗評價各分級萃取物的體外抗氧化能力，尋找發揮抗氧化活性的關鍵多酚，以期為百香果皮相關抗氧化產品的精準開發提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

紫皮百香果（Passiflora edulisSims）2021 年7 月6 日采自四川省涼山彝族自治州德昌縣；石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、無水甲醇、無水乙醇 分析純，天津致遠化學試劑有限公司；DPPH、ABTS、6-羥基-2,5,7,8-四甲基色烷-2-羧酸（6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid,Trolox）上海麥克林公司；過硫酸鉀、硫酸亞鐵、氯化鐵、醋酸鈉、鹽酸 北京化工廠；2,4,6-三吡啶基三嗪（2,4,6-Tri（2-pyridyl）-s-triazine,TPTZ）上海源葉科技有限公司；原兒茶酸、對羥基苯甲酸、異槲皮苷、異葒草苷 純度≥98%，成都艾博克生物科技有限公司；乙腈、甲酸 色譜純，美國Sigma 公司。

KS-5200DA 液晶超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司；BHS-2 精密數顯恒溫水浴鍋 上海壘固儀器有限公司；R-215 旋轉蒸發儀 瑞士步琦公司；EnSpire 酶標儀 美國PerkinElmer 公司；Acquity UPLC I-Class 超高效液相色譜儀、PLUS Xevo G2XS QTOF MS 質譜儀 美國Waters 公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 百香果皮各分級萃取物總酚、總黃酮含量測定

1.2.1.1 樣品制備 百香果皮陰干粉碎，按照液料比20:1（mL/g），用70%乙醇，超聲提取30 min，抽濾回收上清液，剩余殘渣重復以上步驟2 次，合并上清液，旋蒸、吹干得百香果皮粗提物（CE）。超純水溶解粗提物浸膏，經石油醚、乙酸乙酯和正丁醇等比依次萃取，得各極性部位萃取液和剩余水部分，旋蒸、吹干得百香果皮石油醚部位（PE）、乙酸乙酯部位（EE）、正丁醇部位（BE）和水部位（WE）浸膏。浸膏得率計算公式為：

1.2.1.2 總酚含量測定 參考許夢圓[9]方法，以沒食子酸為標準品繪制標準曲線，得到線性回歸方程：y=0.0264x+0.1741（R2=0.9990），以每克干物質中沒食子酸當量（mg/g）計算總酚含量。

1.2.1.3 總黃酮含量測定 參考許夢圓[9]方法，以蘆丁為標準品繪制標準曲線，得到線性回歸方程：y=0.0414x+0.1094（R2=0.9990），以每克干物質中蘆丁當量（mg/g）計算總黃酮含量。

1.2.2 百香果皮分級萃取物中酚類化合物UPLCMS/MS 分析

1.2.2.1 樣品前處理 稱取百香果皮CE、PE、EE、BE和WE 浸膏各10 mg，用甲醇溶解至1 mL，3000 r/min高速離心10 min，過0.22 μm 濾膜。

1.2.2.2 標準溶液制備 準確稱取一定質量原兒茶酸、對羥基苯甲酸、異槲皮苷和異葒草苷，用甲醇定容。等濃度梯度稀釋酚類化合物標準品溶液，以標準品濃度為橫坐標，峰面積（mAU）為縱坐標，繪制各標準品標準曲線。樣品特征酚類化合物含量用每克百香果皮干重中所含標準品當量表示。

六是提升了人民調解組織的矛盾吸附化解能力?！耙徽臼健彼痉ù_認機制，為人民調解工作提供了堅強后盾，極大地提升了人民調解組織的社會公信力。該機制建立后，很多當事人慕名前來申請調解，并自覺為該機制進行義務宣傳。房山區信訪部門轉辦的信訪糾紛，絕大多數在法官的指導下得到及時化解和司法確認。這些措施，有效提升了房山區矛盾糾紛多元調解中心的社會影響力。僅一年多的時間，該中心就成功調處糾紛3000余起，矛盾吸附能力和化解能力顯著提升。

1.2.2.3 色譜條件 使用配備光電二極管陣列（PDA）探測器的Acquity UPLC 系統進行定性分析。色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18Column（130 ?,1.7 μm,2.1×100 mm）；流動相：A 相為0.1%甲酸水，B 相為乙腈；系統流速：0.4 mL/min；柱溫：35 ℃；樣品進樣量為2 μL；紫外檢測器設置為：210、280、350、520 nm；洗脫程序：0～0.5 min，1% B；0.5～25 min，1%～40% B；25～27 min，40%～100% B；27～29 min，100% B；29～31 min，1% B。

1.2.2.4 質譜條件 MS 參數設置如下：在負模式下工作的電噴霧電離（ESI）源，離子源溫度300 ℃，掃描范圍m/z：100～1200 Da，毛細管電壓為3.0 kV，錐孔電壓30 V，數據采集和處理采用Massynlyx 4.2。

1.2.3 百香果皮體外抗氧化能力分析

1.2.3.1 DPPH 自由基清除能力測試 參照Polatoglu等[10]的方法。用甲醇配制0.1 mmol/L 的DPPH 工作液及不同濃度梯度的樣品和BHT 溶液。分別吸取100 μL 不同濃度的樣品和100 μL 的DPPH 工作液加入96 孔板中，混勻，室溫25 ℃避光反應30 min，在517 nm 處測定吸光度值。以BHT 為陽性對照代替樣品按照以上步驟測定吸光度。DPPH 自由基清除能力計算公式為：

式中：A0為空白對照（甲醇+DPPH 工作液）的吸光度；A1為樣品的吸光度；A2為樣品空白（甲醇+樣品溶液）的吸光度。

1.2.3.2 ABTS+自由基清除能力測試 參考Ye 等[11]方法，用甲醇配制7 mmol/L 的ABTS 溶液和用超純水配制2.6 mmol/L 的過硫酸鉀溶液等體積混合，室溫下避光反應 12～16 h 備用。使用前用甲醇稀釋ABTS 儲備液使其在波長734 nm 處的吸光度為0.700±0.020。用甲醇配制0.1～0.7 mmol/L 濃度梯度的Trolox 標準溶液，吸取20 μL 各濃度Trolox 標準溶液和180 μL ABTS 工作液，充分混勻后在734 nm處測定吸光度，以Trolox 溶液濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制標準曲線。將樣品代替Trolox 標準溶液進行以上操作，所得吸光度值代入標準曲線，樣品ABTS 陽離子自由基清除能力以達到同樣消除率所需Trolox 質量（mmol TE/g）表示。

1.2.3.3 FRAP 法抗氧化測試 參考Chen 等[12]方法，分別配制0.3 mol/L 的醋酸鈉溶液、20 mmol/L 的FeCl3·6H2O 溶液、10 mmol/L 的TPTZ 由40 mmol/L鹽酸配制而成，上述溶液按照10:1:1 體積比例混合，得到FRAP 工作液避光備用。用甲醇配制0.05～0.80 mmol/L 濃度梯度的FeSO4溶液，吸取20 μL 各濃度FeSO4溶液和180 μL FRAP 工作液，充分混勻后在593 nm 處測定吸光度，以FeSO4溶液濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制標準曲線。將樣品代替FeSO4溶液進行以上操作，所得吸光度值代入標準曲線，樣品鐵離子還原能力以Fe2+當量表示（mmol Fe2+/g）。

1.3 數據處理

將1.2 所得質譜原始數據，導入代謝組學處理軟件Progenesis QI，進行基線過濾、峰識別、積分、保留時間校正、峰對齊和歸一化處理后，輸出得到保留時間、質荷比（m/z）和峰強度的數據矩陣（格式為.csv）。將數據矩陣導入SIMCA 軟件，進行PCA和OPLS-DA。采用Masslynx 4.2 進行峰提取和化合物鑒定。使用SPSS 19.0 進行單因素差異顯著性分析和抗氧化實驗數據處理，采用Pearson 法進行相關性分析。實驗重復3 次，結果用平均值±標準差（D）表示，以Origin 繪圖。

2 結果與分析

2.1 百香果皮分級萃取物酚類化合物成分分析

2.1.1 浸膏得率 百香果皮乙醇粗提物經石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取后，得率降低，由大到小依次為 CE（18.06%）＞WE（8.30%）＞BE（3.70%）＞EE（1.18%）＞PE（0.58%），表明分級萃取對百香果皮中的化合物實現了分離。

2.1.2 總酚、總黃酮含量 結果如圖1，CE 中總酚含量32.61 mg/g，高于哥倫比亞紫皮百香果皮（24.96 mg/g）[13]；總黃酮含量24.07 mg/g，約為廣西雜交紫皮百香果（P.edulisדTai-Nong No.1”）果皮（12 mg/g）的2 倍[14]，說明四川產紫皮百香果皮富含多酚。不同溶劑萃取物總酚、總黃酮含量呈現顯著性差異（P＜0.05），表明各溶劑對CE 中的多酚化合物實現了分離。結合得率分析可知，CE 得率最高，但測得總酚含量不高。EE 和BE 化合物得率較低，但等量浸膏中EE 總酚（62.42 mg/g）和總黃酮（43.90 mg/g）含量約為CE（32.61、24.07 mg/g）的2 倍，BE 總酚（47.63 mg/g）和總黃酮（28.84 mg/g）含量也顯著高于CE（P＜0.05），說明乙酸乙酯[15]和正丁醇[16]能高效富集CE 中羥基苯甲酸類（原兒茶酸）和黃酮醇類（蘆?。? 種類型的多酚。WE 浸膏得率僅次于CE，但總酚（11.83 mg/g）和總黃酮（10.12 mg/g）含量保留不到CE 的1/2，推測WE 富集了較多紫外響應差的大極性水溶性化合物。石油醚極性較小，PE 總酚（1.88 mg/g）和總黃酮（1.51 mg/g）含量最低，均約為CE 的6%，萃取的多酚種類與含量均較少。

圖1 百香果皮各分級萃取物總酚和總黃酮含量Fig.1 Total phenols and total flavonoids of different fractional extracts from P.edulis peel

2.1.3 酚類化合物鑒定 得到百香果皮粗提物和各分級萃取物總離子流圖（圖2），從中共鑒定出33 個酚類化合物（表1），各分級萃取物多酚數量存在差別，CE、BE 和EE 多酚化合物數量明顯較多，這是由于不同種類化合物在不同極性溶劑的溶解度有差異[7]。

表1 百香果皮各分級萃取物多酚化合物鑒定Table 1 Identification of phenolic compounds in different fractional extracts from P.edulis peel

圖2 百香果皮各分級萃取物的總離子流圖Fig.2 Total ion chromatograms of different fractional extracts from P.edulis peel

百香果皮粗提物和各分級萃取物中多酚種類也不同（圖3），EE 和BE 中羥基苯甲酸類和黃酮醇類化合物占比較大，與上文總含量分析結果一致，說明中等極性溶劑乙酸乙酯和較大極性溶劑正丁醇會更多富集粗提物中以原兒茶酸為代表的羥基苯甲酸類化合物和以蘆丁為代表的黃酮醇類化合物。PE 和WE 中酚類化合物種類較少，均只鑒定出2 個羥基苯甲酸類和2 個黃酮醇類化合物，可能原因是小極性溶劑石油醚更容易富集葉綠素等脂溶性成分，而經各極性溶劑萃取富集后，WE 只余留了少量多酚。

圖3 百香果皮各分級萃取物酚類化合物種類占比Fig.3 Proportion of phenolic compounds in different fractional extracts from P.edulis peel

2.2 百香果皮各分級萃取物化合物組成差異分析

構建無監督PCA 模型對百香果皮粗提物和各分級萃取物中的化合物進行差異分析。本次分析共提取出2 個包含化合物種類、數量和含量等信息的主成分，其方差解釋率分別是59.98%，37.82%，累計方差解釋率為97.80%，說明該模型精準性和預測能力可靠。百香果皮各部位多酚代謝物3 次生物學重復數據能夠較好地集中在一起，提示實驗樣品穩定，數據重復性好。

圖4 顯示，百香果皮各分級萃取物數據分布于不同象限。在x 軸方向上，PE、EE 和BE、WE 分立于x 的負半軸和正半軸。y 軸方向上，PE 和WE 分布于負半軸，與分布于正半軸的EE 和BE 明顯區分，表明PE、EE、BE 和WE 中化合物種類、數量及含量存在差異。CE 和BE 數據點沒有明顯分離，說明CE和BE 化合物種類數量或含量較為相似，這可能是因為乙醇和正丁醇僅相差2 個碳原子，結構相似，導致了二者對百香果皮中多酚化合物的相似溶解能力。

圖4 百香果皮各分級萃取物PCA（a）和OPLS-DA（b）圖Fig.4 PCA (a) and OPLS-DA (b) of different fractional extracts from P.edulis peel

OPLS-DA 模型表現出與PCA 類似的結果，PE、EE、BE 和WE 分別分布于第三、二、一和四象限，支持了不同極性萃取溶劑能夠有效區分百香果皮中多酚化合物的結論。此外，差異代謝物是區分不同溶劑萃取的關鍵信息，變量重要性投影（Variable Importance in Projection，VIP）可表示不同化合物對于區分不同組分貢獻大小，VIP≥1 為常見的差異代謝物篩選標準。本研究共指認了4 個VIP≥1 的酚類代謝物（表2）作為解釋百香果皮各分級萃取物差異性的代表化合物。

表2 百香果皮的顯著差異代謝物Table 2 Significantly differential metabolites of fractional extracts from P.edulis peel

2.3 百香果皮差異酚類化合物含量分析

采用外標一點法測定4 個差異代謝物含量（表3）。不同溶劑萃取物中各差異物含量區分明顯（P＜0.05），CE、EE 和BE 中差異代謝物的含量普遍高于PE 和WE。對羥基苯甲酸和原兒茶酸都是羥基苯甲酸類化合物，但原兒茶酸C6 位置比對羥基苯甲酸多一個OH，故分子極性增加，更易溶于極性較大的乙醇。因此，原兒茶酸在CE 的含量（152.40 μg/g）最高，EE（97.62 μg/g）和BE（27.97 μg/g）次之。對羥基苯甲酸則在極性適中的EE 中含量（653.44 μg/g）最高，其次為CE（556.65 μg/g）和BE（344.53 μg/g）。EE 中異槲皮苷（2420.64 μg/g）和異葒草苷（113.23 μg/g）含量最高，其異槲皮苷含量約為CE 的3 倍，高于香蕉百香果（Passiflora tripartitavar.Mollissima（Kunth）L.H.Bailey）果肉的9.80 μg/g[17]。異葒草苷是西番蓮屬的特征酚類化合物[18]，Da 等[19]研究發現黃果西番蓮果皮中異葒草苷含量為270～870 μg/g，紫皮百香果皮EE 中異葒草苷約為CE 的5 倍。這可能是由于異槲皮苷和異葒草苷均為黃酮單糖苷類化合物，極性適中，更易溶于中等極性溶劑乙酸乙酯。

表3 百香果皮各分級萃取物差異酚類化合物含量（μg/g）Table 3 Content of differential phenolic compounds in different fractional extracts from P.edulis peel (μg/g)

2.4 百香果皮各分級萃取物體外抗氧化活性分析

2.4.1 DPPH 自由基清除測試結果 百香果皮各分級萃取物DPPH 自由基清除能力與質量濃度呈現一定量效關系（圖5）。各組分間DPPH 自由基清除能力存在差異，陽性對照BHT、CE、EE 和BE 濃度—清除率曲線整體趨勢相似，WE、PE 與其他組分區分明顯。CE、EE、BE 和BHT 的SC50值差異不顯著（P＞0.05），單因素方差結果（表4）與圖5 結果一致，提示CE、EE 和BE 具有和陽性對照相似的DPPH自由基清除效果。EE 的DPPH 自由基清除能力最強（SC50=0.02 mg/mL），約是CE 的4 倍。BE 的SC50（0.06 mg/mL）約為CE 的1.5 倍，高于陽性對照BHT（SC50=0.04 mg/mL），說明乙酸乙酯和正丁醇有效富集了百香果皮粗提物中的抗氧化活性化合物。WE（SC50=0.26 mg/mL）和PE（SC50=0.30 mg/mL）自由基清除能力顯著低于CE（P＜0.05）。

表4 百香果皮各分級萃取物含量及體外抗氧化活性Table 4 Content and activity of different fractional extracts from P.edulis peel

圖5 百香果皮提取物各分級萃取物和BHT 對DPPH 自由基清除能力Fig.5 Scavenging effect of different fractional extracts from P.edulis peel and BHT on DPPH free radicals

2.4.2 ABTS+自由基清除實驗結果 Trolox 是水溶性維生素E 衍生物，與酚類化合物結構相似，均有C6～C3 以及羰基結構，被證實是最適合作為ABTS+自由基清除能力判斷的標準化合物。因此，酚類化合物抗氧化能力常以 Trolox 為當量表示[20]。以 Trolox標準溶液濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制標準曲線，得到回歸方程y=-1.996x+0.7180（R2=0.9993）。

由圖6 可知，百香果皮粗提物和各分級萃取物均具有ABTS+自由基清除能力，但存在顯著性差異（P＜0.05），由強到弱分別為：EE＞BE＞CE＞WE＞PE，與DPPH 自由基清除結果一致。CE 的ABTS+自由基清除能力為0.249 mmol TE/g，與甜果西番蓮（P.ligularisJuss）種籽有相似的ABTS+自由基清除能力（0.31～0.75 mmol TE/g）[21]。CE 經分級萃取后，ABTS+自由基清除能力明顯升高，EE ABTS+自由基清除能力（0.911 mmol TE/g）最強，約為CE（0.249 mmol TE/g）的4 倍，其次為BE（0.379 mmol TE/g），約為CE 的1.5 倍。證明乙酸乙酯和正丁醇有效富集了抗氧化活性化合物。WE 和PE 的ABTS+自由基清除能力較差，分別僅達到EE 的11%和7%。

圖6 百香果皮提取物各分級萃取物對ABTS+自由基清除能力Fig.6 Scavenging effect of different fractional extract from P.edulis peel on ABTS+ free radicals

2.4.3 FRAP 實驗結果 結果如圖7，百香果皮各分級萃取物均具有Fe2+還原能力，但Fe2+還原能力差異明顯，由高到低依次為：EE＞BE＞CE＞WE＞PE，與DPPH自由基和ABTS+自由基清除能力實驗結果一致。 EE 的Fe2+還原能力約是CE（0.212 mmol Fe2+/g）的2.5 倍，為0.505 mmol Fe2+/g。BE 的Fe2+還原能力（0.301 mmol Fe2+/g）也明顯高于CE，約是CE 的1.5 倍。而WE（0.143 mmol Fe2+/g）、PE（0.1 mmol Fe2+/g）的Fe2+還原能力顯著（P＜0.05）低于CE，PE 僅約為百香果皮CE 的1/2，但高于紫皮百香果葉醇提物Fe2+還原能力（0.078 mmol Fe2+/g）[22]。FRAP 基于SET 機制，該機制下物質抗氧化能力取決于其電離勢，酚類化合物給出電子將氧自由基轉化為陰離子從而達到還原效果，不同極性萃取物的多酚化合物物質組成及含量使其電離勢有所區別，并使其抗氧化能力存在差異[23]。

圖7 百香果皮提取物各分級萃取物鐵離子還原能力Fig.7 Iron reduction ability of different fractional extracts from P.edulis peel

上述體外抗氧化能力測試結果表明CE 具有良好抗氧化能力，但經過不同極性溶劑分級萃取后，各部位抗氧化能力明顯不同，EE 和BE 體外抗氧化活性增強，PE 和WE 活性減弱，說明乙酸乙酯和正丁醇高效富集了CE 中抗氧化活性物質。文獻報道對羥基苯甲酸[24]、異槲皮苷[25]和異葒草苷[26]的抗氧化能力優秀，而EE 中這3 個化合物含量高。此外EE中還鑒定出原花青素B2（28）等多個特有酚類化合物，原花青素B2 被報道有效消除羥自由基、超氧陰離子自由基和強有力的金屬螯合能力，是目前國際上公認的天然抗氧化劑[27]，由此推測這些化合物是EE高抗氧化力的原因。BE 鑒定出兒茶素衍生物[28]和咖啡酸衍生物[29]等具有高抗氧化性的酚類化合物，其中毛蕊異黃酮是中草藥黃芪的主要抗氧化活性成分[30]，由此BE 在體外抗氧化測試中表現僅次于EE的良好活性。酚類化合物種類與含量較少應該是造成PE 和WE 抗氧化活性較低的原因。

2.5 相關性分析

如圖8 所示，百香果皮總酚含量與ABTS+自由基清除能力、Fe2+還原能力呈顯著相關（P＜0.05），與DPPH 自由基清除能力呈極顯著相關（P＜0.01），總黃酮含量與Fe2+還原能力呈極顯著相關（P＜0.01），與DPPH、ABTS+自由基清除能力呈顯著相關（P＜0.05），提示百香果皮總酚對其發揮抗氧化能力貢獻突出，與Ghasemzadeh 等[31]發現總酚含量與抗氧化活性顯著相關的結果一致。

圖8 百香果皮各分級萃取物酚類物質含量與抗氧化活性相關性分析Fig.8 Correlation analysis between phenolic components and antioxidant capacity of different fractional extracts from P.edulis peel

相關性分析結果表明異槲皮苷和異葒草苷為百香果皮抗氧化活性化學標志物。異槲皮苷含量與ABTS+自由基清除能力和Fe2+還原能力顯著相關（P＜0.05），說明異槲皮苷對百香果皮發揮抗氧化能力貢獻顯著。Xue 等[32]發現酚類化合物糖基化對其抗氧化活性具有重要作用，異槲皮苷為C3-糖苷黃酮類化合物，而C3-糖基化有利于穩定糖苷的構象，增強自由基清除能力，這可能是異槲皮苷與百香果皮抗氧化活性顯著相關的原因。異葒草苷含量與ABTS+自由基清除能力和鐵離子還原能力相關系數均高達0.99，與DPPH 自由基清除能力相關性也較高，提示異葒草苷也對百香果皮抗氧化活性有貢獻。多羥基賦予黃酮高的抗氧化、螯合和促氧化活性[33]，而且黃酮B 環的鄰二羥基結構會進一步提高其抗氧化能力[34]，這可能是異葒草苷對百香果皮發揮抗氧化活性起突出貢獻作用的原因。

3 結論

百香果皮粗提物多酚豐富，經不同極性溶劑萃取后所得各部位的化合物和體外抗氧化活性均有差異，表明分級萃取能有效富集百香果皮各類型多酚，因此開發百香果皮抗氧化功能性產品時可進行分級提取，提高其利用效率。粗提物CE 抗氧化活性弱于乙酸乙酯萃取物EE 和正丁醇萃取物BE，提示粗提物中存在不發揮抗氧化活性的化合物，且也存在分子間相互拮抗作用減弱其總抗氧化活性。乙酸乙酯可有效富集以C6～C1 構型為主的酚酸類化合物和黃酮醇類化合物，表現出強于百香果皮粗提物的抗氧化能力，展現了開發為百香果皮高品質抗氧化相關產品的潛力。BE 差異酚類物質含量和抗氧化活性僅次于EE，其酚類物質種類與含量豐富，且次級代謝物富集得率高，也是百香果皮抗氧化活性酚類物質產品開發的高價值部位?？偡雍涂傸S酮是百香果皮發揮抗氧化能力的重要物質基礎，其中的異槲皮苷和異葒草苷是抗氧化活性化學標志物。本研究為百香果皮抗氧化產品開發質量標準建立提供了基礎數據，為促進百香果產業副產物的精準高效開發，科學拓展百香果產業鏈提供了支持。