渤海灣毛蚶人工育苗技術(shù)研究

曾海祥 敬中華 張新峰 張凱

摘 要：為提高毛蚶（Scapharca subcrenata）人工育苗技術(shù)，在濱州無(wú)棣沿海開(kāi)展毛蚶人工育苗試驗(yàn)，摸索出了適合本地區(qū)的毛蚶親貝培育、催產(chǎn)孵化、幼體培育和稚貝培育的技術(shù)方法。采自濱州海區(qū)的毛蚶親貝經(jīng)過(guò)一個(gè)月的培育，95%個(gè)體性腺發(fā)育成熟，經(jīng)過(guò)陰干流水刺激后自然產(chǎn)卵，在水溫25.0～28.0 ℃的條件下，孵化率90%以上，毛蚶幼體18 d左右平均殼長(zhǎng)320 μm，進(jìn)入變態(tài)附著期。附著階段采用海泥作為附著基，附著效果好，附著變態(tài)率在50%以上，稚貝最適生存鹽度為20‰～35‰。育苗試驗(yàn)共獲得毛蚶稚貝5 980萬(wàn)粒。

關(guān)鍵詞：渤海灣；毛蚶（Scapharca subcrenata）；人工育苗

毛蚶（Scapharca subcrenata）俗稱(chēng)毛蛤、蚶子， 味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，具有藥用價(jià)值，是一種重要的經(jīng)濟(jì)貝類(lèi)。毛蚶為廣溫廣鹽性貝類(lèi)，在我國(guó)南北方沿海均有分布，渤海灣沿岸是我國(guó)重要的毛蚶資源分布區(qū)，但近些年來(lái)毛蚶資源減少，急需開(kāi)展毛蚶人工育苗和增養(yǎng)殖，恢復(fù)毛蚶資源，滿(mǎn)足市場(chǎng)需求。

渤海灣沿岸是毛蚶資源的一個(gè)重要分布區(qū)域，擁有大量適合毛蚶養(yǎng)殖的池塘和灘涂，需要大量的毛蚶苗種。近些年，有關(guān)毛蚶基礎(chǔ)生物學(xué)[1-2]、人工育苗[3-6]和養(yǎng)殖[7-9]方面的研究相繼開(kāi)展，渤海沿岸的各個(gè)省市對(duì)毛蚶資源修復(fù)工作也非常重視，在毛蚶苗種繁育及底播增殖放流等方面做了很多工作，孫同秋等[10-12]在毛蚶苗種繁育及增養(yǎng)殖方面的研究成果也在黃河三角洲沿海地區(qū)進(jìn)行推廣了應(yīng)用。但目前渤海灣地區(qū)繁育的毛蚶苗種無(wú)法滿(mǎn)足本地區(qū)開(kāi)展增養(yǎng)殖的需求，毛蚶人工育苗存在短板，苗種的規(guī)模化生產(chǎn)技術(shù)仍不成熟，原先的育苗方法需要改進(jìn)。2022年和2023年6—8月份，在濱州本地育苗場(chǎng)開(kāi)展了毛蚶育苗試驗(yàn)，改進(jìn)了育苗方法，取得了成功，為開(kāi)展毛蚶人工育苗的規(guī)模化生產(chǎn)和中間培育打下了良好的基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 親貝 毛蚶親貝采自濱州沿海灘涂，選取毛蚶100 kg，放在無(wú)棣沿海育苗場(chǎng)進(jìn)行親體強(qiáng)化培育。育苗前從毛蚶個(gè)體中挑選二齡至三齡，殼長(zhǎng)4.0～5.0 cm，個(gè)體健康、閉殼肌閉合有力、貝殼無(wú)機(jī)械損傷的毛蚶作為育苗的親貝。

1.1.2 育苗設(shè)施的準(zhǔn)備 育苗池為室內(nèi)水泥池，面積48 m2，池底坡度10％左右，斜向出水口，有進(jìn)排水、加熱、控光和充氣設(shè)施。每個(gè)育苗池安裝氣頭30個(gè)，按10×3分布，各氣頭均安裝瓷墜，以免氣頭漂浮于水面。單細(xì)胞藻類(lèi)培養(yǎng)包括保種室、一二級(jí)培養(yǎng)車(chē)間和三級(jí)培養(yǎng)車(chē)間，二級(jí)培養(yǎng)車(chē)間使用塑料桶作為培育容器，三級(jí)培養(yǎng)車(chē)間與育苗車(chē)間相同，增加燈光照明裝置。水處理設(shè)施包括蓄水池、沉淀池、二級(jí)砂濾池和超濾設(shè)備。砂濾池使用前進(jìn)行清洗消毒處理，向砂濾池中加水至砂層上10㎝左右，然后加入消毒劑，浸泡消毒過(guò)夜，第二天用新水沖洗砂濾池5至6次。使用后定期清洗，去除砂濾池里的雜質(zhì)，保證過(guò)濾效果，防止砂濾池堵塞。

1.2 育苗方法

1.2.1 親貝培育 毛蚶親貝在育苗車(chē)間的水泥池中培育。挑選好的親貝放于塑料筐中養(yǎng)殖，每天檢查親貝情況，及時(shí)撿出死亡個(gè)體，以免污染水質(zhì)。每天換水二分之一，同時(shí)根據(jù)水質(zhì)情況不定期進(jìn)行倒池。每天投喂單胞藻，主要包括金藻、角毛藻、扁藻，同時(shí)投喂螺旋藻粉和酵母進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化，投喂量根據(jù)親貝濾食情況進(jìn)行調(diào)整。

1.2.2 餌料培養(yǎng) 單胞藻營(yíng)養(yǎng)豐富，生長(zhǎng)繁殖快，易培養(yǎng)，是貝類(lèi)的優(yōu)質(zhì)適口餌料。貝類(lèi)育苗經(jīng)常使用的藻類(lèi)有球等鞭金藻、叉鞭金藻、小球藻、牟氏角毛藻、亞心形扁藻。

藻類(lèi)培養(yǎng)使用三級(jí)培養(yǎng)法。一級(jí)培養(yǎng)的培養(yǎng)容器為5 000 mL燒瓶，選擇生命力旺盛，無(wú)污染的藻液做為藻種進(jìn)行培養(yǎng)。將藻種上清液緩慢倒入消毒后的玻璃瓶中，然后加入合適濃度的培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中應(yīng)添加硝酸鈉、磷酸二氫鉀、檸檬酸鐵、硅酸鈉、乙二胺四乙酸鈉 （EDTA）、維生素B1、維生素B12等主要營(yíng)養(yǎng)鹽，根據(jù)所擴(kuò)藻類(lèi)的不同，添加量做相應(yīng)調(diào)整。

二級(jí)培養(yǎng)的培養(yǎng)容器為1 000 L、600 L塑料桶和19 L的礦泉水桶，培養(yǎng)用水為煮過(guò)的海水或消毒劑處理過(guò)的海水。擴(kuò)種時(shí)先用泵將消毒后的海水打入桶中，然后將藻液加入，最后加入相應(yīng)營(yíng)養(yǎng)鹽。接種量為1∶10～1∶20，接種后24 h連續(xù)充氣，夜間使用日光燈照射，經(jīng)3～6 d即可供三級(jí)生產(chǎn)性培養(yǎng)使用。

三級(jí)培養(yǎng)一般在藻類(lèi)培養(yǎng)車(chē)間的水泥池中進(jìn)行開(kāi)放式充氣培養(yǎng)。培養(yǎng)用水需經(jīng)次氯酸鈉、漂白粉或其他氯制劑的消毒處理。培養(yǎng)方法與二級(jí)培養(yǎng)基本相同，接種量根據(jù)情況掌握，但不宜低于1∶30。充氣量達(dá)到藻液翻騰，一般經(jīng)3～6 d培養(yǎng)，藻細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)，即可用于投喂幼體和稚貝等。也可使用光生物反應(yīng)器進(jìn)行藻類(lèi)三級(jí)培養(yǎng)，光生物反應(yīng)器具有較高的光能利用率，能實(shí)現(xiàn)微藻的高濃度培養(yǎng)，有的藻類(lèi)培養(yǎng)密度可以達(dá)到每毫升千萬(wàn)的密度，而且不易污染。

1.2.3 催產(chǎn)與孵化 催產(chǎn)前清洗親貝，用毛刷輕刷親貝殼面浮泥和雜物，再用過(guò)濾海水沖洗至殼面潔凈。親貝健康情況下盡量不消毒，避免出現(xiàn)不良反應(yīng)，對(duì)產(chǎn)卵帶來(lái)負(fù)面影響。清洗后稱(chēng)重，放入準(zhǔn)備好的塑料筐中，每框5 kg左右，準(zhǔn)備完畢后進(jìn)行陰干。陰干后開(kāi)始催產(chǎn)，每個(gè)育苗池放三筐親貝，充氣進(jìn)行流水刺激，誘導(dǎo)精卵排放。產(chǎn)卵過(guò)程中要經(jīng)常觀察育苗池，及時(shí)撈出泡沫。孵化密度不宜過(guò)高，過(guò)高將影響受精卵的正常發(fā)育，推遲擔(dān)輪幼蟲(chóng)發(fā)育至D形幼蟲(chóng)的時(shí)間，且易導(dǎo)致D形幼蟲(chóng)發(fā)育畸形等不良情況出現(xiàn)。產(chǎn)卵量已足夠的育苗池要把親貝調(diào)整到產(chǎn)卵量少的育苗池，各個(gè)育苗池產(chǎn)卵量都足夠后，將親貝移除。

1.2.4 幼體培育 幼體完全發(fā)育為D形幼蟲(chóng)后開(kāi)始倒池選優(yōu)。倒池時(shí)用300目網(wǎng)袋套到育苗池排水管出口處，用氣線扎緊，網(wǎng)袋主要部分放在塑料大盆中，將另一端吊高一點(diǎn)。剛開(kāi)始排水時(shí)要把排水口用塞子半封閉，以免水流沖擊過(guò)大，損失幼體。當(dāng)網(wǎng)袋中幼體密度達(dá)到一定量時(shí)，從網(wǎng)袋的另一端將幼體收集起來(lái)放入準(zhǔn)備好的幼體培育池。育苗池水溫保持在25～28 ℃，鹽度24‰～30‰，每池幼體密度保持在10 ind./mL左右。第一次倒池后開(kāi)始投喂，每天投喂四次，分別為2：00、8：00、14：00、20：00，日投喂單胞藻數(shù)量為1×105 ind./mL。隨著幼體的生長(zhǎng)增加投喂量，投喂量要依據(jù)水體顏色以及幼體攝食情況進(jìn)行調(diào)整。幼體培育早期主要投喂金藻，中后期增加角毛藻、扁藻，餌料不足時(shí)投喂?jié)饪s小球藻。育苗池每天換水20 cm，根據(jù)水質(zhì)情況不定期進(jìn)行倒池。

1.2.5 稚貝培育 幼體附著變態(tài)前在育苗池投放附著基。附著基使用海泥，每池投放海泥5 kg，投放前用燒開(kāi)的淡水燙一下，待1 h后攪拌均勻，用200目網(wǎng)袋過(guò)濾后，均勻潑入池中。幼體全部附著后定期倒池，倒池時(shí)需將池底的海泥和附著的苗用水泵沖干凈，用120目網(wǎng)袋接苗，經(jīng)充分清洗，60目篩網(wǎng)過(guò)濾雜質(zhì)后，投入新準(zhǔn)備好的育苗池。倒池間隔時(shí)間從前期的4～5 d逐漸延長(zhǎng)至10～15 d。稚貝在培育池主要投喂角毛藻和扁藻，每天投喂四次，投喂時(shí)間分別為2：00、8：00、14：00、20：00，日投喂單胞藻數(shù)量為5×105 ind./mL，后期減少投喂人工培養(yǎng)的單胞藻，增加外塘水中的自然藻類(lèi)，加大換水量，每天換水100％～150％。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 親貝培育情況

親蚶在培育初期，死亡率較高，第一天死亡率5%左右，后續(xù)幾天死亡率逐漸降低，養(yǎng)殖15 d以后基本不再出現(xiàn)死亡，親貝進(jìn)入穩(wěn)定生長(zhǎng)發(fā)育階段。培育一個(gè)月左右，六月初95%的雌雄個(gè)體已經(jīng)發(fā)育成熟，性腺飽滿(mǎn)，覆蓋整個(gè)內(nèi)臟團(tuán)，劃開(kāi)性腺后，雌體呈橘紅色，雄體為乳白色。雌體卵子呈橢圓形，淡黃色，略透明，卵徑60～70 μm；雄體精子滴加海水后，游動(dòng)活潑，活力好。

2.2 幼體和稚貝生長(zhǎng)情況

毛蚶幼體和稚貝生長(zhǎng)情況如圖1所示，在水溫25.0～28.0 ℃情況下受精卵經(jīng)過(guò)20 h左右的發(fā)育進(jìn)入D形幼蟲(chóng)期。D形幼蟲(chóng)初始?xì)らL(zhǎng)約80 μm，早期D形幼蟲(chóng)殼長(zhǎng)每天增長(zhǎng)10 μm左右，殼頂幼蟲(chóng)期生長(zhǎng)速度加快，18 d后平均殼長(zhǎng)320 μm，幼體開(kāi)始附著變態(tài)，出現(xiàn)伸足現(xiàn)象。以海泥做附著基，附著變態(tài)率在50%以上，幼體附著后開(kāi)始出現(xiàn)透明且不規(guī)則的次生殼，稚貝形狀也由比較規(guī)則的近似橢圓形變得不規(guī)則，隨著稚貝生長(zhǎng)，毛蚶稚貝貝殼顏色變深，出現(xiàn)放射肋，逐漸變成毛蚶成貝的形狀。稚貝生長(zhǎng)速度加快，30 d后毛蚶稚貝平均殼長(zhǎng)已達(dá)610 μm左右。

2.3 鹽度對(duì)稚貝存活的影響

為探討鹽度對(duì)毛蚶稚貝存活的影響， 設(shè)置7個(gè)鹽度梯度（10‰、15‰、20‰、25‰、30‰、35‰和40‰）， 每個(gè)梯度設(shè)3 個(gè)重復(fù)。通過(guò)向自然海水中添加充分曝氣的自來(lái)水和海鹽調(diào)節(jié)鹽度，配制成不同鹽度的海水。試驗(yàn)時(shí)間10 d。試驗(yàn)結(jié)果（圖2）表明，鹽度對(duì)毛蚶稚貝的成活率有顯著影響，到試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，10‰鹽度組全部死亡，15‰鹽度組成活率23%，20‰～35‰鹽度組成活率均在85%以上，40‰鹽度組成活率63%。

2.4 育苗結(jié)果

毛蚶育苗試驗(yàn)共獲得稚貝5 980萬(wàn)粒，完善了毛蚶育苗的技術(shù)環(huán)節(jié)，達(dá)到了環(huán)渤海地區(qū)毛蚶育苗的領(lǐng)先水平。

3 討論

3.1 毛蚶的親貝培育

剛采捕的毛蚶親貝在暫養(yǎng)培育初期死亡率很高，是毛蚶親貝培育的一個(gè)難點(diǎn)，其中主要的原因可能是毛蚶的采捕使用的是機(jī)械捕撈，毛蚶受傷比較嚴(yán)重，很多個(gè)體貝殼完整，外表沒(méi)有殘缺，但軟體部有損傷，所以受傷嚴(yán)重的個(gè)體在培育初期陸續(xù)死亡，最高死亡率可達(dá)到60%以上。所以在采捕親貝的時(shí)候一定要采取合適的方式，在條件許可的時(shí)候采用人工捕撈的方式，盡量減少對(duì)親貝的損傷。

親貝性腺如果發(fā)育不好，卵子個(gè)體小，大小不均勻，孵化的浮游幼體會(huì)出現(xiàn)發(fā)育不整齊，大小懸殊，死亡率高，生長(zhǎng)速度慢的現(xiàn)象。所以在親貝培育中也要加強(qiáng)投喂管理，盡量做到營(yíng)養(yǎng)均衡，除了投喂金藻、扁藻等鮮活藻類(lèi)外，還要投喂螺旋藻粉和酵母進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化，保證親貝性腺發(fā)育良好。

3.2 附著基的選擇和投放時(shí)間

毛蚶是一種灘涂底棲貝類(lèi)，略含沙的泥質(zhì)灘涂是其適宜的棲息環(huán)境，毛蚶殼頂幼蟲(chóng)后期其形態(tài)發(fā)生一個(gè)比較復(fù)雜的變化，生活習(xí)性也從浮游逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榈讞街睿藭r(shí)間段是否具有合適的附著基是其能不能成功轉(zhuǎn)變?yōu)橹韶惖年P(guān)鍵因素。北方的毛蚶育苗在幼體附著變態(tài)階段的附著基一般使用聚乙烯網(wǎng)片和棕繩，附著效果一般，后續(xù)操作比較麻煩，不利于成貝養(yǎng)殖。根據(jù)毛蚶的生活習(xí)性并借鑒其他貝類(lèi)的育苗經(jīng)驗(yàn)，這次試驗(yàn)采用海泥作為附著基，符合毛蚶的自然生活習(xí)性，附著效果好，易于操作和后續(xù)的養(yǎng)殖，是一個(gè)值得推廣的方法。

附著基的投放時(shí)間也非常重要，合適的投放時(shí)間會(huì)提高幼體的附著變態(tài)率。本試驗(yàn)在幼體殼長(zhǎng)280 μm以上，10%出現(xiàn)眼點(diǎn)時(shí)投放海泥附著基，附著變態(tài)率在50%以上，附著效果好。雖然毛蚶浮游幼體在沒(méi)有投放附著基的情況下也可以少量在水泥池底部附著，但附著率低，效果不好，及時(shí)投放附著基可以顯著提高附著變態(tài)率，增加稚貝的數(shù)量，所以一定要把握好附著基投放時(shí)間。

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Study on artificial breeding technology of Scapharca subcrenata in Bohai Bay

ZENG Haixiang，JING Zhonghua，ZHANG Xinfeng，ZHANG Kai

（Binzhou Institue of Ocean Development Research，Binzhou 256616，China）

Abstract：To improve artificial breeding technology of Scapharca subcrenata， an artificial breeding experiment of S. subcrenata was carried out on the coast of Wudi in Binzhou， and suitable technical method was found for the cultivation of parent shells， hatching， larval cultivation， and juvenile cultivation in this area. After one month of cultivation， about 95% of the parent shells of Scapharca subcrenata from the Binzhou sea area developed mature gonads and naturally laid eggs after being stimulated by air-dried and shady water. At a water temperature of 25.0～28.0 ℃， hatching rate of fertilized egg exceeded 90% ， average shell length of the larvae was 320 μm after about 18 days， entering the metamorphosis attachment period. During the attachment stage， sea mud was used as the attachment base， which had a good attachment effect. The attachment deformation rate was above 50%， and the optimal survival salinity for juvenile was 20‰～35‰. A total of 5.98×107 juveniles were obtained in the seedling cultivation experiment.

Key words：Bohai Bay; Scapharca subcrenata; artificial breeding