宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平與細胞凋亡指數相關性的研究

吳 倩,張 微,方呈祥

(湖北民族大學附屬民大醫院,湖北 恩施 445000)

宮頸癌是常見的女性生殖器官惡性腫瘤,其發生發展與人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染、免疫抑制、性生活過早、性伴侶過多、生育年齡過早、生育次數多等多種因素密切相關[1-2]。宮頸癌患者臨床表現為陰道異常流血,白色或血性、水樣或米泔水樣有腥臭味的陰道排液等,其嚴重影響患者的正常生活[3-4]。另外,宮頸癌患者早期癥狀并不明顯,待患者自覺癥狀明顯入院檢查時病情已發展至中晚期,治療效果不佳,預后較差。目前,宮頸癌的發病率和死亡率逐漸增加,使患者的生命受到了嚴重地威脅,對宮頸癌的防范與治療也帶來了巨大挑戰。鱗狀細胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)是臨床上常用的宮頸癌輔助診斷標志物[5];糖鏈抗原125(carbohydrate antigen125,CA125)也是近年來腫瘤研究領域的熱點[6],其可作為腫瘤標志物用于宮頸癌的診斷及預后評估[7];可溶程序性死亡分子1(programmed death ligand-1,PD-L1)與腫瘤免疫逃逸和耐受密切相關[8]。細胞凋亡在腫瘤的發生發展及轉歸中均發揮著重要作用[9],細胞凋亡指數可作為宮頸癌潛在的診斷指標[10]。本研究比較了宮頸癌患者與健康婦女的血清SCC、CA125及PD-L1水平及細胞凋亡指數,并分析了宮頸癌患者不同臨床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的變化情況及其與細胞凋亡指數的相關性,為臨床宮頸癌的治療提供參考依據。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

選取2020年10月至2022年2月在湖北民族大學附屬民大醫院就診的76例宮頸癌患者為實驗組。納入標準:①患者均經過陰道活檢、病理檢查等確診為宮頸癌;②均為首次確診;③未進行過相關治療;④臨床資料完整。排除標準:①伴有其他惡性腫瘤;②自身免疫系統疾病;③嚴重的心肺肝腎功能不全;④伴有其他宮頸類疾病。另選同時期來院進行體檢的76例健康女性為對照組。實驗組的年齡為33～71歲,平均年齡(52.50±8.62)歲;對照組的年齡為31～72歲,平均年齡(53.55±9.15)歲,兩組的年齡比較差異無統計學意義P>0.05)。

本研究經我院醫學倫理委員會批準(編號:20200208),患者及家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1血清SCC和CA125及PD-L1水平的測定

收集實驗組患者入院次日及對照組體檢者的清晨空腹靜脈血5mL,保存于EDTA抗凝管,靜置30～120min,以3 500r/min離心15min,分離上層血清,通過全自動電化學發光免疫分析儀及配套試劑盒檢測血清SCC、CA125、PD-L1水平。

1.2.2細胞凋亡指數的檢測

采用流式細胞術檢測細胞凋亡指數。實驗組取宮頸癌組織、對照組取正常宮頸組織,浸于磷酸鹽緩沖液,剪碎過篩,制成單細胞懸液,濃度為1×106/mL,取1mL單細胞懸液,離心、棄上清,加1mL磷酸鹽緩沖液,離心、棄上清,預冷的70%乙醇固定細胞,于4℃冰箱過夜。次日離心、棄上清,磷酸鹽緩沖液漂洗,加Pnase合成期酶37℃作用30min,加50μg/mL碘化丙啶1mL,4℃避光染色20min,過濾,CELLQUEST軟件計算細胞凋亡指數。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 兩組血清SCC、CA125及PD-L1水平的對比

實驗組的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 兩組血清SCC、CA125及PD-L1水平的比較

2.2 兩組細胞凋亡指數的對比

實驗組的細胞凋亡指數為(6.87±2.89),對照組的凋亡指數為(2.44±0.56),實驗組的細胞凋亡指數高于對照組(t=13.132,P<0.001)。

2.3 宮頸癌患者不同臨床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的對比

臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05);腫瘤分化程度為高分化宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于中分化者,且中分化者均高于低分化者(P<0.05);淋巴結轉移宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于淋巴結未轉移者(P<0.05);不同病理分類宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平比較差異均無統計學意義P>0.05),見表2。

表2 宮頸癌患者不同臨床病理特征血清SCC、CA125及PD-L1水平的比較

2.4 宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平與細胞凋亡指數的關系

宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平均與細胞凋亡指數呈正相關(r值分別為0.689、0.662、0.495,P<0.001),各散點圖均由左下角區域分布到右上角區域,見圖1。

圖1 宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平與細胞凋亡指數相關性散點圖

3 討論

宮頸癌是女性中常見的生殖系統惡性腫瘤,近年來其發病率及病死率有所增加,對女性的身體健康和生命安全造成了極大的威脅[11]。早期宮頸癌患者的臨床表現及體征并不明顯,且不具備特異性,待癥狀明顯已進展為浸潤癌,此時腫瘤細胞突破基底膜,侵入血管、淋巴管,易發生淋巴結血行轉移,治療效果不佳,預后較差[12]。因此,探索與宮頸癌病情相關的指標并分析其與臨床病理特征的關系對早期宮頸癌的診斷及防治具有參考意義。目前,隨著醫療技術的進步與生物、免疫學的發展,血清學指標檢測以操作簡便、用時較短成為重要的檢查手段,已廣泛應用于癌癥的監測中,參考價值較高。本研究對比了宮頸癌患者與健康婦女血清SCC、CA125及PD-L1水平及細胞凋亡指數,并觀察了不同臨床病理特征宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平的變化情況,分析了血清SCC、CA125及PD-L1水平與細胞凋亡指數的關系,為宮頸癌的早期診斷及治療提供參考依據。

3.1 血清SCC和CA125及PD-L1水平與宮頸癌的關系

SCC是存在于口腔、肺、子宮、子宮頸等鱗狀上皮細胞的細胞質中的一種抗原,其分泌、合成與機體內的鱗癌細胞密切相關,能夠調控細胞凋亡過程,還參與細胞外基質降解及癌細胞轉移、侵襲等過程[13]。相關研究指出,鱗狀細胞發生惡性改變時,SCC的基因表達與調控出現異常改變,蛋白質的合成也受到干擾,引起SCC基因活化,使其分泌與合成大量增加,從而出現SCC異常高表達[14]。CA125是與卵巢癌診斷相關的一種大分子糖蛋白,其表達水平在卵巢癌的早期診斷、病情監測及預后評估中具有重要意義。有研究表明,在子宮內膜、宮頸內膜、輸卵管等機體組織中均檢測出CA125,另外,約有半數以上的宮頸癌患者存在血清CA125水平異常升高,且其水平變化與臨床分期及淋巴結轉移也密切關聯[15]。宮頸癌的發病與免疫逃逸及免疫監視功能減弱存在密切相關性,PD-L1與宮頸癌的發病、病情進展存在密切聯系。PD-L1屬于協同抑制因子,在多種細胞中表達,其與T細胞抑制信號密切相關,能夠降低患者體內抗腫瘤免疫反應,協助腫瘤細胞進行免疫逃逸,促進腫瘤發展[16]。有研究表明,宮頸癌伴有PD-L1異常高表達[17]。本研究通過電化學發光法測定宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平發現,宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均高于健康女性,提示血清SCC、CA125及PD-L1水平與宮頸癌的發病密切相關。

3.2 血清SCC和CA125及PD-L1水平與細胞凋亡指數的關系

細胞凋亡是細胞的一種基本生物學現象,其在內環境的穩定中發揮著重要作用,在癌癥患者體內,細胞凋亡對腫瘤的發展、治療同樣發揮著重要作用[18]。本研究進一步檢測兩組的細胞凋亡指數,結果顯示,與對照組相比,實驗組的細胞凋亡指數顯著增加,表明宮頸癌的發病與細胞凋亡水平有關。隨著病情嚴重程度的進展,細胞凋亡指數發生改變,破壞了宮頸上皮細胞原有的平衡,導致病情加重。本研究又進一步檢測了宮頸癌患者不同臨床病理特征的血清SCC、CA125及PD-L1水平,并分析其與細胞凋亡指數的關系,結果顯示,伴有臨床分期加重、腫瘤分化程度增加、出現淋巴結轉移的宮頸癌患者,其血清SCC、CA125及PD-L1水平增幅更大(P<0.05),而不同病理分類(鱗狀細胞癌與腺癌)的血清SCC、CA125及PD-L1水平比較差異均無統計學意義(P>0.05);另外,宮頸癌患者的血清SCC、CA125及PD-L1水平均與細胞凋亡指數呈正相關,提示血清SCC、CA125及PD-L1水平可能與宮頸癌的進展有關,臨床可將其作為監測、診斷及治療宮頸癌的參考指標。

但本研究也存在一定的局限性,一方面,患者來源單一且樣本數較少,研究結果缺乏廣泛性;另一方面,關于血清SCC、CA125及PD-L1水平的變化與宮頸癌進展相關的機制通路尚不清楚,因此仍需進一步研究探索。

綜上所述,宮頸癌患者血清SCC、CA125及PD-L1水平顯著升高,與臨床分期、腫瘤分化程度及淋巴結轉移密切關聯,且與細胞凋亡指數均呈正相關,提示臨床上可將血清SCC、CA125及PD-L1作為對宮頸癌早期診斷和治療的重要檢測指標。