奶牛乳源外泌體提取方法的優化及效果評價

趙 瑩 王靖雷 王 萌 王立斌,2 張 倩 李志杰 馬 鑫 余四九,2 潘陽陽,2*

(1.甘肅農業大學動物醫學院,蘭州 730070;2.甘肅省牛羊胚胎工程技術研究中心,蘭州 730070 )

外泌體是一種外形呈圓形或橢圓形,有部分凹陷,樣似“茶托”形,介于30～200 nm雙層膜結構的納米級細胞外囊泡[1]。外泌體是由活細胞內出芽方式分泌產生形成的內吞小體,并以胞吐方式釋放到細胞間隙,當受體細胞接收后發揮作用,從而達到細胞間信息交流[2]。外泌體可存在于機體大部分體液中,如乳液、唾液、羊水、腹水、血液、尿液、腦脊液等[3],且免疫系統細胞、脂肪細胞、腫瘤細胞、內皮細胞、間質細胞、肥大細胞、成纖維細胞等許多細胞均可分泌外泌體[4]。外泌體由脂質、蛋白質和核酸(DNA、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等)組成[5],因有脂質雙分子層保護,可穩定存在。

荷斯坦奶牛乳中含豐富外泌體[6],由乳腺上皮細胞分泌產生,并包裹蛋白質、核酸、聚糖、脂質等具有生物活性的內含物,內含物被受體接收后進行細胞間信息傳遞、細胞傳遞、血管新生、免疫應答、炎癥反應、抗氧化、腫瘤細胞生長等[7]。Munagala等[8]研究發現,乳源外泌體可作為藥物載體達到靶向治療作用;Hock等[9]研究發現,乳源外泌體可提高腸道上皮細胞活力,促進細胞增殖并刺激腸道干細胞活性的提高,用乳源外泌體給藥可防止壞死性結腸炎發生;Samuel等[10]研究發現,乳源外泌體富含與免疫應答和生長有關的蛋白質,通過調節這些蛋白質可調節機體免疫機能和生長修復;駱駝乳來源外泌體可抑制乳腺腫瘤細……